本发明专利技术公开了AMSH基因突变体及其应用，具体涉及分离的编码AMSH突变体的核酸，分离的多肽，筛选易患腓骨肌萎缩症的生物样品的方法，筛选易患腓骨肌萎缩症的生物样品的系统，以及用于筛选易患腓骨肌萎缩症的生物样品的试剂盒。其中，该分离的编码AMSH突变体的核酸，与SEQ ID NO：1相比，具有c.364A>G突变。通过检测该新突变体在生物样品中是否存在，可以有效地检测生物样品是否易患腓骨肌萎缩症。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了AMSH基因突变体及其应用，具体涉及分离的编码AMSH突变体的核酸，分离的多肽，筛选易患腓骨肌萎缩症的生物样品的方法，筛选易患腓骨肌萎缩症的生物样品的系统，以及用于筛选易患腓骨肌萎缩症的生物样品的试剂盒。其中，该分离的编码AMSH突变体的核酸，与SEQ ID NO：1相比，具有c.364A>G突变。通过检测该新突变体在生物样品中是否存在，可以有效地检测生物样品是否易患腓骨肌萎缩症。【专利说明】AMSH基因突变体及其应用
本专利技术涉及AMSH基因突变体及其应用。具体地，本专利技术涉及分离编码AMSH突变 体的核酸、分离的多肽、筛选易患腓骨肌萎缩症的生物样品的系统、用于筛选易患腓骨肌萎 缩症的生物样品的试剂盒、构建体、重组细胞以及构建药物筛选模型的方法。
技术介绍
腓骨肌萎缩症（Charcot-Marie-Tooth Disease, CMT)，又称遗传性运动感觉神经 病（hereditary motor and sensory neuropathy, HMSN)。CMT 是一组最常见的具有高度 临床和遗传异质性的周围神经单基因遗传病，主要影响运动神经元和/或感觉神经元以及 相关的Schwann cells。根据电生理标准，CMT主要分为两类：脱髓鞘型（CMT1)和轴突型 (CMT2)。CMT2又可分为14个亚型（CMT2A-CMT2N)。CMT患病率大概为1/2500,而CMT2A占 所有CMT病人的20-40 %。其中，CMT2A主要表现为远端肢体肌肉无力和/或萎缩，肢体远端 感觉丧失。后期手部出现骨间肌，大、小鱼际肌萎缩、形成猿手畸形、但萎缩一般不超过肘关 节以上，腿部的损伤先从腓肠肌开始，后逐渐扩展至骨间肌，小腿屈肌、最后累及大腿下1/3 肌肉，但其上部完全正常，形成"鹤腿"或倒置的酒瓶样畸形，因足背屈无力常呈马蹄内翻畸 形。本病可影响患者运动功能，难以进行精细的手指活动。严重患者需使用膝-踝-足矫 正器或轮椅。本病预后一般较好，病程进展缓慢，发病后仍能存活数十年。 目前已经发现MFN2、KIF1B基因的突变与CMT2A发病相关，但是仍有许多患者病因 未明，其他基因的突变可能也是导致该疾病的病因。因而，目前对腓骨肌萎缩症尤其是其致 病基因的研究仍有待深入。
技术实现思路
本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术的一个目的 在于提出一种能够有效筛选易患腓骨肌萎缩症的生物样品的手段。 本专利技术是基于专利技术人的下列工作完成的： 专利技术人发现，目前的致病基因和致病突变挖掘的研究中，多使用全外显子组测序 法。全外显子组测序是利用特制的DNA序列探针将全基因组中的外显子区域捕获下来，然 后针对每个外显子进行深度测序的技术。利用外显子组测序找出孟德尔遗传病致病基因的 案例很多，比如2009年美国Sarah B Ng等人利用外显子组测序成功定位出mile综合症的 基因 DH0DH (可参见：Ki jima, K.，et al. , Mitochondrial GTPase mitofusin 2mutation in Charcot-Marie-Tooth neuropathy type 2A. Hum Genet, 2005. 116 (1-2): 23-27?，通过参照 将其全文并入本文）。我国Wang等人利用外显子组测序发现了小脑共济失调的新的突变 基因 TGM6(可参见：Zhao，C.，et al.，Charcot-Marie-Tooth disease type 2A caused by mutation in a microtubule motor KIFIBbeta. Cell, 2001. 105(5):587-597.