一种提取分离自威灵仙的化合物及其制备方法和用途技术

本发明专利技术提供了一种提取分离自威灵仙的化合物，结构如式I所示；该化合物具有抑制肺癌细胞生长的活性，为威灵仙药材的进一步开发以及癌症治疗药物的进一步研发提供了新的策略。癌症治疗药物的进一步研发提供了新的策略。癌症治疗药物的进一步研发提供了新的策略。

【技术实现步骤摘要】
一种提取分离自威灵仙的化合物及其制备方法和用途


[0001]本专利技术属于中药材活性成分分离纯化领域，具体涉及一种提取分离自威灵仙的化合物及其制备方法和用途。

技术介绍

[0002]威灵仙，为毛莨科植物威灵仙Clematis chinensis Osbeck、棉团铁线莲Clematis hexapetala Pall.或东北铁线莲Clematis manshurica Rupr.的干燥根或根茎，归膀胱经，有祛风湿、通经络、止痹痛和消骨鲠之功效。威灵仙是一味传统的镇痛良药，其味辛散通，性急善走，能贯通五脏、十二经络。
[0003]随着现代科学技术的发展,中药药理研究显示威灵仙具有镇痛抗炎、抗肿瘤、降血糖、降血压和保肝等作用，其化学成分包括三萜、黄酮、木脂素、香豆素、生物碱、挥发油、甾体、有机酸、大环化合物及酚类等,其中三萜皂苷、黄酮、木脂素是主要成分。
[0004]在威灵仙的诸多成分中，有若干成分被报道有抗肿瘤活性，例如，He等发现从东北铁线莲分离的三萜皂苷mandshunosides A～B对2种结直肠癌细胞有抑制活性(He Yu
‑
Xin et al.Cytotoxic triterpene saponins from Clematismandshurica.[J].Journal of Asian natural products research,2011,13(12):1104
‑
9.)；又如，赵英等[31]研究证明威灵仙总皂苷对小鼠移植性肉瘤S180、腹水型Hep A、白血病腹水型P388肿瘤均有明显的抑制作用(赵英，余春粉，张桂英，等.威灵仙总皂苷抗肿瘤作用及其对癌细胞增殖周期的影响[J].时珍国医国药，2010，21(18):1908－1909)。
[0005]不过，由于威灵仙化学成分较复杂，对于威灵仙中其他活性成分的种类、药效还仍有待进一步探索。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种从威灵仙中发现的新化合物。
[0007]本专利技术提供了式I所示化合物或其衍生物，或其盐，或其光学异构体，或其互变异构体，或其溶剂合物：
[0008][0009]进一步地，上述的化合物或其衍生物，或其盐，或其光学异构体，或其互变异构体，或其溶剂合物是从威灵仙中提取、分离、纯化所得。
[0010]本专利技术还提供了上述的化合物或其衍生物，或其盐，或其光学异构体，或其互变异构体，或其溶剂合物的制备方法，包括如下步骤：
[0011](1)将威灵仙药材粉碎后用乙醇水溶液浸提，浓缩，乙酸乙酯萃取；
[0012](2)乙酸乙酯萃取后的水相经大孔吸附树脂富集，水洗、解析；浓缩后过滤得到滤液；
[0013](3)滤液经高压液相制备分离，得到产品。
[0014]进一步地，步骤(1)所述提取次数为1～3次，优选为2次。
[0015]进一步地，步骤(1)所述乙醇水溶液是93％～97％v/v乙醇，优选为95％v/v乙醇。
[0016]进一步地，步骤(2)所述解析是用65％～75％v/v甲醇解析，优选为用70％v/v甲醇解析。
[0017]进一步地，步骤(2)所述过滤是通过0.45μm有机膜过滤。
[0018]进一步地，步骤(3)所述高压液相制备分离的色谱条件如下：
[0019]流动相：甲醇和水的混合液，其中甲醇与水的体积比为(70～80):(20～30)，优选为75:25；
[0020]检测波长：210nm；色谱柱：C18反相色谱柱。
[0021]本专利技术还提供了上述的化合物或其衍生物，或其盐，或其光学异构体，或其互变异构体，或其溶剂合物在制备治疗癌症的药物中的用途。
[0022]进一步地，上述药物是治疗肺癌的药物。
[0023]本专利技术的有益效果：本专利技术提供了一种从威灵仙中发现的新化合物，具有抑制肺癌细胞生长的活性，为威灵仙药材的进一步开发以及癌症治疗药物的进一步研发提供了新的策略。
