针对胞内劳森菌和猪圆环病毒2型的疫苗制造技术

本发明专利技术涉及包含灭活全细胞胞内劳森菌细菌和猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2蛋白质组合的疫苗，用于通过该疫苗的皮内施用而保护猪对抗胞内劳森菌和PCV2的感染。本发明专利技术还涉及保护猪对抗胞内劳森菌细菌和PCV2感染的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利摘要】本专利技术涉及包含灭活全细胞胞内劳森菌细菌和猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2蛋白质组合的疫苗，用于通过该疫苗的皮内施用而保护猪对抗胞内劳森菌和PCV2的感染。本专利技术还涉及保护猪对抗胞内劳森菌细菌和PCV2感染的方法。【专利说明】针对胞内劳森菌和猪圆环病毒2型的疫苗 本专利技术的一般领域 本专利技术一般性地涉及猪健康领域。猪易感许多致病性微生物。感染的控制通常是 通过饲养场所和饲料的管理，用药物(如抗病毒药和抗生素）治疗，或使用疫苗的预防性治 疗而完成的。 本专利技术的目的 对于用于猪健康管理的方便，安全和有效的手段有持续的需求。 专利技术概述 为了满足本专利技术的目的，设计了用于抗各种导致疾病的微生物感染的猪的组合保 护的新疫苗，所述疫苗包括灭活全细胞胞内劳森菌细菌（Lawson ia intracellular is bactria)和猪圆环病毒2型(PCV2)0RF2蛋白的组合。由于它们对猪健康的负面影响，PCV2和 胞内劳森菌都导致巨大的经济损失。虽然药物和疫苗是已知的并且可商购的以治疗PCV2 和/或劳森菌感染，但仍存在着对以安全和方便的方式提供良好保护的新方式的持续需求。 已经描述了抗PCV2和劳森菌感染的组合疫苗，但是不可商购的。实际上，并不是所有的设计 或建议的抗原组合，尤其不是每个和各种施用方式，都可获得安全和有效的组合疫苗。事实 上，关于组合疫苗的安全和效力总存在不确定性水平，特别是当施用方案被改变时。 欧洲药品评估局(EMEA)的兽药产品委员会在其出版物"指南:对于组合兽药产品 要求（Note for guidance：requirements for combined veterinary products)''（EMEA， 2000年，CVMP/IWP/52/97-FINAL)中，宣称(第2/6页）"组合疫苗的开发并不简单。每个组合 应该在质量，安全性和有效性方面分别地开发和研究"。该委员会还指出，对于良好组合疫 苗的探索通常包括在组合疫苗中各个成分之间的相容性，包括例如防腐剂，赋形剂和稳定 剂，灭活剂和佐剂。在第3页首段，指出"在组合疫苗中，多于一种成分的存在可以经常引起 相互作用，导致对个别成分减弱或增加的反应，相比于当特定成分被单独施用时......这 种相互作用往往本质上是免疫学的，但也可以是通过对免疫系统具有较少直接效应的其它 因素引起的"，并且还有"当佐剂被用于增加对组合疫苗的免疫应答时，可出现特殊的问 题"。 美国卫生和人类服务部，食品和药品管理局，生物制品评价和研究中心 (Department of Health and Human Services,Food and Drug Administration,Center for Biologies Evaluation and Research)在1997年4月发布了"行业指南，对组合疫苗可 预防疾病的评价：生产，测试和临床研究"（Guidance for Industry，for the evaluation of combination vaccines for preventable diseases：Production,Testing and Clinical Studies"，在指南中指出（第3页，"成分的相容性（Compatibility of Components)"）"实验显示组合的单价疫苗可能产生新的组合，其比所期望的具有较低的安 全性或效力。有时灭活疫苗的成分可以对一个或多个活性成分起相反作用"，表明尤其是灭 活疫苗可负面影响活疫苗的效力，如例如当活的百日咳疫苗和灭活脊髓灰质炎病毒组合时 发生，其导致疫苗具有降低的百日咳效力。