一种从草果中提取分离草果素的方法技术

本发明专利技术公开了一种从草果中提取分离草果素的方法，可实现草果药材中抗氧化活性单体化合物的提取，并经MS、NMR等现代波谱技术和光谱技术对该活性单体化合物进行结构鉴定，确认为草果素，由此为研究草果水提取物抗氧化活性提供物质基础，并有利于草果的进一步综合开发利用。用。用。

【技术实现步骤摘要】
一种从草果中提取分离草果素的方法


[0001]本专利技术是一种从草果中提取分离草果素的方法，具体涉及一种从草果中提取分离抗氧化活性物质草果素的方法，属于中草药提取


技术介绍

[0002]草果（学名：Amomum tsaoko Crevost et Lemarie）是姜科，豆蔻属多年生草本植物，主要分布于中国云南、广西、贵州等省区。草果是药食两用中的药材大宗品种之一，主要作为香料应用于食品加工领域，也应用于中药和其他领域。目前，随着天然产物开发的不断兴起，草果作为重要的药食两用植物，由于具备广泛的生物学活性和药理作用，因此，对草果天然产物的开发利用将会进一步加大。
[0003]现有研究表明，草果的提取物具有一定的抗氧化活性，例如：黄比翼等在“不同极性溶剂的草果提取物抗氧化活性研究”（《右江名族医学院学报》，2021年2月，第43卷 第1期，37
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40）中用乙醇提取草果得到的浸膏，稀释后依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位以及水部位，并采用紫外分光光度法来测定草果提取物对ABTS
+
自由基、羟自由基和Fe
2+
螯合的清除能力，结果表明，不同极性溶剂的草果提取物都具有良好的抗氧化活性。但现有研究并未阐明其抗氧化活性的物质基础，因此，为进一步的提高草果在抗氧化活性方面的综合开发及利用，如何实现草果提取物中抗氧化活性单体化合物的提取、分离和纯化是关键。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种从草果中提取分离草果素的方法，可实现草果药材中抗氧化活性单体化合物的提取，并经MS、NMR等现代波谱技术和光谱技术对该活性单体化合物进行结构鉴定，确认为草果素，由此为研究草果水提取物抗氧化活性提供物质基础，并有利于草果的进一步综合开发利用。
[0005]本专利技术通过下述技术方案实现：一种从草果中提取分离草果素的方法，包括以下步骤：A.以草果药材为原料，粉碎后用乙醇回流提取，再经减压浓缩后得到浓缩液；B.将浓缩液稀释后用乙酸乙酯进行萃取，得到乙酸乙酯提取物，浓缩制得乙酸乙酯提取物浸膏；C.取乙酸乙酯提取物浸膏，经硅胶柱层析分离和C18柱反向分离后，得到草果素。
[0006]所述步骤A中，用质量浓度为95%的乙醇回流提取2～3次，每次回流提取时间控制在1.5～2h。
[0007]所述步骤A中，将回流提取得到的提取液在50～55℃下减压浓缩至无醇后，得到所述浓缩液。
[0008]所述步骤B中，将浓缩液加水稀释2～3倍后，取等体积的乙酸乙酯萃取2次，得到乙酸乙酯提取物。
[0009]所述步骤B中，将乙酸乙酯提取物在45℃下减压浓缩制得乙酸乙酯提取物浸膏。
[0010]所述步骤C中，取乙酸乙酯提取物浸膏用其质量1～2倍的硅胶拌样，拌样物在40℃下鼓风干燥恒重，得到干燥的硅胶拌样物，再进行硅胶柱层析分离。
[0011]所述步骤C中，硅胶拌样物进行正相硅胶柱层析，以10～20倍的硅胶为填料，湿法装柱，干法上样，用体积比为100︰0～30︰1的二氯甲烷
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甲醇为洗脱剂进行常压洗脱，分管收集，每管约100mL，再进行薄层色谱分析，以体积比为20︰1的二氯甲烷
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甲醇为展开剂，在254nm的紫外光下检视暗斑结果，将含有目标化合物的收集液合并后，在45℃下减压浓缩至浸膏。
[0012]所述步骤C中，C18柱反向分离时，采用体积比为50︰50的甲醇
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水为流动相，紫外光为254nm。
[0013]本专利技术与现有技术相比，具有以下优点及有益效果：（1）本专利技术提供了一种从草果中提取抗氧化活性单体化合物的方法，通过乙醇回流提取浓缩液经乙酸乙酯萃取得到草果抗氧化活性物质的乙酸乙酯提取物，再经分离、纯化后得即可得到活性单体化合物。
[0014]（2）本专利技术为研究草果提取物的抗氧化活性提供了物质基础，经MS、NMR等现代波谱技术和光谱技术对本专利技术提取得到的活性单体化合物进行结构鉴定，确定该活性单体化合物为草果素。
