甲硫氨酸-叶酸代谢关键酶MTHFR的SNP检测试剂盒及其使用方法技术

本发明专利技术公开了一种甲硫氨酸-叶酸代谢关键酶MTHFR的SNP检测试剂盒及其使用方法。分别加入检测MTHFR C677T多态性和MTHFR A1298C多态性的对应特异引物和荧光探针，构成实时荧光定量PCR体系，经过Real-time PCR反应，本领域技术人员通过荧光定量PCR仪所收集的数据确定检测对应MTHFR基因位点的基因型。具有快速、灵敏、容易判断等优点，适合临床的检测和推广。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医疗检测领域，更具体的说是涉及一种甲硫氨酸-叶酸代谢关键酶MTHFR的SNP检测试剂盒及其使用方法。
技术介绍
MTHFR全称：亚甲基四氢叶酸还原酶，它是甲硫氨酸-叶酸代谢中的关键酶，它可以使5，10-亚甲基四氢叶酸还原为5-甲基四氢叶酸，从而作为甲基的间接供体参与体内嘌呤、嘧啶的合成及DNA、RNA、蛋白质的甲基化，同时维持体内正常的同型半胱氨酸水平。大量研究均证实母亲MTHFRC677T和MTHFRA1298C突变是生育神经管缺陷患儿的遗传风险因素。MTHFRC677T和MTHFRA1298C导致MTHFR的酶活力降低，引起血浆高同型半胱氨酸血症。妊娠期高同型半胱氨酸血症可导致血液呈高凝状态，增加胎盘血栓形成的危险，引起胎盘栓塞，造成母胎循环不足，从而可导致流产、胎儿生长受限和胎盘早剥；另一方面，高同型半胱氨酸血症可在金属离子介导下生成过氧化物及氧自由基，损伤血管内皮细胞的结构和功能并进一步导致患者血管舒缩平衡紊乱，从而引发妊高征。另外由于胎盘组本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种甲硫氨酸‑叶酸代谢关键酶MTHFR的SNP检测试剂盒，其特征在于：包括下列体积份的组成构成：所述引物为MTHFR C677T引物和MTHFR A1298C引物，所述MTHFR C677T引物包括：正向引物：MTHFR C677T‑F：5’‑GCACTTGAAGGAGAAGGTGTCT‑3’；反向引物：MTHFR C677T‑R：5’‑TGTGTCAGCCTCAAAGAAAAGCT‑3’；所述MTHFR A1298C引物包括：正向引物：MTHFR A1298C‑F：5’‑GGAGGAGCTGCTGAAGATGTG‑3’；反向引物：MTHFR A1298C‑R：5’‑CCCGAGAGGTAAA...

【技术特征摘要】
1.一种甲硫氨酸-叶酸代谢关键酶MTHFR的SNP检测试剂盒，其特征在于：
包括下列体积份的组成构成：
所述引物为MTHFRC677T引物和MTHFRA1298C引物，
所述MTHFRC677T引物包括：
正向引物：MTHFRC677T-F：5’-GCACTTGAAGGAGAAGGTGTCT-3’；
反向引物：MTHFRC677T-R：5’-TGTGTCAGCCTCAAAGAAAAGCT-3’；
所述MTHFRA1298C引物包括：
正向引物：MTHFRA1298C-F：5’-GGAGGAGCTGCTGAAGATGTG-3’；
反向引物：MTHFRA1298C-R：5’-CCCGAGAGGTAAAGAACAAAGACTT-3’；
所述探针为MTHFRC677T探针和MTHFRA1298C探针
MTHFRC677T探针包括：
MTHFRC677T野生型探针：5’-荧光基团-ATGAAATCGGCTCCCGC-MGB-3’；
MTHFRC677T突变型探针：5’-荧光基团-ATGAAATCGACTCCCGC-MGB-3’；
所述MTHFRA1298C探针包括：
MTHFRA1298C野生型探针：5’-荧光基团-CAAAGACACTTTCTTC-MGB-3’；
MTHFRA1298C突变型探针：5’-荧光基团-AGACACTTGCTTCACT-MGB-3’。
2.根据权利要求1所述的甲硫氨酸-叶酸代谢关键酶MTHFR的SNP检测试
剂盒，其特征在于：所述预混物为2×PCR酶反应预混液，所述2×PCR酶反应
预混液含有0.1units/μl的TaqDNAPolymerase(recombinant)、4mmol/L的MgCl2、

\t0.5mmol/L的dNTPs。
3.根据权利要求1和2所述的甲硫氨酸-叶酸代谢关键酶MTHFR的SNP检测
试剂盒，其特征在于：所述溶剂为双蒸水。
4.根据权利要求3所述的甲硫氨酸-叶酸代谢关键酶MTHFR的SNP检测试剂<...

【专利技术属性】
技术研发人员：邢洋，苏彩环，林芳珍，
申请(专利权)人：浙江中迪生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33