DTT在提高CELI家族酶活性中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种DTT在提高CELI家族酶活性中的应用。本发明专利技术的DTT在酶切缓冲液中的浓度为0.01-10mM。本发明专利技术的方法更为灵敏，DTT的终浓度在0.01-10mM范围内都可以提高CELI酶和CELII酶的检测灵敏度。对低丰度未知突变体的检测，如某癌症基因都有很好的检测效果，特别是TILLING技术平台检测诱变群体时，有明显优势，不仅仅简化了PCR纯化步骤，同时相应地提高了检测分辨率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及DTT在提高CELI家族酶活性中的应用，属于生物

技术介绍
CELI酶是一种单链、双链都特异识别的特异性核酸酶，等电点为6.0-6.5，分子量大小为43kDa(Yang et al,1999)；CEL II酶被认为是CEL I的降解产物，其分子量大小为39kDa，CEL I酶和CEL II酶均属于CELI家族酶(Yang et al,1999；Pimkin et al,2006)。传统理论认为该酶的催化活性只需要Mg2+和Zn2+(Till et al,2004)，它可以识别八种错配形式的碱基(mismatches)分别为AA、AG、AC、GG、GT、CC、CT和TT(Oleykowski et al,1999；Oleykowski et al,1998)，因此被广泛应用于突变检测领域，如植物TILLING技术平台中(Till et al,2006)。该酶可以特异性切割错配碱基(Bing Yang et al,1999)。通过酶切扩增的目标检测片段并经琼脂糖或毛细管电泳分离检测，一般可方便获得突变位置和大小。因此，它是一种比较方便和经济的检测未知和已知突变位本文档来自技高网...

【技术保护点】
DTT在促进CELI家族酶酶活性中的应用；或DTT在制备CELI家族酶酶切缓冲液或CELI家族酶酶切缓冲体系中的应用。

【技术特征摘要】
1.DTT在促进CELI家族酶酶活性中的应用；或DTT在制备CELI家族酶酶切缓冲液或CELI家族酶酶切缓冲体系中的应用。2.含有DTT的CELI家族酶酶切缓冲液，其特征在于：所述DTT在所述CELI家族酶酶切缓冲液中的浓度为0.01-10mM。3.根据权利要求2所述的含有DTT的CELI家族酶酶切缓冲液，其特征在于：所述DTT在所述CELI家族酶酶切缓冲液中的浓度为0.01-0.5mM、0.5-10mM或0.01-6mM。4.一种酶切反应体系，包括权利要求2或3所述的含有DTT的CELI家族酶酶切缓冲液和CELI家族酶。5.含有权利要求2或3所述的酶切缓冲液或权利要求4所述的酶切反应体系的试剂盒。6.权利要求2或3所述的酶切缓冲液或权利要求4所述的酶切反应体系或权利要求5所述的试剂盒在促进...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘春明，姚学峰，
申请(专利权)人：中国科学院植物研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11