[0024]显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离
本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
[0025]以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。
具体实施方式
[0026]实施例1、本专利技术化合物的制备
[0027]取威灵仙药材5kg，粉碎后加入10倍重量浓度为95％的乙醇浸提取2次，每次24h，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得浓缩提取液10L，静置室温；用等体积乙酸乙酯萃取2次后，水相用AB
‑
8大孔树脂富集，洗至流出液澄清；70％甲醇解析得到解析液，0.45um有机膜过滤得滤液，滤液再经C18反相色谱填料高压制备分离，A：甲醇B：水，A：B 75:25V/V为流动相；检测波长210nm，收集相对应的色谱峰,40℃减压浓缩干即得白色固体产物0.15g。
[0028]实验例1、本专利技术化合物结构的表征
[0029]1、实验方法
[0030]对实施例1得到的产物进行质谱、核磁(1H
‑
NMR、
13
C
‑
NMR、HSQC、HMBC)检测，以确定其结构。
[0031]2、实验结果
[0032](1)质谱结果：m/z ES
‑
TOF MS+：ES
‑
TOF MS
─
：1996.32[M
─
H]─
,2031.22[M+Cl]─
；确认分子量为1996.89。
[0033](2)核磁结果：
[0034]根据谱图结果进行分析，结合植物来源、核磁数据和质谱数据，以及Clematomandshurica saponin B(J.Nat.Prod.2006,69,1591
‑
1595)文献核磁数据对比(见下表1)，确定该化合物与Clematomandshurica saponin B结构相近。只是异阿魏酸酰基的3位羟基应为甲氧基取代。通过核磁二维HSQC，HMBC，DEPT等分析技术手段，该化合物碳氢进行了全归属(见下表2)，确定该化合物的结构：
[0035][0036]表1.该化合物与Clematomandshurica saponin B核磁比对
[0037][0038][0039][0040][0041]文献1：Triterpene Saponins from Clematis mandshurica。J.Nat.Prod.2006,69,1591
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1595
[0042]表2化合物NMR数据归属(C5D5N，400MHz，TMS，δppm，J＝Hz)
[0043][0044][0本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.式I所示化合物或其衍生物，或其盐，或其光学异构体，或其互变异构体，或其溶剂合物：2.如权利要求1所述的化合物或其衍生物，或其盐，或其光学异构体，或其互变异构体，或其溶剂合物，其特征在于，它是从威灵仙中提取、分离、纯化所得。3.权利要求2所述的化合物或其衍生物，或其盐，或其光学异构体，或其互变异构体，或其溶剂合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将威灵仙药材粉碎后用乙醇水溶液浸提，浓缩，乙酸乙酯萃取；(2)乙酸乙酯萃取后的水相经大孔吸附树脂富集，水洗、解析；浓缩后过滤得到滤液；(3)滤液经高压液相制备分离，得到产品。4.如权利要求3所述制备方法，其特征在于，步骤(1)所述提取次数为1～3次，优选为2次。5.如权利要求3所述制备方法，其特征在于，步骤(1)所述乙醇水溶液是93％～97％...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑皓元，肖斌，钟钰，李波，赖小红，黄龙，吴涛，万洪，佘新，杨松柏，蒋琴，朱祝明，刘丁，
申请(专利权)人：成都普思生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：