群体感应信号肽AIP及其应用制造技术

本发明专利技术公开了群体感应信号肽AIP及其应用。本发明专利技术首先保护多肽甲，如序列表的序列8所示。本发明专利技术还保护多肽乙，为含有序列表的序列8所示氨基酸的多肽。本发明专利技术还保护一种酸奶制品的制备方法，包括如下步骤：将乳杆菌ljj-6接种至液态奶，然后进行发酵，然后加入多肽甲或多肽乙，得到酸奶制品。本发明专利技术对于群体感应现象的研究具有理论价值，对于酸奶制备具有重大的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及群体感应信号肽AIP及其应用。
技术介绍
群体感应(QuorumSensing，QS)是指某些微生物群体其基因的表达受到与群体密度相关的信号分子调控的现象。QS系统参与调控一系列生物学功能，如：菌体发光、抗生素的生物合成、毒性因子的产生、胞外多糖的合成、细菌丛集、生物膜形成、质粒接合转移等。QS系统被认为参与调控细菌的多项生理功能，该系统包括自诱导肽(autoinducingpeptide，AIP)、组氨酸蛋白激酶和感应调节蛋白，又称为三组分系统。AIP作为信号分子，用于指示细胞密度，当AIP达到某一临界的浓度阈值时，便可激活一系列特定基因的表达。目前已经在多种细菌上观测到了群体感应现象的存在，比如金黄色葡萄球菌、变异链球菌等。自然界的有些细菌具有群体感应系统，可以通过监测周围环境中群体感应信号分子浓度，来感知自身和周围环境中其他菌群的数量变化，当信号分子浓度达到一定阈值时就启动菌体相关基因表达，调控菌浓度以及相关生物学功能。酸奶是含活菌的乳制品，正常发酵结束后，在产品贮存、运输、销售、食用前这一过程中，菌体仍要生长繁殖，发生后酸化现象(postacidification)，即酸奶的pH值继续下降，以至出现消费者不可接受的过酸味及感官质量下降。酸奶后酸化现象导致的结果是酸奶无法长期贮存，酸奶贮存期短的缺陷困扰着酸奶的消费。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供群体感应信号肽AIP及其应用。本专利技术首先保护多肽甲，如序列表的序列8所示。本专利技术还保护多肽乙，含有序列表的序列8所示的氨基酸。所述多肽乙具体如序列表的序列7所示。序列表的序列7所示的多肽乙为序列表的序列8所示的多肽甲的前体肽。本专利技术还保护所述多肽甲或所述多肽乙在制备食品中的应用。所述食品具体可为酸奶。本专利技术还保护乳杆菌ljj-6与特异多肽在制备食品中的应用。所述食品具体可为酸奶；所述特异多肽为所述多肽甲或所述多肽乙。本专利技术还保护一种酸奶制品的制备方法，包括如下步骤：将乳杆菌ljj-6接种至液态奶，然后进行发酵，然后加入特异多肽，得到酸奶制品；所述特异多肽为所述多肽甲或所述多肽乙。所述方法中，所述乳杆菌ljj-6在所述液态奶中的初始密度为104cfu/ml。所述方法中，所述特异多肽在发酵体系中的初始浓度为0.016μM以上，优选0.016μM-2μM。所述发酵的条件具体可为：37℃静置培养12小时。所述液态奶为牛奶和/或羊奶。以上任一所述方法制备得到的酸奶制品也属于本专利技术的保护范围。本专利技术还保护所述多肽甲或所述多肽乙在促使乳杆菌ljj-6发生群体感应现象中的应用。所述群体感应现象体现为调控乳杆菌ljj-6的菌群密度。本专利技术还保护所述多肽甲或所述多肽乙作为菌群体感应信号分子的应用。所述应用中，所述菌群体感应信号分子为乳杆菌ljj-6的菌群体感应信号分子。德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckiisubsp.bulgaricus)ljj-6，已于2015年09月09日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏登记号为CGMCCNO.11346。德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckiisubsp.bulgaricus)ljj-6，简称乳杆菌ljj-6。