本发明专利技术涉及一种蓝舌病病毒冻存保护剂及冻存方法，其中本发明专利技术中的一种蓝舌病病毒冻存保护剂包括以下重量份的原料组成：基本培养基80‑120ml，PH稳定剂1‑5ml，冻存保护剂2.5‑11ml，血清白蛋白0.5‑2ml，百菌除0.5‑2ml，马血清5‑10ml，本发明专利技术的冻存保护剂经过恰当的组合和配比后，形成的配方能够有效的保护病毒，使之在病毒冻存的过程中活力不会下降。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及蓝舌病病毒冻存领域，尤其涉及一种蓝舌病病毒冻存保护剂。
技术介绍
蓝舌病病毒(Blue Tongue Virus, TV) 是引起蓝舌病（Blue Tongue, BT）的病原，该病为由库蠓传播的反刍动物病毒性传染病,能够引起重大经济损失，为世界动物卫生组织(OIE)将其列为A类动物疫病。保存蓝舌病病毒毒株的是进行蓝舌病疫苗研究、蓝舌病诊断方法开发、蓝舌病防控技术研究的基本条件。蓝舌病在室温条件下和超低温条件是很稳定的，可以保存一段时间，是目前的主要保存病毒的方式。但是一旦进行冻存，蓝舌病病毒活性会快速下降 。蓝舌病病毒的这种特性给病毒的冰冻保存带来了很大的困难。蓝舌病病毒对冻存敏感的原因主要是病毒外壳的VP2和VP7容易被冰晶破坏。恰当的冻存保护剂能够保护病毒不受破坏。但是目前市场上未见到针对病毒设计的冻存保护剂，有用于细胞的冻存保护剂主要为渗透性冷冻保护剂（DMSO、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇等）和非渗透性冷冻保护剂（聚乙烯吡咯烷酮（PVP）、蔗糖、聚乙二醇、葡聚糖、白蛋白以及羟乙基淀粉等），这些保护剂成分能够有效阻制冰晶对细胞的伤害，但是由于没有进行配方优化和筛选，可能会对病毒会造成不可逆转的伤害，是无法用于蓝舌病病毒保存中。
技术实现思路
鉴于目前技术存在的上述不足，本专利技术提供一种蓝舌病病毒冻存保护剂及冻存方法，本专利技术的冻存保护剂经过恰当的组合和配比后，形成的配方能够有效的保护病毒，使之在病毒冻存的过程中活力不会下降。本专利技术的采用如下技术方案：一种蓝舌病病毒冻存保护剂，包括以下重量份的原料组成：基本培养基80-120ml，PH稳定剂1-5ml，冻存保护剂2.5-11ml，血清白蛋白0.5-2ml，百菌除0.5-2ml，马血清5-10ml。作为本专利技术的优选技术方案，包括以下重量份的原料组成：基本培养基100ml，PH稳定剂3ml，冻存保护剂7ml，血清白蛋白1ml，百菌除1ml，马血清7ml。作为本专利技术的优选技术方案，所述冻存保护剂为DMSO、蔗糖中的至少一种。作为本专利技术的优选技术方案，所述冻存保护剂由DMSO和蔗糖组成，其中所述DMSO为5ml，蔗糖为2ml。本专利技术的另外一面，一种蓝舌病病毒冻存保护剂的冻存方法，包括以下步骤：将蓝舌病病毒与冻存保护剂按1:1混合；将混合后的蓝舌病病毒和冻存保护剂封装于安瓶中冻存，其中冻存温度为-20℃到-80℃。使用时在常温（25℃）解冻就可以使用。本专利技术的一种蓝舌病病毒冻存保护剂及冻存方法，其中本专利技术中的一种蓝舌病病毒冻存保护剂包括以下重量份的原料组成：基本培养基80-120ml，PH稳定剂1-5ml，冻存保护剂2.5-11ml，血清白蛋白0.5-2ml，百菌除0.5-2ml，马血清5-10ml，本专利技术的冻存保护剂经过恰当的组合和配比后，形成的配方能够有效的保护病毒，使之在病毒冻存的过程中活力不会下降。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。 图1为使用本专利技术冻存保护剂与不使用本专利技术冻存保护剂冻存蓝舌病病毒的示意图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1，本专利技术提供一种蓝舌病病毒冻存保护剂，包括以下重量份的原料组成：基本培养基120ml，PH稳定剂5ml，冻存保护剂11ml，血清白蛋白2ml，百菌除2ml，马血清10ml，其中基本培养基也就是MEM基本培养基，基础成分包括一些必须氨基酸和缓冲剂等，由Gibco公司生产；PH稳定剂为Hapers，由Solarbio公司生产；血清白蛋白具有保护病毒的作用，由Gibco公司生产；百菌除具有防止细菌污染，由Bayer公司生产；马血清提供一些基本的蛋白基质，有保护病毒的作用，由Gibco公司生产。