这表明当相比于个别疫苗时，在疫苗中任何其它 成分可能使最终产品的安全性和效力复杂化。世界卫生组织(WHO)发布了名为"疫苗安全基础"的电子学习课程，在模块2中考虑 了组合疫苗。这个模块开始于"特许的组合疫苗在被国家当局批准之前进行充分的测试以 确保产品是安全，有效和质量合格的。"它也指出"对于所有的组合，制造商必须因此评估每 个抗原成分的效力，当结合以诱导免疫时所述疫苗成分的有效性，可能回复到毒性的风险， 和与其他疫苗成分的反应。"在这个电子课程的第53页，WHO报道"施用途径是通过其将疫苗(或药物)与身体接 触的途径。这是免疫成功的关键因素。物质必须从进入的部位输送到希望其发挥作用的身 体部位。然而，为了这个目的使用人体的运输机制，并非是不重要的。" 加利福尼亚健康服务部门计划免疫科（California Department of Health Services7 Immunization Branch)^-^[：T www .cdc.gov/ vaccines/pubs/pinkbook/downloads/appendices/d/vacc_admin .pdf)。涉及施用部位的 是在第7页，第1全段中宣称"对于每个疫苗的推荐途径和部位是基于临床试验，实际经验和 理论考虑的。该信息包括在每个疫苗的制造商产品信息中。在疫苗施用中使用5种途径。偏 离推荐途径可降低疫苗的效力或增加局部的不良反应。"第14页唯一获得美国许可的皮内 疫苗写到"Fluzone Intradermal是美国许可的仅有的通过皮内途径施用的疫苗。它仅被批 准在18至64岁的人群中使用。此Fluzone制剂与灭活流感疫苗肌内制剂(TIV)是不同的。其 它的TIV制剂不应当通过皮内途径施用。" 总之，特定抗原和施用部位的任意组合并不简单，并需要实验来确定安全性和有 效性。 本专利技术，除了疫苗本身，还涉及用于保护猪对抗胞内劳森菌细菌和PCV2感染的方 法，包括在皮内施用所述疫苗，并且涉及构建这种疫苗的方法。 定义疫苗是保护对抗(疫苗接种后)致病性微生物感染的构成。 保护对抗致病性微生物感染表示在接种宿主中预防或降低通过微生物本身的感 染，或预防或减少由感染产生的(亚)临床疾病，通常通过干扰微生物本身，例如通过抗体。 包含灭活全细胞细菌作为抗原的组合物，包括衍生自活的、全细胞细菌的灭活的 抗原构成。这不排除该细菌细胞(至少部分)在灭活过程中破裂，或者说，灭活全细胞的提取 物或匀浆物实际上是作为本专利技术意义上的"包含灭活全细胞细菌疫苗"的抗原提供。灭活全 细胞胞内劳森菌是例如W02009/144088和W097/20050中已知的。 PCV2 0RF2蛋白质是猪圆环病毒2型衣壳蛋白。PCV2的0RF2编码约28kDa的蛋白质。 所有PCV-2分离株的0RF2共享91-100%的核苷酸序列同一性和90-100%推断的氨基酸序列 同一性(Fenaux等人，J.Clin.Micorbiol.，38(7) ,2494-2503，2000年K0RF2蛋白质可以例 如是重组表达的，例如在杆状病毒表达系统中，如在W02007/028823，W02007/094893或 W02008/076915中所描述的。疫苗的皮内施用意味着足够量的疫苗沉积于真皮内，导致与用相同疫苗和其体积 肌内施用显著不同的免疫应答（特别是：当在如在实施例3中所概述设置的测试中使用 Wilcoxon秩和检验时，p值应小于0.10,优选小于0.0本文档来自技高网...

【技术保护点】
包含灭活全细胞胞内劳森菌细菌和猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2蛋白质组合的疫苗，用于通过所述疫苗的皮内施用而保护猪对抗胞内劳森菌(Lawsonia intracellularis)和PCV2的感染的用途。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·A·C·贾科布斯，V·发钦格，M·斯诺，M·H·维特韦里伊特，
申请(专利权)人：英特维特国际股份有限公司，
类型：发明
国别省市：荷兰;NL