本发明专利技术涉及筛选人组织或流体样品中以癌症(如膀胱癌)中较差预后为特征的基因(尤其是CGB2和CGB1)的表达变化的方法。这些方法应用于筛选、诊断或监测其他常见上皮癌，包括膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、子宫内膜癌、肾癌、肺癌(包括小细胞肺癌-SCLC)、鼻/咽癌、口/脸癌、卵巢癌、前列腺癌、胰腺癌、阴道癌和阴户癌。还公开了通过降低CGB2和CGB1或其产物的表达水平来治疗癌症的方法。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】CGB2和CGB1基因;癌症的诊断、监测和治疗 专利
本专利技术设及筛选人组织或流体样品中W癌症（如膀脫癌）中较差预后为特征的基 因的表达变化的方法。运些方法应用于筛选、诊断或监测其他常见上皮癌，包括膀脫癌、乳 腺癌、宫颈癌、结肠癌、子宫内膜癌、肾癌、肺癌(包括小细胞肺癌-S化C)、鼻/咽癌、口 /脸癌、 卵巢癌、前列腺癌、膜腺癌、阴道癌和阴户癌。
技术介绍
对于癌症存在非常少的确定性测试且通常仅使用细胞学确认诊断。细胞的取样仅 在显示症状W后且此时通常癌症在治疗功效点W外发展。此时，癌症通常是致命的。目前的 癌症诊断方法包括行为、遗传学、生物化学、化学和组织学标志物且通常对特定类型或亚类 的癌症是高度特异的。之前已表明人绒膜促性腺激素化CG)的特定基因及其亚基在具有其 基因时是癌症的标志物(JM Bidad专利US 6，194，154)。 hCG的检测最常用于检测和监测卵巢和睾丸的妊娠滋养细胞疾病和生殖细胞肿 瘤。虽然存在相关应用，但很少使用hCG的β亚基化CGi3)DhCG是一种糖肤激素，其由胎儿胎盘 的合胞滋养层产生，并且分子量为约36千道尔顿。其可通过在受精后数天内基于母体血清 和尿液中的免疫测定来检测。完整的hCG分子是异质二聚体，其包含特定的β亚基，该亚基非 共价结合至α亚基，运对于其它糖蛋白是常见的。hC?3异位表达于所有上皮癌症的约32%中 且与较差预后、快速转移和早期死亡相关。 因为hCG通常仅发现于妊娠中，任何可检测水平的hC?3都可指示癌症;但升高程度 可W是高度可变的且可在癌症患者的血清和尿液W及癌组织本身中检测。hCG和hC地都降 解为泌尿产物，称作人绒膜促性腺激素 β核屯、片段化CG化f)。 hC地通过6个hC地基因直向同源物的基因簇表达于19q 13.32处的染色体19上区 域，运6个基因直向同源物最初命名为CGB1、CGB2、CGB3、CGB5、CGB7和CGB8，其靠近编码化地 亚基的CGB4基因。后续的测序研究显示，基因 CGB7和CGB3还具有等位基因变体，分别是CGB6 和CGB9dCGB3现在简称为CGB且可能是L册基因（CGB4)附近产生的基因簇中第一个真CGB基 因。参见图1。 在妊娠和癌症中，mRNA分析已显示所有CG基因都是有活性的但程度显著不同。自 1982年首次描述W来CGB1和CGB2被认为是假基因，因为其似乎无法生成成熟的hC?3蛋白。 由于可变剪接，注意到基因 CGB1或CGB2产生的信使比其他基因产生的短并且转录产生Ξ个 剪接变体，其中仅一个剪接变体代表可翻译成功能性hC?3蛋白的产物且运被认为不可能发 生。最近，研究表明CGB1剪接变体在妊娠前Ξ个月内受到某种程度的上调。 最初完成LH-CGiV基因簇的完整克隆后，其他研究表明存在两类生成hC地的基因， 称作类型I和II。类型I指似乎导致合成117位处具有丙氨酸残基的hc?3蛋白的CGB7的基因 产物且类型II指CGB、CGB5和CGB8的基因产物(其在117位处均编码天冬氨酸残基）。运些研 究形成了JM Bidad美国专利号6,194,154的基础。最近，其他关于乳腺癌、肺癌和肾癌的研 究都显示CGB7W相对低水平表达，运与运些最初所声称的不一致。 在人基因组内整合CGBl和CGB2被认为基于w下结果在基因簇中进化:取代启动子 近端处的52bp序列和祖传 hC地亚基编码基因片段的整个5'-UTR的DNA片段(对于CGB1而言 是736bp且对于CGB2而言是724bp)插入，其仍存在于CGB、CGB5、CGB7和CGB8中。