本发明专利技术公开了一种生物硫醇类物质检测的荧光内滤效应传感器。该传感器的制备,包括以下步骤：按照现有方法制备石墨烯氮化碳纳米片，一种有机小分子发色探针；用合成的两种材料构成荧光内滤效应传感器；利用荧光技术或荧光成像技术可进行对生物硫醇类的检测。本发明专利技术的传感器快速简单，灵敏度高，专一性好，检测限低。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及荧光检测及荧光成像
，更具体的说是一种荧光开关型传感器的制备，本专利技术还涉及荧光内滤效应的机理。
技术介绍
荧光分析是指利用某些物质在紫外光照射下产生荧光的特性及其强度进行物质的定性和定量的分析的方法。荧光分析法最主要的优势是灵敏度高和选择性好，目前已广泛用于工业分析、食品检验、环境保护、医药、生物等领域。由于荧光分析法的灵敏度高，许多有机药物分子又都具有特征的荧光光谱，当对微量和痕量药物进行灵敏准确的检测时，荧光分析法显示出了极大的优越性。70年代以来，荧光分析在仪器、方法和试剂等方面发展非常迅速，在环境监测中有着广泛的应用:借助于有机试剂进行荧光分析的无机元素已达60余种，分析灵敏度可达微克/升级，与原子吸收谱法相近，但光谱干扰少;荧光检测器与液相色谱仪联用，可对有机污染物进行定量分析，如水和废水统一监测方法中多环芳烃的测定及纸层荧光分析法测等。生物化学是荧光光谱分析应用较为广泛的领域，大量具有生物意义的物质，如氨基酸、蛋白质、酶和辅酶、嘌呤、嘧啶、扑啉、核酸、维生素A、B、C、D、E、K等等，均可用荧光光谱仪有效进行分析测定。如用荧光法测定血液和动物组织中的生育酚，激发光波长为295nm，发射波长为325nm。卟啉类化合物是一类广泛存在于自然界的化合物，与生命现象关系最为密切的有叶绿素、血红素、细胞色素、维生素B12等。用荧光光谱仪对这些化合物进行鉴定和定量分析相当有效。荧光显微镜在生物学和医学领域已得到了广泛应用，是观测细胞形态、结构和生命现象的有力工具。荧光显微镜作为一种必不可少的分析手段，常用于定性观察细胞内部荧光物质的空间分布和强度分布，得到细胞的荧光图像，研究细胞的结构。然而荧光显微镜不能定量给出图像发光的强度数值，无法研究细胞图像发光强度变化不大或荧光物质空间分布变化细微的生理过程。因此，随着生物医学的飞速发展，迫切需要有更高灵敏度，操作更快捷，功能更加完备的仪器来满足生物学和医学研究发展的要求。荧光显微镜与荧光光谱仪耦合而成的系统仪器能够获取显微荧光成像及微区荧光强度、荧光寿命的测定信息。选择荧光探针对被标记物进行特异性标记，荧光探针的亮度即荧光强度可反映被标记物相对含量的多少。荧光显微镜对图像采集后，荧光光谱仪可测量图像的荧光强度，对获取的图像进行荧光强度的定量，为全面分析和研究细胞内部结构提供更加详尽的数据信息。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供了一种灵敏度高、检测速度快、操作简单，检测生物硫醇类物质的荧光传感器。为了解决上述技术问题，本专利技术是通过以下措施来实现的:一种检测检测生物硫醇类物质的荧光传感器的制备方法，其包括以下步骤: (I)按照现有方法制备石墨烯氮化碳纳米片，一种有机小分子发色探针； (2)用合成的两种材料构成荧光内滤效应传感器； (3)利用荧光技术或荧光成像技术可进行对生物硫醇类的检测； 本专利技术所述石墨烯氮化碳纳米片及一种有机小分子发色探针制备包括以下步骤: (1)石墨烯氮化碳纳米片的制备:三聚氰胺500°C加热3 h得到块状石墨烯氮化碳，产物在空气中静置4 h降至室温，取Ig上述产物于100 mL 5M硝酸中连续超声4 h，然后120 °C回流24 h，冷却至室温后，离心分离，二次水冲洗至中性备用； (2)有机小分子发色探针的制备:14.31mg六水氯化铁，37.2 mg 4-二乙氨基苯甲醛和60.1mg I，1-二乙氧基-2-氰基乙烷置于体积比为1:5的2 mL乙醇/乙酸混合液中90 °(:回流5 h，随后，溶剂在减压下移除，粗产品通过硅胶柱色谱法提纯，流动相体积比为5:1的乙酸乙酯/石油醚混合液； (3)有机小分子发色探针溶解于乙醇中，荧光传感器是通过所制备的石墨烯氮化碳纳米片与发色探针储备液简单混合得到的，使用时将混合液用10 mM 50%的磷酸盐缓冲溶液稀释至500 yL，其中乙醇为助溶剂，pH 7.4。本专利技术的有益效果: (1)本专利技术利用荧光方法进行测定操作快速简单，灵敏度高，专一性好，有很好的重复性； (2)利用石墨烯氮化碳纳米片作为荧光材料，具有较好的生物相容性，降低了其对生物分析的影响； (3)小分子发色探针本身对生物硫醇就有化学响应，再结合石墨烯氮化碳荧光材料，利用荧光内滤效应构成传感器，双重放大信号。【附图说明】下面结合附图和具体实施例对本专利技术做进一步详细描述； 【图1】有机小分子发色探针的合成步骤及检测方法； 【图2】所设计的传感器对硫醇类的检测机理。【具体实施方式】一种检测检测生物硫醇类物质的荧光传感器的制备方法，其包括以下步骤: (1)按照现有方法制备石墨烯氮化碳纳米片，一种有机小分子发色探针； (2)用合成的两种材料构成荧光内滤效应传感器； (3)利用荧光技术或荧光成像技术可进行对生物硫醇类的检测； 本专利技术所述石墨烯氮化碳纳米片及一种有机小分子发色探针制备包括以下步骤: (1)石墨烯氮化碳纳米片的制备:三聚氰胺500°C加热3 h得到块状石墨烯氮化碳，产物在空气中静置4 h降至室温，取Ig上述产物于100 mL 5M硝酸中连续超声4 h，然后120 °C回流24 h，冷却至室温后，离心分离，二次水冲洗至中性备用； (2)有机小分子发色探针的制备:14.31mg六水氯化铁，37.2 mg 4-二乙氨基苯甲醛和60.1mg I，1-二乙氧基-2-氰基乙烷置于体积比为1:5的2 mL乙醇/乙酸混合液中90 °(:回流5 h，随后，溶剂在减压下移除，粗产品通过硅胶柱色谱法提纯，流动相体积比为5:1的乙酸乙酯/石油醚混合液； (3)有机小分子发色探针溶解于乙醇中，荧光传感器是通过所制备的石当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种检测生物硫醇类物质的荧光传感器的制备与检测方法，其包括以下步骤：（1）按照现有方法制备石墨烯氮化碳纳米片，一种有机小分子发色探针；（2）用合成的两种材料构成荧光内滤效应传感器；（3）利用荧光技术或荧光成像技术进行对生物硫醇类的检测。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：颜梅，杨春蕾，于京华，王秀，邓文平，申蕾，朱少军，杨光鑫，
申请(专利权)人：济南大学，
类型：发明
国别省市：山东;37
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