实施例2，本专利技术提供一种蓝舌病病毒冻存保护剂，包括以下重量份的原料组成：基本培养基80ml，PH稳定剂1ml，冻存保护剂2.5ml，血清白蛋白0.5ml，百菌除0.5ml，马血清5ml，其中基本培养基也就是MEM基本培养基，基础成分包括一些必须氨基酸和缓冲剂等，由Gibco公司生产；PH稳定剂为Hapers，由Solarbio公司生产；血清白蛋白具有保护病毒的作用，由Gibco公司生产；百菌除具有防止细菌污染，由Bayer公司生产；马血清提供一些基本的蛋白基质，有保护病毒的作用，由Gibco公司生产。实施例3，本专利技术提供一种蓝舌病病毒冻存保护剂，包括以下重量份的原料组成：基本培养基100ml，PH稳定剂3ml，冻存保护剂7ml，血清白蛋白1ml，百菌除1ml，马血清7ml，其中基本培养基也就是MEM基本培养基，基础成分包括一些必须氨基酸和缓冲剂等，由Gibco公司生产；PH稳定剂为Hapers，由Solarbio公司生产；血清白蛋白具有保护病毒的作用，由Gibco公司生产；百菌除具有防止细菌污染，由Bayer公司生产；马血清提供一些基本的蛋白基质，有保护病毒的作用，由Gibco公司生产。实施例4，本专利技术提供一种蓝舌病病毒冻存保护剂，包括以下重量份的原料组成：基本培养基100ml，PH稳定剂3ml，DMSO5ml，蔗糖2ml，血清白蛋白1ml，百菌除1ml，马血清7ml，其中基本培养基也就是MEM基本培养基，基础成分包括一些必须氨基酸和缓冲剂等，由Gibco公司生产；PH稳定剂为Hapers，由Solarbio公司生产；血清白蛋白具有保护病毒的作用，由Gibco公司生产；百菌除具有防止细菌污染，由Bayer公司生产；马血清提供一些基本的蛋白基质，有保护病毒的作用，由Gibco公司生产；DMSO为防止冰晶产生成分之一，对病毒无伤害，由USB公司生产；蔗糖为防止冰晶产生成分之一，有保护病毒的作用，由SbaseBio公司生产。 本专利技术的另外一面，一种蓝舌病病毒冻存保护剂的冻存方法，包括以下步骤： 步骤S1：将蓝舌病病毒与冻存保护剂按1:1混合，其中冻存保护剂包括以下重量份的原料组成：基本培养基100ml，PH稳定剂3ml，DMSO5ml，蔗糖2ml，血清白蛋白1ml，百菌除1ml，马血清7ml。 步骤S2：将混合后的蓝舌病病毒和冻存保护剂封装于安瓶中冻存，其中冻存温度为-20℃到-80℃，使用时在常温（25℃）解冻就可以使用。 如图1所示，为使用本专利技术冻存保护剂与不使用本专利技术冻存保护剂冻存蓝舌病病毒的示意图。图1表明使用本专利技术后病毒活力在冻存过程中无明显下降，图1中，病毒活力用国际通用指标病毒毒价TCID50来表示，也就是病毒半数感染细胞的稀释度的反对数。蓝舌病病毒保存方式分为两部分，每部分包含100个装有1ML病毒安瓶，分别为不添加本专利技术进行冻存，和添加本专利技术进行冻存。然后每间隔一段时间，不同的冻存方式各取出6只进行毒价测定以排除毒价检测的随机影响，也便于本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种蓝舌病病毒冻存保护剂，其特征在于，包括以下重量份的原料组成：基本培养基80‑120ml，PH稳定剂1‑5ml，冻存保护剂2.5‑11ml，血清白蛋白0.5‑2ml，百菌除0.5‑2ml，马血清5‑10ml。
【技术特征摘要】
1.一种蓝舌病病毒冻存保护剂，其特征在于，包括以下重量份的原料组成：基本培养基80-120ml，PH稳定剂1-5ml，冻存保护剂2.5-11ml，血清白蛋白0.5-2ml，百菌除0.5-2ml，马血清5-10ml。2.根据权利要求1所述的一种蓝舌病病毒冻存保护剂，其特征在于，包括以下重量份的原料组成：基本培养基100ml，PH稳定剂3ml，冻存保护剂7ml，血清白蛋白1ml，百菌除1ml，马血清7ml。3.根据权利要求1-2任...
【专利技术属性】
技术研发人员：李乐，苗海生，李华春，
申请(专利权)人：云南省畜牧兽医科学院，
类型：发明
国别省市：云南;53
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