人源抗唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-9的抗体IgG及其应用，重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示。该人源抗体能够与唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-9特异性结合；体外细胞实验结果证实，人源抗唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-9抗体能够有效诱导唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-9阳性细胞的凋亡，抑制细胞因子的分泌，因此本发明专利技术的单克隆抗体可应用于重症哮喘、慢性阻塞性肺病、自身免疫性疾病、肿瘤等相关疾病的临床治疗及预防。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于单克隆抗体药物
，设及一种抗唾液酸结合免疫球蛋白样凝集 素-9(thesurfacemoleculesialicacid-bindingimmunoglobulin-likelectin-9， Siglec-9)的全分子人源单克隆抗体及其被编码的DM分子，W及该全分子人源单克隆抗 体在制备治疗重症哮喘、慢性阻塞性肺病、自身免疫性疾病和肿瘤等疾病药物中的应用。
技术介绍
唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素（thesurfacemoleculesialicacid-binding immunoglobulin-1化electin,Siglec)是免疫球蛋白超家族的重要成员，可通过识别含有 唾液酸的糖链结构介导细胞与细胞或病原体间的相互作用。最近几年研究显示，siglec家 族在细胞活化、增殖W及细胞调亡发挥重要作用，同时，在固有免疫和适应性免疫中也发挥 重要的调控作用，此外也可W参与免疫耐受的调控。 Siglecs是免疫球蛋白超家族成员，其分子结构共同特点是具有结合诞酸的能 力。唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素，表达于免疫细胞表面，介导抑制性信号。与其他抑 制性免疫受体家族相似，如杀伤细胞免疫球蛋白样受体和白细胞免疫蛋白样受体，siglecs 是跨膜分子，在胞质尾区包含免疫受体酪氨酸抑制基序ITIMs(immunorecepto;rtyrosine basedinhibitorymotifs，ITIMs)，在胞外存在免疫球蛋白超家族区域。与其他免疫球蛋 白超家族相比，siglecs的特性是其高特异性的配体唾液酸化的碳水化合物，不同于大部 分其他免疫受体结合蛋白。人类已经发现14种siglec:唾液酸粘附素（sigleclCD169)， CD22(siglec2)，CD33(siglec3)和髓憐脂相关的糖蛋白（MAGsiglec4)W及新近的cd33相 关的siglec(siglec5-ll)。除了siglec4表达于神经细胞，大部分siglecs家族表达于造 血细胞。 唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素9 (siglec9)是I型跨膜蛋白，免疫球蛋白超级族 的重要成员，主要是由胞外一个N末端的V区和两个C区免疫球蛋白样结构域，跨膜区和胞 质内区构成，N-末端免疫球蛋白样结构域V区介导唾液酸（SIA)的识别，胞质内区含有两个 免疫酪氨酸抑制基序（ITIM)。近膜基序ITIM酪氨酸憐酸化，募集抑制性憐酸酶类，如Src 同源区2包括酪氨酸憐酸醋酶1 (SHP-1)、SHP-2和SH2肌醇憐酸酶（SHIP)，从而介导下游 酪氨酸激酶憐酸化，并向胞内传递抑制性或是致死性信号。 阳0化]Siglec-9在中性粒细胞和单核细胞高表达，在NK细胞、CD4+和CD8叮细胞的某些 亚群低表达。在骨髓造血干细胞分化的中晚期，中幼粒细胞膜表面即可出现Siglec-9的表 达，Siglec-9参与中性粒细胞的分化、发育和死亡等多个生理过程，是调节中性粒细胞固有 免疫的重要功能受体。肺组织大量嗜酸性粒细胞浸润伴中性粒细胞增多是重症哮喘重要的 病理生理特点，抗Siglec-9抗体的替代治疗兼顾两者PCD，可能在重症哮喘、慢性阻塞性肺 病、自身免疫性疾病、肿瘤等疾病的治疗中具有潜在的治疗价值。
技术实现思路
解决的技术问题：本专利技术提供一种人源抗唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-9的 抗体IgG及其应用。 阳007] 技术方案：人源抗唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-9的抗体IgG，所述抗体的\ 链的互补决定区具有W下的CDRs氨基酸序列： 沈QIDNO. 10 所示的Vl-CDR1 ; 沈QIDNO. 11 所示的Vl-CDR2 ; SEQIDNO. 12 所示的Vl_CDR3 ; 并且所述抗体的Vh链的互补决定区具有W下的CDRs氨基酸序列： 沈QIDNO. 3 所示的Vh-CDR1 ; 沈QIDNO. 4 所示的Vh-CDR2 ; 沈QIDNO. 5 所示的Vh-CDR3。 