一种从黑果枸杞中制备矮牵牛素的方法技术

本发明专利技术公开了一种从黑果枸杞中制备矮牵牛素的方法，得到矮牵牛素含量高于70%的黑果枸杞萃取物，属于植物的有效成分提取分离技术领域。其特征在于，包括以下步骤：（1）将干燥后的黑果枸杞粉碎，用丙酮减压加热回流提取至少两次，然后浓缩得浸膏；（2）将浓缩浸膏用酸水解或者酶水解，水解完毕后，倾倒上清液，收集沉淀；（3）将沉淀用乙酸乙酯萃取；（4）将乙酸乙酯萃取液浓缩得到的浸膏，置于超临界萃取仪的萃取釜中使用超临界CO2作为溶剂，用无水乙醇作为夹带剂，得到矮牵牛素高纯度萃取物。本发明专利技术提取所得率高，工艺简单，适合工业化应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物的有效成分的分离提取
，具体涉及。
技术介绍
黑果枸t己(Lycium ruthenicum Murr.)系前科枸紀属植物，是西北干旱地区一种特有的多年生灌木野生植物。其耐干旱，生长于盐碱土荒地、沙地或路旁，可作为水土保持的灌木植物。其果实味甘、性平、清心热，据《四部医典》中记载，藏医将其用于治疗心热病、心脏病、月经不调、停经等病症；民间用作滋补强壮、明目及降压药。现代药理学研究表明黑果枸杞中的多糖具有抗疲劳、降血糖等药理活性；黄酮类化合物具有抗氧化及其他营养保健作用等；原花青素具有抗氧化、抑制肿瘤等功能；花色苷具有抗氧化、抗突变、抑制流感病毒和疱疹病毒等活性。黑果枸杞色素中主要为酰基化的锦葵色素-3，5_ 二葡萄糖苷。经紫外分光光度法、质谱和文献报道综合分析鉴定出黑果枸杞中含有8种花色苷，分别是:飞燕草素-3-0-葡萄糖苷、芍药素-3-0-葡萄糖苷、矮牵牛素-5-0-葡萄糖苷、矮牵牛素-3-0-(6-0-对香豆酰)芸香糖苷-5-0-葡萄糖苷、锦葵色素-3-0-( 6-0-对香豆酰-3-0-乙酰)-5-0-二葡萄糖苷、飞燕草素-3-0-( 6-0-乙酰)葡萄糖苷、锦葵色素-3-0-( 6-0-对香豆酰)葡萄糖苷和锦葵色素_3，5- 二葡萄糖苷，其含量依次为0.86%、1.17%、2.38%、11.79%、68.35%、0.63%、5.24%、9.58%。花色苷是黑果枸杞中重要的组成成分。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供，为黑果枸杞矮牵牛素的进一步深化应用，提供了一条有效制备途径。为了实现上述目的，本专利技术的技术解决方案为，其中包括以下步骤: (1)将干燥后的黑枸杞粉碎60?80目粉末，用丙酮减压加热回流提取至少两次，然后浓缩得浸膏；每次提取时间至少90min，所述的丙酮用量至少是原料的4?8倍，提取时，真空度0.7?0.1MPa,温度50?80°C。浓缩条件:真空度范围0.7?0.1MPa,温度不高于75 °C，浓缩至比重为1.0 ; (2)将浓缩浸膏用酸水解或者酶水解，水解完毕后，倾倒上清液，收集沉淀膏；酸法水解工艺条件为:盐酸浓度1-5 mol/L，水解温度70-95°C，水解时间120-240 min ； 酶法水解工艺条件为:pH 5.5-6.5，酶解温度35-55°C，酶解时间90 min，加酶量为浓缩浸膏重量的1_3%，酶为具有水解糖苷键功能的纤维素酶； (3)将沉淀用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯和沉淀的体积比为1.5-3: 1，萃取1-4次； (4)将乙酸乙酯萃取液浓缩得到的浸膏，置于超临界萃取仪的萃取釜中使用超临界CO2作为溶剂，用无水乙醇作为夹带剂，得到矮牵牛素高纯度萃取物。萃取压力控制在30?60MPa，温度控制在30?50°C，COf流量控制在10?20L/h，萃取时间控制在80?lOOmin。本专利技术方法的工艺路线合理，产品收率高，提供了一条可行的能产生经济效益的途径。【具体实施方式】下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术，但这些实施例仅限于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的保护范围。实施例1 本专利技术含实施例，其制备步骤为: (1)取干燥的黑枸杞原料200g，破碎至60目后投入提取罐中；加入丙酮800ml，减压，加热至75°C，回流提取两次，每次60min，合并两次提取液浓缩得浸膏； (2)将浓缩浸膏用酸水解，水解完毕后，倾倒上清液，收集沉淀；酸法水解工艺条件为:盐酸浓度2 mol/L，水解温度85°C，水解时间180 min ； (3)将沉淀用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯和浓缩液的体积比为2.5: 1，萃取2次； (4)将乙酸乙酯萃取液浓缩得到的浸膏，置于超临界萃取仪的萃取釜中使用超临界CO2作为溶剂，用无水乙醇作为夹带剂，得到矮牵牛素高纯度萃取物。