公开了从益生菌菌株凝结芽孢杆菌SBC-37(以菌株号MTCC 5856保藏于微生物菌种保藏与基因库(Microbial Type Culture Collection and Gene Bank))中产生部分纯化的细胞外代谢物制剂的方法，所述菌株表现出与已知细菌菌株凝结芽孢杆菌ATCC 31284、凝结芽孢杆菌NBRC 3887和凝结芽孢杆菌ATCC 7050具有99％遗传同源性。还公开了所述细胞外代谢物制剂针对一组微生物病原的抗菌谱，包括当与协同防腐剂共混物组合时的制剂的协同抗菌作用，所述协同防腐剂共混物包括约61％w/w的百里酚，约38％的甘油一月桂酸酯和获自木兰的超临界流浸膏的约1％w/w的木兰醇。单独的细胞外代谢物制剂或所述细胞外代谢物制剂和防腐剂共混物的组合也以协同的方式抑制了微生物生物膜形成。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】从凝结芽抱杆菌中产生部分纯化的细胞外代谢产物的方法 及其生物应用 相关专利申请的交叉引用 本专利申请是于2013年12月24日提交的标题为"METHODOFPR孤UCING PARTIALLYPURIFI邸EXTRACELLULARMETABOLITEPRODUCTSFROMBACILLUSC0AGULANS ANDBIOLOGICALAP化ICATIONST肥REOF."的临时专利申请US61920567的非临时申请。 [000引专利技术背景 专利
本专利技术一般设及益生菌制剂的抗菌效应。更具体地，本专利技术设及（1)用于从益 生菌菌株凝结芽抱杆菌SBC-37-0U保藏于微生物菌种保藏与基因库（MicrobialType QiltureCollectionandGeneBank),并分配菌株号MTCC5856)中产生部分纯化的细胞 外代谢物制剂的方法，所述菌株表现出与已知细菌菌株凝结芽抱杆菌ATCC31284、凝结芽 抱杆菌NBRC3887和凝结芽抱杆菌ATCC7050具有99%遗传同源性，和（2)所述细胞外代 谢物制剂针对一组微生物病原的抗菌谱，包括当与协同防腐剂共混物组合时的制剂的协同 抗菌作用，所述协同防腐剂共混物包括约61 %w/w的百里酪，约38%的甘油一月桂酸醋和 获自木兰（Magnoliaofficinalis)的超临界流浸膏的约l%w/w的木兰醇。单独的细胞外 代谢物制剂或所述细胞外代谢物制剂和防腐剂共混物的组合也显示W协同的方式抑制了 微生物生物膜形成。 现有技术的描述 本领域已知，凝结芽抱杆菌的细胞外产物包括培养物凝结芽抱杆菌菌株的上清 液或滤液，其适用于哺乳动物的皮肤或粘膜的局部应用，且从而能够用于抑制细菌、酵母、 真菌、病毒及其组合的生长扣S6905692,"Topicalcompositionscontainingprobiotic B曰cillusb曰cteri曰，spores,曰ndextr曰cellul曰rproducts曰ndusesthereof")。本专利技术 关于进一步纯化益生菌凝结芽抱杆菌SBC37-01 (保藏于微生物菌种保藏与基因库，并分配 菌株号MTCC5856)的培养物的细胞外组分W获得浓缩的细胞外代谢物制剂，所述浓缩的 细胞外代谢物制剂当与其自身单独的上清液相比较时、和当与协同的协同防腐剂共混物相 组合时表现出增强的抗菌作用，所述协同防腐剂共混物包括约61%w/w的百里酪，约38% 的甘油一月桂酸醋和获自木兰的超临界流浸膏的约1%w/w的木兰醇。 本专利技术的主要目的是公开 1)从益生菌菌株凝结芽抱杆菌SBC37-01 (保藏于微生物菌种保藏与基因库，菌株 号MTCC5856)中产生部分纯化的细胞外代谢物制剂的方法，所述菌株表现出与已知细菌 菌株凝结芽抱杆菌ATCC31284、凝结芽抱杆菌NBRC3887和凝结芽抱杆菌ATCC7050具有 99 %遗传同源性。 2)所述细胞外代谢物制剂针对一组微生物病原的抗菌谱，包括当与协同防腐剂共 混物组合时的制剂的协同抗菌作用，所述协同防腐剂共混物包括约61%w/w的百里酪，约 38%的甘油一月桂酸醋和获自木兰的超临界流浸膏的约1%w/w的木兰醇。 3)单独的或与协同防腐剂共混物组合的所述细胞外代谢物制剂的微生物生物膜 抑制潜能，所述协同防腐剂共混物包括约61%w/w的百里酪，约38%的甘油一月桂酸醋和 获自木兰的超临界流浸膏的约1%w/w的木兰醇。 本专利技术满足了前述的目的并提供了另外的相关优点。[001引专利技术概述[001引本专利技术描述了 (1)用于从益生菌菌株凝结芽抱杆菌SBC37-01 (保藏于微生物菌种保藏与基因 库，并分配菌株号MTCC5856)中产生部分纯化的细胞外代谢物制剂的方法，所述菌株表现 出与已知细菌菌株凝结芽抱杆菌ATCC31284、凝结芽抱杆菌NBRC3887和凝结芽抱杆菌 ATCC7050具有99 %遗传同源性； (2)所述细胞外代谢物制剂针对一组微生物病原的抗菌谱，包括当与协同防腐剂 共混物组合时的制剂的协同抗菌作用，所述协同防腐剂共混物包括约61%w/w的百里酪， 约38%的甘油一月桂酸醋和获自木兰的超临界流浸膏的约1%w/w的木兰醇和 (3)单独的或与协同防腐剂共混物组合的所述细胞外代谢物制剂的微生物生物膜 抑制潜能，所述协同防腐剂共混物包括约61%w/w的百里酪，约38%的甘油一月桂酸醋和 获自木兰的超临界流浸膏的约1%w/w的木兰醇。 (4)单独的或与协同防腐剂共混物组合的所述细胞外代谢物制剂针对水不溶性葡 聚糖中的粘附变形链球菌仅mutans)的抗菌活性和抗生酸作用，所述协同防腐剂共混物 包括约61%w/w的百里酪，约38%的甘油一月桂酸醋和获自木兰的超临界流浸膏的约1% w/w的木兰醇。[001引本专利技术提供了W下优点。 1)公开了用于从益生菌菌株凝结芽抱杆菌SBC37-01 (保藏于微生物菌种保藏与 基因库，并分配菌株号MTCC5856)中产生部分纯化的细胞外代谢物制剂的纯化方法，所述 菌株表现出与已知细菌菌株凝结芽抱杆菌ATCC31284、凝结芽抱杆菌NBRC3887和凝结芽 抱杆菌ATCC7050具有99 %遗传同源性； (2)公开了所述细胞外代谢物制剂针对一组微生物病原的抗菌谱，包括当与协同 防腐剂共混物组合时的制剂的协同抗菌作用，所述协同防腐剂共混物包括约61%w/w的百 里酪，约38%的甘油一月桂酸醋和获自木兰的超临界流浸膏的约1%w/w的木兰醇。 (3)公开了单独的或与协同防腐剂共混物组合的所述细胞外代谢物制剂的微生物 生物膜抑制潜能，所述协同防腐剂共混物包括约61%w/w的百里酪，约38%的甘油一月桂 酸醋和获自木兰的超临界流浸膏的约1 %w/w的木兰醇。 (4)公开了单独的或与协同防腐剂共混物组合的所述细胞外代谢物制剂针对水不 溶性葡聚糖中的粘附变形链球菌仅mutans)的抗菌活性和抗生酸作用，所述协同防腐剂 共混物包括约61%w/w的百里酪，约38%的甘油一月桂酸醋和获自木兰的超临界流浸膏的 约1%w/w的木兰醇。 本专利技术的其他特征和优点将从W下与附图结合的更详细的说明中变得清楚，所述 说明W举例的方式示出了本专利技术的原理。 附图简述图1显示了用于从益生菌菌株凝结芽抱杆菌SBC37-01 (保藏于微生物菌种保藏与 基因库，菌株号MTCC5856)中产生部分纯化的细胞外代谢物制剂的纯化方法的流程图，所 述菌株表现出与已知细菌菌株凝结芽抱杆菌ATCC31284、凝结芽抱杆菌NBRC3887和凝结 芽抱杆菌ATCC7050具有99 %遗传同源性； 图2显示了用于协同抗菌研究的棋盘肉汤微稀释法（checkerboardbroth micro-dilutionmethod)的不意图。图 3A-3B，3C-3D，3E-3F，3G-3H，3I-3J，3K-3L3M-3N，30-3P分别显示了 天然防 腐剂共混物和单独的凝结芽抱杆菌MTCC5856的细胞外代谢物W及二者组合对W下 的生长和生存力的作用：铜绿假单胞菌（PseudomonasaeruginosaMTCC9027,大肠杆 菌巧scherichiacoli)ATCC25922,阿博尼沙 口氏菌（Salmo本文档来自技高网...
【技术保护点】
用于从益生菌菌株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)SBC37‑01(保藏于微生物菌种保藏与基因库(Microbial Type Culture Collection and Gene Bank)，并分配菌株号MTCC 5856)中产生部分纯化的细胞外代谢物制剂的纯化方法，所述菌株表现出与已知细菌菌株凝结芽孢杆菌ATCC 31284、凝结芽孢杆菌NBRC 3887和凝结芽孢杆菌ATCC 7050具有99％遗传同源性，所述纯化方法包括以下步骤：1.将表现出与已知细菌菌株凝结芽孢杆菌ATCC 31284、凝结芽孢杆菌NBRC 3887和凝结芽孢杆菌ATCC 7050具有99％遗传同源性的凝结芽孢杆菌MTCC 5856接种到1.0升的葡萄糖酵母提取物醋酸盐肉汤培养基或含0.5％tween 80的MRS肉汤培养基或玉米浆干粉培养基中；2.在37℃，120rpm下在步骤1的接种过的培养基中进行发酵24‑48h；3.在4000‑7000rpm下离心步骤2的发酵肉汤；4.在50℃下通过利用旋转蒸发器浓缩步骤3的上清液10倍；5.向步骤4的100ml的10倍浓缩上清液中逐滴加入150ml冰冷的丙酮，然后混合；6.将步骤5的混合物在0℃孵育30分钟，然后在7000‑8000rpm下离心；7.弃去步骤6中获得的沉淀物并收集60％丙酮饱和的上清液(～200ml)；8.通过旋转蒸发器浓缩步骤7中的丙酮饱和的上清液至50ml；9.利用4N HCl调节pH至5.0，过滤(0.22微米；Millex,Millipore,India)并在进一步使用之前贮存在‑20℃；10.冷冻干燥/喷雾干燥/托盘干燥步骤8的上清液。...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：穆罕迈德玛杰德，K纳加布沙纳姆，S阿鲁玛盖姆，F阿利，
申请(专利权)人：穆罕迈德玛杰德，
类型：发明
国别省市：美国;US
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。