人源抗唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-9的抗体IgG，重链可变区的氨基酸序列 如SEQIDNO. 2所示；轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO. 9所示。W及上述序列经一 个或多个氨基酸添加、删除、替换、修饰的保守性突变而获得的保守性变异体。 人源抗唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-9的抗体IgG，重链恒定区的氨基酸序列 如SEQIDNO. 7所示；轻链恒定区的氨基酸序列如SEQIDNO. 14所示。W及上述序列经一 个或多个氨基酸添加、删除、替换、修饰的保守性突变而获得的保守性变异体。 编码人源抗唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-9的抗体IgG的核巧酸序列，编码重 链可变区的核酸序列为SEQIDNO. 1所示，编码轻链可变区的核酸序列为SEQIDNO. 8所 /J、- 〇 编码人源抗唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-9的抗体IgG的核巧酸序列，编码重 链恒定区的核酸序列为SEQIDNO. 6所示，编码轻链恒定区的核酸序列为SEQIDNO. 13所 /J、-〇 上述人源抗唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-9的抗体IgG在制备预防或治疗重 症哮喘、慢性阻塞性肺病、自身免疫性疾病和/或肿瘤药物中的应用。 一种预防或治疗重症哮喘的药物，有效成分为所述的人源抗唾液酸结合免疫球蛋 白样凝集素-9的抗体IgG。 一种预防或治疗慢性阻塞性肺病的药物，有效成分为所述的人源抗唾液酸结合免 疫球蛋白样凝集素-9的抗体IgG。 一种预防或治疗自身免疫性疾病的药物，有效成分为所述的人源抗唾液酸结合免 疫球蛋白样凝集素-9的抗体IgG。 一种预防或治疗肿瘤的药物，有效成分为所述的人源抗唾液酸结合免疫球蛋白样 凝集素-9的抗体IgG。 有益效果：本专利技术提供了一种具有高保护性、高特异性、良好亲和力的抗唾液酸结 合免疫球蛋白样凝集素-9的人源单克隆抗体。对该全分子人源抗体做功能鉴定，结果显示 该人源抗体能够与唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-9特异性结合；体外细胞实验结果证 实，人源抗唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-9抗体能够有效诱导唾液酸结合免疫球蛋白 样凝集素-9阳性细胞的调亡，抑制细胞因子的分泌，因此本专利技术的单克隆抗体可应用于重 症哮喘、慢性阻塞性肺病、自身免疫性疾病、肿瘤等相关疾病的临床治疗及预防。【附图说明】 图1纯化后抗体IgG的SDS-PAGE检测； 阳0%] 图2抗Siglec-9抗体的ELISA检测；图 3 抗Siglec-9 抗体的Westernblot检测； 图4抗Siglec-9抗体与抗原结合的亲和力检测； 阳029] 图5抗Siglec-9抗体诱导的中性粒细胞调亡检测； 图6FACS检测抗Siglec-9抗体诱导的中性粒细胞R0S。【具体实施方式】 需要说明的是，该抗体的重链可变区和轻链可变区均为人源抗体，并将其与人源 抗体的恒定区连接，因此称之为全分子人源抗体。 本专利技术W唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-9为祀分子，在隧菌体抗体库技术的 基础上制备人源抗唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-9抗体IgG。下面结合具体实施例来进 一步描述本专利技术，本专利技术的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但是应理解所述实施例 仅是范例性的，不对本专利技术的保护范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解本文档来自技高网...
【技术保护点】
人源抗唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素‑9的抗体IgG，其特征在于：所述抗体的VL链的互补决定区具有以下的CDRs氨基酸序列：SEQ ID NO.10所示的VL‑CDR1；SEQ ID NO.11所示的VL‑CDR2；SEQ ID NO.12所示的VL‑CDR3；并且所述抗体的VH链的互补决定区具有以下的CDRs氨基酸序列：SEQ ID NO.3所示的VH‑CDR1；SEQ ID NO.4所示的VH‑CDR2；SEQ ID NO.5所示的VH‑CDR3。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：周林福，朱进，陈子，王怡雯，
申请(专利权)人：朱进，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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