[0015]（3）本专利技术为进一步实现草果的综合开发和利用奠定了基础，在对本专利技术提取得到的活性单体化合物草果素进行抗氧化活性实验时，依次通过DPPH自由基清除实验、ABTS自由基清除实验、超氧阴离子自由基清除实验、羟基自由基清除实验、亚铁离子的螯合实验、三价铁离子的还原实验发现，草果素对这些自由基及铁离子均具有一定的清除能力，说明草果素具有一定的抗氧化能力，其抗氧化活性与单体化合物结构有关，抗氧化作用机理主要是通过清除自由基来避免氧化损伤。
[0016]综上所述，本专利技术在现有草果抗氧化活性研究的基础上，首次提出了从草果中提取活性单体化合物的方法，并对其提取得到的活性单体化合物进行鉴定和实验验证，充分证明了草果中抗氧化活性物质草果素的抗氧化性能，为草果的进一步综合开发利用提供研究基础。
附图说明
[0017]图1为单体化合物Ⅰ的紫外光谱图。
[0018]图2为单体化合物Ⅰ的质谱图。
[0019]图3为单体化合物Ⅰ对DPPH自由基的清除能力图。
[0020]图4为单体化合物Ⅰ对ABTS自由基的清除能力图。
[0021]图5为单体化合物Ⅰ对超氧阴离子自由基的清除能力图。
[0022]图6为单体化合物Ⅰ对羟基自由基的清除能力图。
[0023]图7为单体化合物Ⅰ对螯合亚铁离子的能力图。
[0024]图8为单体化合物Ⅰ对Fe
3+
的还原能力图。
具体实施方式
[0025]下面将本专利技术的专利技术目的、技术方案和有益效果作进一步详细的说明。
[0026]应该指出，以下详细说明都是示例性的，旨在对所要求的本专利技术提供进一步的说明，除非另有说明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本专利技术所属
的普通技术人员通常理解的相同含义。
[0027]刘小玲等在“香辛料草果中化学成分的定性研究”（《中国调味料》，2011年第1期总第36卷，104
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106）中通过水提取、乙醇提取、石油醚提取等提取方法对草果中的化学成分进行较全面的定性研究，表明了草果中含有糖类、蛋白质、氨基酸、酚类、鞣质、有机酸、皂苷、黄酮、蒽醌、香豆素、内酯、强心苷、甾体、萜类、挥发油、油脂、花青素等多种化学成分。由此可以知道，草果具有丰富的化学成分，而现有的草果提取物抗氧化活性物质的研究，通常针对草果中某一类提取物而进行，但这些现有研究中并未阐明草果抗氧化活性的物质基础。例如袁园等在“草果总黄酮的提取及DPPH自由基清除活性研究”中采用超声波辅助法提取草果总黄酮，并通过试验证明草果总黄酮的DPPH自由清除率为80.5%。又如李志君等在“草果多酚物质提取及LC
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MS/MS分析”（《食品工业科技》，2017年第08期，294
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334）中采用提油后的草果粉末进行多酚物质提取，经试验证明，该草果多酚具有一定的DPP本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从草果中提取分离草果素的方法，其特征在于：包括以下步骤：A.以草果药材为原料，粉碎后用乙醇回流提取，再经减压浓缩后得到浓缩液；B.将浓缩液稀释后用乙酸乙酯进行萃取，得到乙酸乙酯提取物，浓缩制得乙酸乙酯提取物浸膏；C.取乙酸乙酯提取物浸膏，经硅胶柱层析分离和C18柱反向分离后，得到草果素。2.根据权利要求1所述的一种从草果中提取分离草果素的方法，其特征在于：所述步骤A中，用质量浓度为95%的乙醇回流提取2～3次，每次回流提取时间控制在1.5～2h。3.根据权利要求1所述的一种从草果中提取分离草果素的方法，其特征在于：所述步骤A中，将回流提取得到的提取液在50～55℃下减压浓缩至无醇后，得到所述浓缩液。4.根据权利要求1所述的一种从草果中提取分离草果素的方法，其特征在于：所述步骤B中，将浓缩液加水稀释2～3倍后，取等体积的乙酸乙酯萃取2次，得到乙酸乙酯提取物。5.根据权利要求1所述的一种从草果中提取分离草果素的方法，其特征在于：所述步骤B中，将乙酸乙酯提取物在45℃下减压浓缩制得乙酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄锁义，郑皓元，黎威林，刘丁，陈石梅，李童，谢欣，林瑶，黄上峰，喻巧容，
申请(专利权)人：成都普思生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：