基因 CGB1和 CGB2的外显子2和3的0RF中一个碱基对的移码已被提出导致转录本中任选较早的终止密码 子和较短的外显子3。因此，不同于各自生成单个mRNA转录本的CGB、CGB5、CGB7和CGB8，CGB1 和CGB2潜在具有多个剪接变体，其与成熟的hC地具有很少或不具有类似性。运些变体包括 主要的23化P转录本，其编码CGB1和/或CGB2基因的一种理论氨基酸蛋白质（迄今为止未被 分离或表征)和Ξ种其他的剪接变体:+47、+166、+176bp (图1 )，其含有内含子1内提取的额 外的47、166和176bp DNA序列。+47bp变体的替代性理论形式将来自0RF再偏移至经典hC地 编码转录本且可因此从内含子1的中部生成额外的短转录本(基本是另一个外显子，称作外 显子化）。替代性mRNA+166bp和+176bp可理论上编码长度为约60个氨基酸的较短多肤。 CGB1和/或CGB2(主要是CGB2)的表达与癌症转移相关hC地蛋白（CMAhCGf3)的分泌 特异性相关；而CGB基因（CGB3、CGB5、CGB7和CGB8 mRNA)的检测不相关。因此，CGB1和/或 CGB2 mRNA检测是转移性和侵略性癌症表型的诊断。 CGB7的表达水平似乎总是低于基因 CGB1和CGB2(其总被忽略）dCGB1和CGB2在癌症 中的表达程度高于CGB、CGB5和CGB8且形成本专利技术的基础，因为其负责与转移性癌症相关的 hC?3蛋白的表达和分泌。
技术实现思路
根据本专利技术，提供了一种检查癌性病症的方法，该方法包括显示CGB1和/或CGB2基 因/假基因或至少一种运些基因/假基因的产物的表达。具体而言，该方法检测和/或测量 CGB1和/或CGB2的230bp剪接变体或至少一种运些基因的产物的表达。优选地，该产物是蛋 白质CMAhC地。 在本专利技术的另一个方面中，提供了一种试剂盒，用于检测CGB1和/或CGB2基因/假 基因或至少一种运些基因/假基因的产物的表达。 本专利技术还提供了 CGB2或CGB1的表达产物，优选23化P剪接变体。该表达产物优选是 核酸序列、蛋白质或肤。优选地，该产物是蛋白质CMhCGP。 CGB1和/或CGB2的表达产物可用于本专利技术的方法中。因此，在本专利技术的另一个方面 中，提供了用于检查癌性病症(优选上皮癌）的CGB1和/或CGB2的表达产物。 在另一个方面中，本专利技术提供了一种用于治疗癌性病症(优选上皮癌）的组合物， 其包含能够降低分泌性hC地的水平的试剂。该上皮癌优选已被发现分泌hCGi3。该组合物可 包含阻止hC?3表达的试剂，例如siRNA分子。或者，该组合物可包含结合分泌的hC?3的试剂 (如抗体）。 本专利技术还设及一种治疗癌性病症(优选上皮癌）的方法，所述方法包括向有此需要 的对象给予有效量的能够降低分泌的hC?3的水平的试剂。 本专利技术还提供了一种组合物，其包含能够降低分泌的hC?3的水平的试剂。[001引专利技术详述 CGB1和CGB2在本专利技术中称作基因而非假基因，原因在于，虽然迄今为止它们被认 为是假基因，但已在本申请中显示运些基因是表达的。 根据本专利技术，提供了一种检查癌性病症的方法，该方法包括显示CGB2和/或CGBl基 因/假基因或至少一种运些基因/假基因的产物的表达。具体而言，该方法检测和/或测量 CGB2和/或CGB1基因的23化P剪接变体的表达。优选地，通过测定是否存在表达产物和/或表 达产物的量来检测和/或测量表达，所述表达产物是例如mRNA、cDNA、肤或蛋白质。获自对象 的样品中存在CGB2和/或CGB1的表达产本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种检查上皮癌的方法，所述方法包括检测和/或测量CGB2和/或CGB1基因的表达产物。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：R·K·埃尔斯，S·A·巴特勒，
申请(专利权)人：曼普知识产权控股有限公司，
类型：发明
国别省市：英国;GB
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