淋球菌抗个体基因型抗体及其使用方法和组合物技术

一种抗个体基因型单克隆抗体，或其片段，其特征为具有一个与第二抗体的个体基因型发生免疫特异性结合的抗原结合位点，而第二抗体与淋病奈瑟氏球菌的寡糖抗原决定基结合，该寡糖抗原决定基在人血型抗原中不存在。（*该技术在2014年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及抗淋病奈瑟氏球菌(Neisseria gonorrhoeae)的抗个体基因型抗体。本专利技术还涉及使用这种抗个体基因型抗体的方法和组合物、用于预防、治疗和诊断淋病感染。性传染病(淋病)作为一种最普遍报道的传染病形成了世界范围的危害。淋病由细胞淋病奈瑟氏球菌(一种革兰氏阴性双球菌)引起。尽管病原体首先感染粘膜，但它能侵入组织并躲避宿放防御。淋病奈瑟氏球菌是一系列后遗症的病原体。这些后遗症范围包括在男人和妇女中从无症状的粘膜感染到明显的疾病综合症。例如，这些综合症中较严重的包括在男人和妇女中传播淋球菌感染，以及妇女输卵管炎或骨盆发炎疾病(PID)，输卵管炎或PID本身可能导致长期的后遗症，包括子宫外孕和不育。其它重要的后遗症(有时需要外科治疗)包括再发性感染，慢性腰痛，交媾困难，骨盆粘连和其它发炎后遗症。在美国，估计1984年用于治疗PID和有关子宫外孕和不育的直接和间接花费为2.6个十亿美元(65)。1990年总的直接花费估计是2.18个十亿美元，间接花费为1.54个十亿美元。假定通货膨胀率和PID的发病率不变，到2000年该疾病预计的总花费将达到8个十亿美元(6)。尽管在美国控制淋球菌感染所做出的公共卫生努力和有效抗生素治疗的可获得性，疾病控制中心(CDC)每年报道的淋病病例大约为一百万(9)。所有淋病病例中大部分发生在无症状的感染个体中，他们是群体中最新病例的来源(4)。抗生素抗性菌株流行的增加使感染的治疗复杂化(7，8，64)。淋病瑟氏球菌有多种毒性因子。该病原体表面成份在附着和侵入宿主细胞中发挥着重要作用，也为宿主免疫应答提供了有效靶。淋球菌感染引起对作为细菌表面暴露抗原的一些成份产生局部和全身的体液和细胞免疫应答，尤其是对菌毛，Porin(Por)或蛋白质I(PI)，浊度相关性蛋白质Opas)或蛋白质IIs，Rmp或蛋白质III，和脂寡糖(LOS3)(5)。菌毛，Opa，Por和LOS都涉及附着和侵入宿主并在其表面暴露区都表现出重要的变化(33，56，57)。淋球菌表面成份的菌株内和菌株间变化导致有假说认为在不同的位点有组织特异性并且该生物体具有再感染和持续致病性的潜力。在有症状和无症状的病人中，淋球菌感染显示出刺激抗淋球菌血清免疫球蛋白的水平增加。外周体液应答占优势的是IgG(主要是IgG3亚类)，IgM和IgA的量较少(11)。在数量上，抗体反应首先发生在抗菌毛，Opa蛋白质和LOS。局部抗体存在于生殖分泌物中，但量减少(59)，并且可能抗与在血清中相比不同的抗原靶(34)。存在于分泌物中占优势的抗体类型也是IgG(主要是IgG3)而不是分泌IgA(sIgA)(5)。抗LOS的抗体也存在，但与抗菌毛，Por和Opa的抗体相比量较少。尽管感染淋病奈瑟氏球菌的病人可能表现出对许多淋球菌抗原的抗体反应，但从传播感染(DGI)的病人中分离出的淋病瑟氏球菌对正常人血清(NHS)和大多数恢复期血清的杀菌作用具有抗性(46)。这种血清抗性表型(称作稳定血清抗性(SR))使该生物体能躲避局部防御，穿透粘膜屏障并经血流传播。经过传代培养，许多淋球菌菌株变得在表型上对由NHS引起的杀伤敏感或血清敏感性(46)。这些生物体称为血清敏感型(SS)(或不稳定血清抗性)。该生物体通常从带有严重局部炎症症状或有PID临床迹象的妇女中分离出。急性输卵管炎与PID(由SS淋球菌引起)在病理学上相似，它很少发展成败血症或DGI。这表明由SS淋球菌引起的剧烈的局部炎症反应可用于控制感染和防止败血症，尽管需要付出损伤局部组织的代价。