一种GS表达系统细胞株的筛选方法技术方案

本发明专利技术涉及一种GS表达系统细胞株的高通量筛选方法。在氨基亚砜蛋氨酸加压后，选择细胞活力在25％～35％的细胞池进行单克隆化筛选，将细胞池加入到含有10％条件培养基的半固体培养基上形成单克隆(细胞终浓度为150cells/mL)，再利用高通量细胞筛选系统筛选并扩大培养获得高表达的细胞株，最后对筛选的高表达细胞株进行稳定性评估。通过本发明专利技术方法，更容易获得90％稳定率以上的细胞株。

【技术实现步骤摘要】
201610173410

【技术保护点】
一种GS表达系统细胞株的高通量筛选方法，其特征在于，由以下步骤组成：(1)在氨基亚砜蛋氨酸加压后，选择细胞活力在25％～35％的细胞池进行单克隆化筛选；(2)将步骤(1)所述的细胞池加入到含有10％(体积比)条件培养基和甲基纤维素(0.9～1.5g/mL)的半固体培养基上形成单克隆，细胞终浓度为150cells/mL；(3)利用高通量细胞筛选系统筛选细胞株；(4)对步骤(3)中筛选出来的细胞株进行稳定性评估；其中，步骤(2)所述条件培养基的制备方法为：取含GS空载体稳转的GS稳定细胞株进行批培养，细胞培养至密度在0.9×107～1.1×107cells/mL之间且细胞活力>95％时，经过离心分离上清和细胞，取上清用膜过滤处理后待用。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：刘静，张彩霞，李扬，杨彬，孙文正，倪健，
申请(专利权)人：广东东阳光药业有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44