萃取压力控制在35MPa，温度控制在40°C，C(V流量控制在10L/h，萃取时间控制在lOOmin。真空干燥，得到矮牵牛素提取物25.72mgo经检测，Waters高效液相色谱仪，色谱柱C18(4.6mmX 250mm，5um)，流动相为0.2%甲酸溶液:乙腈=98:2 ;检测波长为525nm。矮牵牛素含量为72.2%。实施例2 本专利技术含实施例，其制备步骤为: (1)取干燥的黑枸杞原料200g，破碎至60目后投入提取罐中；加入丙酮800ml，减压，加热至75°C，回流提取两次，每次60min，合并两次提取液浓缩得浸膏； (2)将浓缩浸膏用酶水解，水解完毕后，倾倒上清液，收集沉淀；酶法水解工艺条件为:pH 6，酶解温度50°C，酶解时间90 min，加酶量为浓缩浸膏重量的3%，酶为具有水解糖苷键功能的纤维素酶，选用宁夏夏盛实业集团有限公司生产的纤维素酶。(3)将沉淀用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯和沉淀膏的体积比为2.5: 1，萃取2次； (4)将乙酸乙酯萃取液浓缩得到的浸膏，置于超临界萃取仪的萃取釜中使用超临界CO2作为溶剂，用无水乙醇作为夹带剂，得到矮牵牛素高纯度萃取物。萃取压力控制在35MPa，温度控制在40°C，C(V流量控制在10L/h，萃取时间控制在lOOmin。真空干燥，得到矮牵牛素21.32mg0经检测，矮牵牛素含量为73.6%。以上所述实施例仅仅是对本专利技术的优选实施方式进行描述，并非对本专利技术的范围进行限定，在不脱离本专利技术设计精神的前提下，本领域普通工程技术人员对本专利技术的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本专利技术的权利要求书确定的保护范围内。【主权项】1.，其特征在于，包括以下步骤: (1)将干燥后的黑果枸杞粉碎，用丙酮减压加热回流提取至少两次，然后浓缩得浸膏； (2)将浓缩浸膏用酸水解或者酶水解，水解完毕后，倾倒上清液，收集沉淀； (3)将沉淀用乙酸乙酯萃取； (4)将乙酸乙酯萃取液浓缩得到的浸膏，置于超临界萃取仪的萃取釜中使用超临界CO2作为溶剂，用无水乙醇作为夹带剂，得到矮牵牛素高纯度萃取物。2.如权利要求1所述的，其特征在于，所述步骤(I)中将黑果枸杞粉碎为60?80目粉末。3.如权利要求1所述的，其特征在于，所述步骤(I)中每次提取时间至少90min，所述的丙酮用量至少是原料的4?8倍，提取时，真空度0.7 ?0.1MPa,温度 50 ?80Γ。4.如权利要求1所述的，其特征在于，所述步骤(I)中的浓缩条件:真空度范围0.7?0.1MPa，温度不高于75°C，浓缩至比重为1.0。5.如权利要求1所述的，其特征在于，所述步骤(2)酸法水解工艺条件为:盐酸浓度1-5 mol/L，水解温度70_95°C，水解时间120-240min ； 酶法水解工艺条件为:pH 5.5-6.5，酶解温度35-55°C，酶解时间90 min，加酶量为浓缩浸膏重量的1_3%，酶为具有水解糖苷键功能的纤维素酶。6.如权利要求1所述的，其特征在于，所述步骤(3)用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯和沉淀的体积比为1.5-3: 1，萃取1-4次。7.如权利要求1所述的，其特征在于，所述步骤(4)超临界萃取，萃取压力控制在30?60MPa，温度控制在30?50°C，COf流量控制在10?20L/h，萃取时间控制在80?lOOmin。【专利摘要】本专利技术公开了，得到矮牵牛素含量高于70%的黑果枸杞萃本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从黑果枸杞中制备矮牵牛素的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将干燥后的黑果枸杞粉碎，用丙酮减压加热回流提取至少两次，然后浓缩得浸膏；（2）将浓缩浸膏用酸水解或者酶水解，水解完毕后，倾倒上清液，收集沉淀；（3）将沉淀用乙酸乙酯萃取；（4）将乙酸乙酯萃取液浓缩得到的浸膏，置于超临界萃取仪的萃取釜中使用超临界CO2作为溶剂，用无水乙醇作为夹带剂，得到矮牵牛素高纯度萃取物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈宝华，
申请(专利权)人：青海泰柏特生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：青海;63