一种注射用磷脂酰胆碱的制备方法技术

本发明专利技术提供一种注射用磷脂酰胆碱的制备方法，包括以下步骤：（1）磷脂原料预处理：在磷脂原料中加入有机溶剂，经超声溶解后过滤，得到磷脂原料溶液；（2）将步骤（1）所得的磷脂原料溶液加入到已用惰性气体置换保护的色谱柱中；（3）待磷脂原料溶液完全吸附到色谱柱填料上，加入有机溶剂进行洗脱，同时向色谱柱中充入惰性气体使色谱柱中的压力为0.1～2Mpa；（4）收集步骤（3）的洗脱液，检测收集到的各流份洗脱液中磷脂酰胆碱的纯度，将纯度大于99%的流份洗脱液合并，在30～50℃水浴下减压浓缩至干即得注射用磷脂酰胆碱。该方法制备得到的磷脂酰胆碱纯度高，得率高，工艺简单，环保、成本低廉，可大规模生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药辅料生产
，更确切地，本专利技术涉及。
技术介绍
磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine简称PC)，俗名卵磷脂(Lecithin)，是天然磷脂的主要成分，许多生理活性均与之相关，一直倍受人们的青睐。磷脂酰胆碱的摄入可显著提高体内乙酰胆碱的浓度，因而它可增强大脑活力、促进神经传导、延缓机体衰老和抗动脉硬化;可促进脂类转换的作用，可以有效防治肝硬化与脂肪肝等功效。另外磷脂酰胆碱在食品工业中可作为良好的乳化剂、抗氧化剂、柔软剂、增湿剂等食品添加剂。高纯度磷脂酰胆碱是一种天然、安全、高效的乳化剂，可用于输液或静脉注射用乳化剂，是注射剂领域最常用、最安全的乳化剂。同时，磷脂酰胆碱由于其脂质体的特征，可作为抗癌药物和其他缓释药物的载体，显著提高药物的活性、降低毒副作用，与其它药物载体相比具有低毒高效的优点。当磷脂酰胆碱用于注射、脂质体等用途时，对磷脂酰胆碱的纯度、杂质含量、水含量均有严格要求，通常要求磷脂酰胆碱纯度大于95-98%，同时磷脂酰乙醇胺和溶血性磷脂酰胆碱的含量小于1%，水含量低于2%，同时对热原、重金属含量均有限量要求。因此，这些注射级高纯度磷脂酰胆碱的制备技术难度很大。现有的方法通常只能得到较高含量的磷脂酰胆碱，难以获得符合注射剂要求的磷脂酰胆碱。磷脂酰胆碱广泛存在于大豆、蛋黄等生物组织中，采用适当的提取手段可从这些生物组织中获得混合磷脂。混合磷脂中除了含有磷脂酰胆碱外，还含有如磷脂酰乙醇胺、溶血性磷脂酰胆碱等其他磷脂杂质，需采用适当的手段予以分离纯化。到目前为止，磷脂的分离方法主要有薄层色谱分离技术、柱层析分离技术、高效液相色谱分离技术、溶剂分离技术等。还有近几年才兴起的超临界CO2萃取法、半透膜法等。超临界流体萃取分离效果好，产品质量高，同时可有效避免有毒溶剂的使用，且溶剂耗量少。但由于超临界设备投资昂贵且操作费用高，大规模工业化应用受限。如公开号为CN103288870A，名称为一种注射级高纯度磷脂酰胆碱的制备方法;膜技术由于没有使用化学试剂、节能，吸引了很多化学工程师的研究。目前，虽然膜抗污染的能力已经得到了很好的改善，但处理量小、渗透量和膜的寿命等仍然制约着膜工艺的工业化。如中国专利ZL201010105688.1公开了一种膜分离与柱层析相结合分离磷脂酰胆碱的方法，得到纯度为95%以上的磷脂酰胆碱产品。中国专利ZL200510086600.5公开了一种利用无机陶瓷膜分离制备食品级大豆卵磷脂的方法;柱色谱分离方法设备简单，生产成本低，是目前唯一能够用于大规模生产高纯磷脂的方法，因而成为研究热点。但是，大部分研究停留在分析级制备上，制备过程多选用有毒试剂或混合试剂进行梯度洗脱，这给溶剂回收造成很大困难，并容易造成环境污染。如中国专利ZL200710052284.9、公开了一种乙醇浸取和柱层析相结合的磷脂酰胆碱纯化方法;有机溶剂萃取法一是萃取纯度较低，无法满足注射剂要求，二是用到溶剂种类多，溶剂回收成本高甚至是难以回收，容易造成浪费及环境污染，其工业应用也受到一定限制。中国专利ZL02121550.2、ZL02149601.3和公开了一种采用乙腈和甲醇、乙醇等一元低碳醇的混合溶剂对大豆粉末磷脂进行多级逆流浸取制备磷脂酰胆碱的方法。
技术实现思路