，通过参照将 其全文并入本文）。随着外显子组测序技术的广泛应用和日渐成熟，一批新的致病基因（突 变）被相继发现，极大地推动了相关疾病诊断及治疗的研究进展。 因而，专利技术人针对收集的一个五代CMT2A患者家系，通过外显子组测序、连锁分析 联合Sanger测序验证的方法进行致病突变挖掘和验证，最终确定了腓骨肌萎缩症的一个 新的致病基因--AMSH基因，以及其上的致病突变c. 364A>G突变。 进而，根据本专利技术的第一方面，本专利技术提出了一种分离的编码AMSH突变体的核 酸。根据本专利技术的实施例，所述核酸与SEQ ID N0:1相比，具有c. 364A>G突变，即相对于野 生型AMSH基因，本专利技术的AMSH基因突变体的cDNA序列第364位碱基A突变为G。根据本 专利技术的实施例，专利技术人确定了 AMSH基因的突变体，该突变体与腓骨肌萎缩症的发病密切相 关，从而通过检测该突变体在生物样品中是否存在，可以有效地检测生物样品是否易患腓 骨肌萎缩症。 根据本专利技术的第二方面，本专利技术提出了一种分离的多肽。根据本专利技术的实施例，与 SEQ ID N0:2相比，所述分离的多肽具有P.N122D突变，即该突变是由于c. 364A>G突变而 引起的，具体地，相对于野生型AMSH，本专利技术的分离的多肽（即AMSH突变体）的氨基酸序列 第122位氨基酸天冬酰胺突变为天冬氨酸。通过检测生物样品中是否表达该多肽，可以有 效地检测生物样品是否易患腓骨肌萎缩症。 根据本专利技术的第三方面，本专利技术提出了一种筛选易患腓骨肌萎缩症的生物样品的 系统。根据本专利技术的实施例，该系统包括：核酸提取装置，所述核酸提取装置用于从所述生 物样品提取核酸样本；核酸序列确定装置，所述核酸序列确定装置与所述核酸提取装置相 连，用于对所述核酸样本进行分析，以便确定所述核酸样本的核酸序列；判断装置，所述判 断装置与所述核酸序列确定装置相连，以便基于所述核酸样本的核酸序列或其互补序列， 与SEQ ID N0:1相比，是否具有c.364A>G突变，判断所述生物样品是否易患腓骨肌萎缩症。 利用该系统，能够有效地筛选易患腓骨肌萎缩症的生物样品。 根据本专利技术的第四方面，本专利技术提出了一种用于筛选易患腓骨肌萎缩症的生物样 品的试剂盒。根据本专利技术的实施例，该试剂盒含有：适于检测AMSH基因突变体的试剂，其中 与SEQ ID N0:1相比，该AMSH基因突变体具有c. 364A>G突变。利用根据本专利技术的实施例 的试剂盒，能够有效地筛选易患腓骨肌萎缩症的生物样品。 根据本专利技术的第五方面，本专利技术还提出了一种构建体。根据本专利技术的实施例，该构 建体包含前面所述的分离的编码AMSH突变体的核酸。由此，利用本专利技术的构建体转化受体 细胞获得的重组细胞，能够有效地用于筛选治疗腓骨肌萎缩症的药物。 根据本专利技术的第六方面，本专利技术还提出了一种重组细胞。根据本专利技术的实施例，该 重组细胞是通过前面所述的构建体转化受体细胞而获得的。根据本专利技术的一些实施例，利 用本专利技术的重组细胞，能够有效地筛选治疗腓骨肌萎缩症的药物。 根据本专利技术的第七方面，本专利技术还提出了一种构建药物筛选模型的方法。根据本 专利技术的实施例，该方法包括：使动物的至少一部分细胞表达前面所述的编码AMSH突变体的 核酸。由此，利用本专利技术的药物筛选模型，能够有效地筛选治疗腓骨肌萎缩症的药物。 需要说明的是，本专利技术发现的CMT2A的一个新致病基因AMSH的致病本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种分离的编码AMSH突变体的核酸，其特征在于，所述核酸与SEQ ID NO：1相比，具有c.364A>G突变，任选地，所述核酸为DNA。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘少君，戴兰兰，刘勇，谌于蓝，陈玉剑，张建国，阙海萍，
申请(专利权)人：深圳华大基因科技有限公司，中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所，
类型：发明
国别省市：广东;44
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