【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种用于癌症个体化诊断治疗的重要基因富集方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:制备相应的DNA探针微阵列,将包含靶向区域的DNA探针连接进入转录表达载体,并在体外表达RNA探针;使用biotin标记的单个碱基合成RNA,使合成的RNA探针得到充分的biotin标记;将待测DNA通过非接触式超声破碎方案破碎成300‑500bp的小片段,使用分子生物学方案将小片段末端补平,加上一个“A”碱基,并与带有“T”碱基测序配体连接;使用配体相应的扩增引物对连接产物进行扩增,获得基因组测序文库;将测序文库在95摄氏度加热5分钟形成单链DNA,然后在65摄氏度加入上述RNA探针与DNA文库进行24小时的杂交;然后使用能够特异性结合RNA探针上biotin标记的磁珠,在磁场作用下对DNA/RNA探针复合物进行富集和清洗,使用氢氧化钠洗脱DNA文库并进行扩增,收集靶向测序文库;使用二代测序平台对靶向测序文库进行靶向测序,经过分析得到靶向区域的DNA序列。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:阎海,焦宇辰,王晓月,王思振,熊梓锴,
申请(专利权)人:北京泛生子生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:北京;11
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。