G1/G0期阻滞的五环吲哚喹嗪、其合成、抗肿瘤活性和应用制造技术

本发明专利技术公开了G1/G0期阻滞的五环吲哚喹嗪，即(6S)-3-乙酰基-6-(N-苯乙酰氨基酰基)-氧化甲基-4，6，7，12-四氢-4-氧化吲哚[2，3-a]喹嗪，公开了它们的合成，公开了它们的抗细胞增殖活性，进一步公开了抗肿瘤活性及应用。

【技术实现步骤摘要】
G1/G0期阻滞的五环吲哚喹嗪、其合成、抗肿瘤活性和应用专利
本专利技术涉及G1/G0期阻滞的五环吲哚喹嗪，即(6S)-3-乙酰基-6-(N-苯乙酰氨基酰基)-氧化甲基-4，6，7，12-四氢-4-氧化吲哚[2，3-a]喹嗪，涉及它们的合成，涉及它们的抗细胞增殖活性，进一步涉及它们在小鼠移植性肿瘤模型上的抗肿瘤活性。因而本专利技术涉及(6S)-3-乙酰基-6-(N-苯乙酰氨基酰基)氧化甲基-4，6，7，12-四氢-4-氧化吲哚[2，3-a]喹嗪作为G1/G0期阻滞剂的临床应用前景。本专利技术属于生物医药领域。
技术介绍
细胞通过增殖产生新细胞代替因为衰老，死亡和创伤所损失的细胞，为机体生长发育和延续种族提供基础。细胞增殖的过程称为细胞周期。或细胞周期是指细胞从一次分裂结束开始生长，到下一次分裂结束所经历的过程。细胞增殖周期分为间期和分裂期两个时期。细胞分裂以后进入间期，完成结构和生物合成的复杂变化。间期又分为DNA合成前期(G1期)，DNA合成期(S期)和DNA合成后期(G2期)三个分期。G1期细胞可分为永远停留在G1期直至死亡、暂时不增殖和继续增殖三种类型。暂时不增殖的细胞又称Go期细胞。S初期细胞内迅速形成DNA聚合酶及四种脱氧核苷酸。S期末细胞核DNA复制为细胞分裂作准备。S期大约持续7～8小时。G2期细胞合成RNA和蛋白质例如组蛋白、微管蛋白和膜蛋白等，为纺锤体和新细胞膜等备足原料，以便进入有丝分裂期。G2期大约持续1～1.5小时。有丝分裂又称M期。M期是前期、中期、后期和末期构成的连续过程，完成由一个母细胞分裂成为两个子细胞的任务。一般需1～2小时。肿瘤细胞属于持续增殖的G1期细胞，细胞周期是抗肿瘤药物的重要靶点。作用于肿瘤细胞细胞的化疗药物又称细胞周期特异性药物。虽然有些临床应用的化疗药物，例如5-氟脲嘧啶，呋喃氟尿嘧啶，阿霉素，自力霉素和阿糖胞苷，影响细胞周期，但缺乏特异性。由是，肿瘤细胞周期抑制剂成为抗肿瘤药物研究的重要领域。尤其是专利技术能够让肿瘤细胞永远停留在G1期的化疗药物，即G1/G0期阻滞剂，是抗肿瘤药物设计的重要方向。不过，至今没有G1/G0期阻滞剂的成功案例。按照这些理解，专利技术人提出了五环吲哚喹嗪，即(6S)-3-乙酰基-6-(N-苯乙酰氨基酰基)-氧化甲基-4，6，7，12-四氢-4-氧化吲哚[2，3-a]喹嗪，作为G1/G0期阻滞的专利技术。
技术实现思路
本专利技术的下式代表的化合物7a-i，7a中AA为L-丙氨酰基，7b中AA为L-缬氨酰基，7c中AA为L-苯丙氨酰基，7d中AA为甘氨酰基，7e中AA为L-脯氨酰基，7f中AA为L-异亮氨酰基，7g中AA为L-亮氨酰基，7h中AA为L-蛋氨酰基，7i中AA为L-色氨酰基。本专利技术的第二个内容是按照图1的路线制备(6S)-3-乙酰基-6-(N-苯乙酰氨基酰基)氧化甲基-4，6，7，12-四氢-4-氧化吲哚[2，3-a]喹嗪(7a-i)，包括：1)制备1-(2，2-二甲氧乙基)-3-羟甲基-1，2，3，4-四氢咔啉(3)；2)制备(6S)-3-乙酰基-6-羟甲基-4，6，7，12-四氢-4-氧化吲哚[2，3-a]喹嗪(6)；3)制备(6S)-3-乙酰基-6-(N-苯乙酰氨基酰基)氧化甲基-4，6，7，12-四氢-4-氧化吲哚[2，3-a]喹嗪(7a-i)。7a中AA为L-丙氨酰基，7b中AA为L-缬氨酰基，7c中AA为L-苯丙氨酰基，7d中AA为甘氨酰基，7e中AA为L-脯氨酰基，7f中AA为L-异亮氨酰基，7g中AA为L-亮氨酰基，7h中AA为L-蛋氨酰基，7i中AA为L-色氨酰基。本专利技术的第三个内容是评价(6S)-3-乙酰基-6-(N-苯乙酰氨基酰基)氧化甲基-4，6，7，12-四氢-4-氧化吲哚[2，3-a]喹嗪(7a-i)的抗细胞增殖活性。本专利技术的第四个内容是评价(6S)-3-乙酰基-6-(N-苯乙酰氨基酰基)氧化甲基-4，6，7，12-四氢-4-氧化吲哚[2，3-a]喹嗪(7a-i)的抗肿瘤活性。本专利技术的第五个内容是以其中一个化合物为代表，考察对细胞周期的影响。附图说明图1.(6S)-3-乙酰基-6-(N-苯乙酰氨基酰基)氧化甲基-4，6，7，12-四氢-4-氧化吲哚[2，3-a]喹嗪(7a-i)的合成路线.(i)二氯亚砜/甲醇；(ii)1，1，3，3-四甲氧基丙烷，三氟乙酸/甲醇；(iii)LiAlH4，THF；(iv)双乙烯酮，三乙胺/丙酮；(v)2NHCl/丙酮；(vi)K2CO3/甲醇；(vii)N-苯乙酰氨基酸，DCC/HOBt，NMM，THF。7a中AA为L-丙氨酰基，7b中AA为L-缬氨酰基，7c中AA为L-苯丙氨酰基，7d中AA为甘氨酰基，7e中AA为L-脯氨酰基，7f中AA为L-异亮氨酰基，7g中AA为L-亮氨酰基，7h中AA为L-蛋氨酰基，7i中AA为L-色氨酰基。具体实施方式为了进一步阐述本专利技术，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本专利技术进行具体描述，不应当理解为对本专利技术的限制。实施例1制备L-色氨酸甲酯盐酸盐(1)50ml无水甲醇在冰浴下滴加3.75ml(50mmol)氯化亚砜，30min内滴加完毕后，分批加入9.20g(42mmol)L-色氨酸，室温搅拌24h，TLC(CHCl3∶MeOH＝2∶3)监测至原料消失终止反应。水泵抽走未反应完的氯化亚砜SOCl2和HCl，用乙醚反复研磨得白色固体，甲醇-乙醚重结晶，得L-色氨酸甲酯盐酸盐为无色固体。收率在85-99％之间。ESI-MS(m/e)219[M+H]+，熔点、旋光等物理常数与已报道的数据一致。实施例2制备1-(2，2-二甲氧乙基)-2，3，4，9-四氢-β-咔啉羧酸甲酯(2)在250ml的圆底烧瓶中加入L-色氨酸甲酯盐酸盐20g(78.6mmol)，100ml甲醇，加入三氟乙酸20ml，活化半小时，再加入1，1，3，3-四甲氧基丙烷16ml(97.6mmol)，搅拌下升温到80℃，保温反应10小时，TLC监测原料斑点消失，将反应液降温至室温，滴加饱和NaHCO3水溶液调节pH至中性，减压回收甲醇，残余物中加入100ml二氯甲烷，分液后水层用二氯甲烷萃取(50ml×3)，合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩至干，残余物用硅胶柱层析(石油醚∶丙酮＝2∶1)纯化得14.2g(57％)化合物2，为黄色油状物。ESI-MS(m/e)319[M+H]+。实施例3制备1-(2，2-二甲氧乙基)-3-羟甲基-1，2，3，4-四氢咔啉(3)在250ml的圆底烧瓶中加入50ml无水四氢呋喃，搅拌下分批加入LiAlH40.9g(23.6mmol)，活化半小时。将5g(15.7mmol)化合物(2)溶于50ml无水四氢呋喃中，再将其缓慢滴入反应瓶中，升温到40℃，保温反应3小时，TLC监测原料斑点消失。将反应液降温至室温，加入0.5ml15％的NaOH水溶液，卒灭反应，用布什漏斗过滤除去铝盐，滤液减压浓缩至干，加入乙酸乙酯，乙醚磨洗得到目2.52g(54％)合物3，为无色粉末。ESI-MS(m/e)291[M+H]+。实施例4制备1-(2，2-二甲氧乙基)-2-(1，3-二羰基丁基)-3-(1，3-二羰基丁基)氧化甲基-1，2，3，4-四本文档来自技高网...