一方面，在MRS液体培养基中进行相同时间的培养，12小时时，乳杆菌ljj-6的菌密度与现有的保加利亚乳杆菌类似，24小时后乳杆菌ljj-6的菌密度显著低于现有的保加利亚乳杆菌。另一方面，进行相同时间的培养，加入乳杆菌ljj-6得到的酸奶的酸度值与加入现有保加利亚乳杆菌得到的酸奶的酸度值没有显著差异，但将酸奶进行货架期保存后，加入乳杆菌ljj-6得到的酸奶的酸度值显著低于加入现有保加利亚乳杆菌得到的酸奶的酸度值。结果表明，乳杆菌ljj-6可以解决酸奶后酸化现象，为具有群体感性现象的保加利亚乳杆菌菌株。本专利技术对于群体感应现象的研究具有理论价值。本专利技术可用于改善酸奶产业中的后酸化现象，对于酸奶产业具有重大应用价值。附图说明图1为实施例1中的酸度值结果。图2为实施例2中的序列比对结果。图3为实施例2中的遗传进化树。图4为实施例2中采用简并引物对进行PCR扩增的电泳图。图5为实施例2中采用特异引物对进行PCR扩增的电泳图。图6为实施例3中的菌液OD600nm值结果。图7为实施例4中的菌液OD600nm值结果。具体实施方式以下的实施例便于更好地理解本专利技术，但并不限定本专利技术。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。MRS液体培养基的制备方法如下：取酪蛋白胨10.0克、牛肉浸取物10.0克、酵母提取液5.0克、葡萄糖5.0克、乙酸钠5.0克、柠檬酸二胺2.0克、吐温801.0克、磷酸氢二钾2.0克、七水硫酸镁0.2克、七水硫酸锰0.05克和碳酸钙20.0克，用蒸馏水溶解并定容至1.0升，调pH至6.8。保加利亚乳杆菌LJJ：崔文明等，“保加利亚乳杆菌LJJ自溶的影响因素分析”，食品与发酵工业，2013年第39卷第7期(总第307期)，6-12。细菌基因组DNA提取试剂盒(TIANGENBacteriaDNAkit)：天根生化科技(北京)有限公司，产品目录号DP302-02。实施例1、乳杆菌ljj-6的鉴定、保藏和应用一、乳杆菌ljj-6的鉴定和保藏2012年08月，从内蒙牧区传统发酵乳制品中分离得到一株菌，将其命名为ljj-6。ljj-6的形态特征：革兰氏阳性杆菌，菌体粗而长，菌体长2μm～9μm、宽0.15μm～0.18μm,单个体呈长杆状或成链，菌体两端稍圆，通常呈单个，平行或短链排列。ljj-6的生理生化特征：兼性厌氧菌，最适培养温度为3℃，最适宜生长的pH为6.5-7.0，最适宜的培养基为MRS培养基；能够发酵牛奶中的乳糖生成乳酸，同时产生特殊的香气。ljj-6的16sRNA的编码序列(见序列表的序列9)与GenBank中的德氏乳杆菌保加利亚亚种ATCC11842的16sRNA的编码序列同源性为98％。本专利技术提供的德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckiisubsp.b本文档来自技高网...

【技术保护点】
多肽甲，如序列表的序列8所示。

【技术特征摘要】
1.多肽甲，如序列表的序列8所示。
2.多肽乙，为含有序列表的序列8所示氨基酸的多肽。
3.权利要求1所述多肽甲或权利要求2所述多肽乙在制备食品中的应用。
4.特异多肽和特异菌株在制备食品中的应用；所述特异多肽为权利要求1所述多
肽甲或权利要求2所述多肽乙；所述特异菌株为德氏乳杆菌保加利亚亚种
(Lactobacillusdelbrueckiisubsp.bulgaricus)ljj-6，其保藏编号为CGMCC
NO.11346。
5.一种酸奶制品的制备方法，包括如下步骤：将特异菌株接种至液态奶，然后进
行发酵，然后加入特异多肽，得到酸奶制品；所述特异菌株为德氏乳杆菌保加利亚亚
种(Lactobacillusdelbrueckiisubsp.bulgaricus)ljj-6，其保藏编号为CGMCC
NO.11346；所述特...

【专利技术属性】
技术研发人员：逄晓阳，吕加平，刘鹭，芦晶，张书文，杨洋，张维清，马长路，贾震虎，赵璞，
申请(专利权)人：中国农业科学院农产品加工研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11