SS淋球菌与SR淋球菌相比引起产生的来自于趋化肽的补体(C5a)的量明显更大(12)。这可能对由SS淋球菌引发的多形核白细胞(PMN)介导的炎症反应负责。淋病奈瑟氏球菌抗生素抗性菌株的发展，使得对这种感染的控制越来越困难。治疗中的淋球菌感染的效果加速了对抗淋球菌疫苗的需要。预防淋球菌感染，尤其是PID的严重并发症成了许多研究者的目标。然而，不断发展中的产生有效抗淋球菌疫苗的尝试面临着一些困难。由于其抗原的变异性，使用病原体的单个表面成份作为常规疫苗靶的尝试尚未成功。菌毛疫苗仅对同源菌株(用于生产菌毛疫苗)的感染具有保护性，且即使在人类实验攻击中，Por接种尚未成功。而且，淋病奈瑟氏球菌表现出显著的表型多相性，典型地以103个生物体中＞1的频率从一种抗原形式变化成另一种抗原形式(60，61)，使得该生物体的表面对大多数疫苗方案产生一种移动靶。尽管侯选疫苗激发抗体反应，但产生的抗体和免疫应答不具备广泛的保护性。LOS是一种重要的淋病奈瑟氏球菌致病决定簇。相当多的证据支持LOS充当抗淋病奈瑟氏球菌表面之杀菌抗体的主要靶(1，12，17，43，58)。抗LOS抗体有一些重要功能杀菌活性，通过典型的或选择性补体途径进行补体激活(1)，和调理活性(12)。而且，LOS显示出是诱导抗同源和异源淋球菌之功能性抗体反应的最有效的淋球菌抗原(63)。单克隆抗体(mAb)2C7(36)检查LOS衍生的寡糖(OS)抗原决定基显示出广泛的保守性和在淋球菌临床分离物中表达。典型地，糖类是T细胞依赖性抗原。当作为免疫单独用药时，它们一般仅引发初级抗体反应。而且寡糖较小(＜10个糖单位)(20)，很可能需要增加生化衍生作用才能引起其免疫原性。因此，这种寡糖用作侯选疫苗受到一些方面的局限。已有建议将分子内构象决定簇用于疫苗(42)。通过mAb技术，可生产出抗病原体上感兴趣的抗原决定簇之保护性抗体(Ab1)。可纯化这种特定的抗体(Ab1)并随后用作诱导抗个体基因型抗体(Ab2)的免疫原，Ab2可能是病原体原始抗原决定基的一种分子内构象。根据Jerne“网状”理论的预测(24)，用抗个体基因型抗体(Ab2)进行抗第一抗体(Ab1)之抗原结合位点的免疫可能诱导对名义上的抗原之特异性的体液免疫反应。所得的抗—抗个体基因型抗体(或Ab3)应与原始第一抗原发生反应。如果第一抗原是寡糖(且因此预期产生不依赖于T细胞的免疫应答)，则用Ab2(相当于蛋白质)进行的免疫可能诱导T细胞依赖性应答。在动物系统中使用抗个体基因型抗体成功地提高了抗各种病原体的保护性抗体(28，29，40，51，52，53，66)。抗个体基因型抗体不包含名义上的抗原(如糖抗原的例子)，因而避免了与将该抗原用作免疫原相关的不必要的有害影响。抗个体基因型抗体是蛋白质抗体，它们通常(但并不总是)充当T细胞依赖性免疫原(30)。为防止淋球菌输卵管炎(可能与虚弱和慢性腰痛，不育和子宫外孕相联系的一种感染)。存在对用于预防或治疗淋病之药剂的需要。另一个重要的目的是防止该生物体从被感染但无症状的宿主传染给其他免疫的性伙伴。其重要性在于男人和妇女所有淋病病例中。极大的一部分是无症状的，而且被感染后无症状的，性活跃的人很可能是大多数新感染的主要传染源。因此，仅能减轻有症状的淋病之严重性的淋球菌疫苗可能导致无症状/有症状病例的比率更高，其结果是该疫菌可能促进淋病的传播、除非它也能阻止其传染(49)。本专利技术经提供抗个体基因型抗体及其片段普遍解决了上面提到的问题，该抗体及其片段的抗原结合位点与识别在人血液抗原组中并不存在的淋病奈瑟氏球菌寡糖抗原决定基之抗体发生免疫特异性结合本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：P·A·赖斯，S·古拉蒂，D·P·麦奎伦，
申请(专利权)人：波士顿市健康与医院理事会，
类型：发明
国别省市：