【技术保护点】
下式代表的化合物7a‑i，7a中AA为L‑丙氨酰基，7b中AA为L‑缬氨酰基，7c中AA为L‑苯丙氨酰基，7d中AA为甘氨酰基，7e中AA为L‑脯氨酰基，7f中AA为L‑异亮氨酰基，7g中AA为L‑亮氨酰基，7h中AA为L‑蛋氨酰基，7i中AA为L‑色氨酰基。

【技术特征摘要】
1.下式代表的化合物7a-i，7a中AA为L-丙氨酰基，7b中AA为L-缬氨酰基，7c中AA为L-苯丙氨酰基，7d中AA为甘氨酰基，7e中AA为L-脯氨酰基，7f中AA为L-异亮氨酰基，7g中AA为L-亮氨酰基，7h中AA为L-蛋氨酰基，7i中AA为L-色氨酰基。2.制备权利要求1的化合物7a-i的方法，该方法包括用五个关键步骤制备四个关键中间体：1)制备1-(2，2-二甲氧乙基)-3-羟甲基-1，2，3，4-四氢咔啉(3)；2)制备1-(2，2-二甲氧乙基)-2-(1，3-二羰基丁基)-3-(1...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭师奇，赵明，李春钰，
申请(专利权)人：首都医科大学，
类型：发明
国别省市：北京;11