生物组织样本的冻存方法和生物组织冻存容器技术

本发明专利技术提供了一种生物组织的冻存方法和生物组织冻存容器，冻存方法包括：将生物组织置于承载片的表面，将粘附有生物组织的承载片沿生物组织冻存容器的长轴方向放置于生物组织冻存容器中，密封生物组织冻存容器并置于低温下冻存；冻存容器包括容器本体、密封盖和至少一个用于承载分离后的生物组织的承载片，该承载片可分离地置于容器本体内；本发明专利技术的冻存方法能够解决由于生物组织容易被冻存在生物组织冻存容器的内壁上而产生的生物组织不易被识别、不易被取出或者在取出时受损的问题，并且能避免生物组织在制作冰冻切片时被反复冻融的情况出现，从而有利于对生物组织的样本质量(例如所含的RNA、蛋白、抗原、抗体等生物大分子)的保护。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医疗器械
，涉及一种生物组织的冻存方法和生物组织冻存容器。
技术介绍
在研究生物体生命活动的过程中，常常将离体生物组织作为实验对象进行研究，这些组织包括正常组织或肿瘤组织等。为了对生物组织的结构特性或生化特性进行更深入的研究，常常需要先对生物组织进行低温保存(例如在液氮中进行保存)，在冻存后不同的时候按需求再进行对这些生物组织的研究。冻存容器常被用来执行对生物组织的低温保存这一功能。为了使冻存容器既能长期维持低温保存功能又能便于人们随时取出在冻存容器内保存的生物组织，冻存容器常常用耐低温的透明材料制成，例如聚三氟氯乙烯、聚四氟乙烯等；然而，如果冻存后的生物组织为白色或透明组织，当其粘附在冻存容器的内壁上时，往往与冻存容器的色差较小而不容易被人眼识别并取出。另外，生物组织在低温下大多会冻成一团并且牢牢地粘贴在冻存容器的内壁上，通常呈团状沉积在冻存容器的最底部，这常常使得生物组织在低温下不易取出。若使用镊子等夹取装置从冻存容器上强行剥离生物组织，则有可能对生物组织的形态学造成不可逆的损害，进而影响到实验结果的稳定性。一般采取的方法是先将生物组织在常温下放置一定时间，待生物组织表面温度升高，处于解冻状态时，再取出生物组织并置于冰冻切片机的样品托上，使用冷冻包埋液包埋后再次低温冷冻，然后进行切片、染色以及进行形态学观察，或进行任何其他相关研究。这样的操作会造成生物组织的反复冻融，有可能对生物组织的结构产生影响，从而不利于后续的形态学观察，也可能造成生物组织内的RNA、DNA或蛋白质等大分子物质的变性和降解，从而影响到生物组织标本的质量，进而对实验结果产生不利的影响。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术的主要目的在于提供一种生物组织的冻存方法，该方法一方面能够解决由于生物组织被冻存在冻存容器的内壁上而导致的不易被识别或者不易被取出的问题，另一方面能够避免生物组织在制作冰冻切片时被反复冻融，从而有利于对组织标本质量的保护。本专利技术的另一个目的在于提供一种能够实现上述方法的生物组织冻存容器。为达到上述目的，本专利技术的解决方案是：一种生物组织的冻存方法，其包括如下步骤：(1)、将分离后的生物组织置于承载片的表面；(2)、将粘附有生物组织的承载片沿生物组织冻存容器的长轴方向放置于生物组织冻存容器中；(3)、密封生物组织冻存容器并置于低温下冻存。在本专利技术的优选实施例中，承载片可以为软木片。在本专利技术的优选实施例中，软木片可以进一步含有以下组分：软木脂45±5wt％、木质素27±3wt％、纤维素12±3wt％、丹宁酸6±3wt％、蜡状物5±1wt％和杂质成分5±1wt％，其中，软木脂、木质素、纤维素、丹宁酸、蜡状物和杂质成分的重量百分比之和应为100wt％。在本专利技术的优选实施例中，软木片可以优选为含有以下组分：软木脂45wt％、木质素27wt％、纤维素12wt％、丹宁酸6wt％、蜡状物5wt％和杂质成分5wt％；此时，软木片的抗拉强度为770N/mm2，或维氏硬度为240HV，或布氏硬度为228HB，或洛氏硬度为20.3HRC。在本专利技术的优选实施例中，生物组织可以包括人体组织或哺乳动物器官组织。在本专利技术的优选实施例中，低温优选为在‐20℃以下。一种使用上述的冻存方法对生物组织进行冻存的生物组织冻存容器，包括：容器本体、与容器本体可拆卸连接的密封盖、以及至少一个用于承载分离后的生物组织的承载片，承载片沿容器本体的长轴方向可分离地置于容器本体内。在本专利技术的优选实施例中，承载片可以为软木片。在本专利技术的优选实施例中，软木片可以优选为含有以下组分：软木脂45±5wt％、木质素27±3wt％、纤维素12±3wt％、丹宁酸6±3wt％、蜡状物5±1wt％和杂质成分5±1wt％，但软木脂、木质素、纤维素、丹宁酸、蜡状物和杂质成分的重量百分比之和应为100wt％。