利用双油体蛋白融合技术表达胶原蛋白制造技术

本发明专利技术公开了含双油体蛋白与胶原短肽融合蛋白的油体，利用重组DNA技术将拟南芥双油体蛋白与重组胶原短肽融合，构建了融合基因表达质粒表达载体pKO-OL-OL-Col，转化至油料作物中，表达了融合蛋白，获得含双油体蛋白与胶原短肽融合蛋白的油体，操作简单、成本低廉、表达量高，含有双油体蛋白与重组胶原短肽融合蛋白的油体，具有较高的胶原蛋白的活性，能直接应用于化妆品的生产，降低了生产成本，省略了胶原蛋白提纯及与乳化剂（或保护剂）混合过程，双油体和融合蛋白一体更好地保护重组胶原蛋白短肽。

【技术实现步骤摘要】
利用双油体蛋白融合技术表达胶原蛋白
本专利技术属于分子生物学领域，具体涉及大豆双油体蛋白与胶原蛋白短肽融合蛋白及含该融合蛋白的油体。
技术介绍
胶原蛋白，其英文学名为Collagen,是一种生物性高分子物质,是很多无脊椎动物和脊椎动物体内含量最为丰富的蛋白质,约占体内蛋白质总量的20%-30%是细胞外基质(ECM)的一种蛋白质,拥有一个或几个由α链组成的三螺旋结构区域,即胶原域。经过数十年来的研究和发展,已发现并确认了27种类型的胶原蛋白，其中约占90%的I型胶原蛋白含量最高。胶原蛋白分子是一个长3000A,直径为15A的杆状物,是已知的最长蛋白质之一，胶原蛋白最普遍的结构特征是三螺旋结构，由3条左手螺旋链相互弯绕拧成一股紧密的右手复合螺旋结构，使其分子结构非常稳定。胶原蛋白分子是由3条大小相似的多肤链组成,3条多肤链都有螺旋构象。3条螺旋互相缠绕,形成一个超螺旋。在这个超螺旋中,每个残基上升2.9A,每一圆周有3.3个残基。这三股多肤互相以氢键形式结合起来，胶原蛋白特有的三股超螺旋结构使得胶原蛋白性质十分稳定，普通的加工温度及短时的加热处理均不能使胶原蛋白分解。胶原蛋白的胶原域有一本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种表达载体pKO‑O‑O‑Col，它是由下述方法制备的：1）以p1390为基本骨架，将其T‑DNA区进行改造，获得p1390‑35S‑Bar‑NOS基本质粒，筒称：Po；2）用pstI和EcoRI分别酶切并连接pO质粒和序列表1所示基因SEQ ID NO.1，得中间载体pO1；3）用EcoRI和NcoI分别酶切并连接PO1和序列表SEQ ID NO.2基因，得到中间载体pO2；此时pO2载体中包含大豆种子启动子，nos终止子，p1301‑35S‑Bar‑Nos；4）用HindⅢ和kpnI分别酶切并连接中间载体pO2和序列表SEQ ID NO.3所示基因，得植物特异表达载体pKO‑O；5）用N...

【技术特征摘要】
1.一种表达载体pKO-O-O-Col，它是由下述方法制备的：1）以p1390为基本骨架，将其T-DNA区进行改造，获得p1390-35S-Bar-NOS基本质粒，筒称：pO；2）用pstI和EcoRI分别酶切并连接pO质粒和SEQIDNO.1所示的核苷酸序列，得中间载体pO1；3）将pO1用EcoRI和NcoI消化，与克隆的大豆油体蛋白基因连接，得到中间载体pOB；将pUC57-终止子的克隆载体用HindIII和kpnI消化，回收目的片段nos终止子，同时用这两个酶消化pOB中...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏建，盖玉红，丁亦男，张力娇，卢成文，高立红，杨燕萍，朱倪娜，莫金刚，宋凯，
申请(专利权)人：长春师范大学，
类型：发明
国别省市：吉林;22