本专利技术旨在解决现有技术在制备磷脂酰胆碱过程中存在的:磷脂酰胆碱纯度低，不能满足注射用要求;产品收率低、吸附剂再生困难和溶剂有毒、溶剂难以循环利用，固定相昂贵、样品易发生氧化降解等问题，提供，该方法制备得到的磷脂酰胆碱纯度高，得率高，工艺简单，环保、成本低廉，可大规模生产。为解决上述技术问题，本专利技术通过以下技术方案实现。—种注射用磷脂酰胆碱的制备方法，包括以下步骤: (1)磷脂原料预处理:将磷脂原料溶于有机溶剂，经超声溶解后过滤，得到磷脂原料溶液;过滤时采用过0.45um的微孔滤膜； (2)将步骤(I)所得的磷脂原料溶液均匀的加入到已用惰性气体置换保护的色谱柱中；磷脂原料溶液采用湿法上样;色谱柱填料装填采用干法装柱，色谱柱装好后向色谱柱中充入惰性气体置换色谱柱中的空气； (3)待磷脂原料溶液完全吸附到色谱柱填料上，加入有机溶剂进行洗脱，同时向色谱柱中充入惰性气体使色谱柱中的压力为0.1?2MPa;惰性气体的充入能有效合理的控制液体的流出速度在10ml/min?50ml/min; (4)收集步骤(3)的洗脱液，检测收集到的各流份洗脱液中磷脂酰胆碱的纯度，将纯度为大于99%的流份洗脱液合并，在30?50°C水浴下减压浓缩至干即得注射用磷脂酰胆碱。检测洗脱液纯度采用高效液相色谱检测;减压浓缩，压力控制在-0.05?-0.1MPa。在步骤(I)中，加有机溶剂溶解磷脂原料时，所述磷脂原料与机溶剂的重量体积比为 1:1 ?1:10。在步骤(I)中，所述超声溶解的超声工作频率为15?80KHz，在超声条件下，样品能够在室温中较短时间内溶解在有机相里，减少样品与空气接触时间，降低样品的降解速度。在步骤(1)、步骤(3)中，所述有机溶剂为无水酒精、食用酒精和工业酒精中的任一种，从成本及试剂中甲醇等有害物质的含量考虑，优先选择食用酒精。在步骤(2)中，所述用惰性气体置换保护是将惰性气体充入到色谱柱中进行置换保护，所述置换保护进行2?5次，每次充入惰性气体的体积与色谱柱填料的体积相同。所述色谱柱填料的重量为磷脂原料重量的20?100倍。所述惰性气体为氮气、氩气和氖气中的任意一种。所述色谱柱填料为硅胶、氧化铝、聚酰胺和大孔树脂中的任意一种。为了保护制备得到的磷脂酰胆碱的纯度，还包括向上述步骤(4)中制备得到的注射用磷脂酰胆碱中充入惰性气体进行保护。惰性气体为氮气、氩气和氖气中的任意一种，充入量为I个容器体积。还包括将使用过的色谱柱填料用甲醇进行再生处理，所述甲醇与色谱柱填料的体积重量比为1:1?10:1，甲醇挥发干后色谱柱填料重复使用。有益效果: 与现有技术相比，本专利技术具有一下优点。1、本专利技术先将蛋黄粉用有机溶剂溶解，过微孔滤膜，避免其中的不溶物堵柱子，提高分离效果。在洗脱过程中，用惰性气体保持柱子中的压力，一方面可以控制洗脱速度，提高洗脱效率，降低成本；另一方面可以起到保护的作用，避免样品在洗脱过程中被氧化分解。在一定温度下浓缩样品溶液，既可以保持试剂的回收速度，也可以避免样品在高温条件下发生降解。2、在浓缩干燥样品中充了惰性气体，可以隔绝氧气与样品接触，避免样品发生氧化，最后得到纯度大于99%的磷脂酰胆碱。3、工艺简单，成本低廉，产品纯度高，其中有机溶剂可以回收套用，填料通过再生处理重复使用。对设备没有特殊要求，适宜工业化生产。本专利技术磷脂酰胆碱的制备方法操作简单、同时具有较高的收率和纯度，便于工业化放大生产，满足我国对高纯度磷脂酰胆碱的需求。【附图说明】图1为实施例1的高效液相色谱图； 图2为实施例2的高效液相色谱图； 图3为实施例4的高效液相色谱图。图1、2、3中，横坐标为时间(min)，纵坐标为吸光度(AU)。【具体实施方式】下面结合具体实施例详细说说明本专利技术。实施例1 ，包括以下步骤: (I)溶解:称取磷脂原料10g，加入食用酒精10ml，调节超声工作频率为30KHz，待磷脂原料完全溶解后，过0.本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种注射用磷脂酰胆碱的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）磷脂原料预处理：在磷脂原料中加入有机溶剂，经超声溶解后过滤，得到磷脂原料溶液；（2）将步骤（1）所得的磷脂原料溶液加入到已用惰性气体置换保护的色谱柱中；（3）待磷脂原料溶液完全吸附到色谱柱填料上，加入有机溶剂进行洗脱，同时向色谱柱中充入惰性气体使色谱柱中的压力为0.1～2MPa；（4）收集步骤（3）的洗脱液，检测收集到的各流份洗脱液中磷脂酰胆碱的纯度，将纯度为大于99%的流份洗脱液合并，在30～50℃水浴下减压浓缩至干即得注射用磷脂酰胆碱。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：何文彬，白兰辉，李波，李旺，刘丁，
申请(专利权)人：成都普思生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51