在本专利技术的优选实施例中，软木片的厚度可以为6±2mm。在本专利技术的优选实施例中，容器本体的内底面可以设有至少一条用于固定承载片的端部的固定槽，固定槽的槽口宽度等于承载片的端部的厚度。在本专利技术的优选实施例中，容器本体的内侧壁可以设有至少一个用于固定承载片的侧边部的卡合部。在本专利技术的优选实施例中，卡合部可以为卡槽，卡槽的槽口宽度等于承载片的侧边部的厚度。在本专利技术的优选实施例中，卡合部可以包括两个对向设置的卡槽，卡槽的槽口宽度等于或大于承载片的侧边部的厚度。由于采用上述方案，本专利技术的有益效果是：首先，本专利技术采用与生物组织冻存容器可分离的承载片来承载分离后的生物组织，然后将承载有生物组织的承载片放入生物组织冻存容器中冻存，生物组织在被冻存时粘附在承载片上，而不会粘附到生物组织冻存容器的内壁上，从而解决了当前的冻存方法中由于生物组织块被冻存到生物组织冻存容器的内壁上而造成的不易被识别或不易被取出的问题。其次，由于承载片具有良好的吸水性，而新鲜分离的生物组织是湿润的，故而很容易粘附在承载片上而不易移动位置，操作者可以在冻存之前就将生物组织调整到所需的位置；当此后需要使用该生物组织作冰冻切片时，可直接快速将承载片取出，无需等生物组织解冻即可直接制成冷冻切片或其他冷冻状态下的组织样品，使得生物组织在冰冻组织样品中很大程度保持冻存前的状态，能够避免在制作冰冻组织样品时对生物组织所进行的反复冻融，有利于降低反复冻融对生物组织造成的损害，例如降低反复冻融对其中所含的RNA、蛋白、抗原抗体等生物大分子所造成的损害。附图说明图1为本专利技术实施例二的生物组织冻存容器的示意图。图2为本专利技术实施例二的放置了承载片的生物组织冻存容器的示意图。图3为本专利技术实施例二的样品托的示意图。图4为本专利技术实施例二中固定了承载片的样品托的侧视图。图5为本专利技术实施例三的生物组织冻存容器的容器本体的示意图。图6为本专利技术实施例四的生物组织冻存容器的容器本体的内底部示意图。图7为本专利技术实施例四的放置了承载片的生物组织冻存容器的容器本体的俯视图。图8为本专利技术实施例四的放置了承载有生物组织的承载片的生物组织冻存容器的容器本体的俯视图。图9为本专利技术实施例五的生物组织冻存容器的容器本体的俯视图。图10为本专利技术实施例五的放置了承载片的生物组织冻存容器的容器本体的俯视图。图11为本专利技术实施例六的生物组织冻存容器的容器本体的俯视图。图12为本专利技术实施例六的放置了承载片的生物组织冻存容器的容器本体的俯视图。图13为本专利技术实施例六的放置了承载有生物组织的承载片的生物本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种生物组织的冻存方法，其特征在于：包括如下步骤：将分离后的生物组织置于承载片的表面；将粘附有所述生物组织的承载片沿生物组织冻存容器的长轴方向放置于所述生物组织冻存容器中；密封所述生物组织冻存容器并置于低温下冻存。

【技术特征摘要】
1.一种生物组织的冻存方法，其特征在于：包括如下步骤：
将分离后的生物组织置于承载片的表面；
将粘附有所述生物组织的承载片沿生物组织冻存容器的长轴方向放置于所述生物组织冻
存容器中；
密封所述生物组织冻存容器并置于低温下冻存。
2.根据权利要求1所述的冻存方法，其特征在于：所述承载片为软木片。
3.根据权利要求2所述的冻存方法，其特征在于：所述软木片含有软木脂45±5wt％、木质
素27±3wt％、纤维素12±3wt％、丹宁酸6±3wt％、蜡状物5±1wt％和杂质成分5±1wt％，
软木脂、木质素、纤维素、丹宁酸、蜡状物和杂质成分的重量百分比之和为100wt％。
4.根据权利要求2所述的冻存方法，其特征在于：所述软木片含有软木脂45wt％、木质素
27wt％、纤维素12wt％、丹宁酸6wt％、蜡状物5wt％和杂质成分5wt％；或者，所述软木
片的抗拉强度为770N/mm2，维氏硬度为240HV，布氏硬度为228HB，洛氏硬度为20.3HRC。
5.根据权利要求1至4中任一所述的冻存方法，其特征在于：所述生物组织包括人体组织
或哺乳动物器官组织；或者，所述低温为‐20℃以下。
6.一种实现如权利要求1至5中任一所述的冻存方法的生物组织冻存容...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜祥，
申请(专利权)人：复旦大学附属肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：上海;31