一种小分子牛骨胶原肽及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种小分子牛骨胶原肽及其制备方法，所述制备方法依次包括以下步骤：粉碎、提取分离、酶解、复合过滤、浓缩和干燥；所述酶解过程为：在牛骨胶原蛋白提取液中加入骨胶原蛋白酶进行一次酶解；一次酶解后，用混合酸调节一次酶解液的pH值至6-7，然后加入脯氨酸蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为2h-4h，脯氨酸蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1％-0.3％。本发明专利技术根据牛骨胶原蛋白的特殊性，首次采用脯氨酸蛋白酶和骨胶原蛋白酶进行复合酶解，使得到的产品实用性强，小分子活性肽的得率很高，得率高达90％。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物活性物质的提取领域，具体涉及一种小分子牛骨胶原肽及其制备 方法。
技术介绍
我国是世界第一肉类生产大国，随着屠宰数量地不断增加，副产物也大量产生，目 前每年能产生约近2000万吨的畜禽骨。以牛骨为例，其约占牛体质量的12%~20%，即每 生产IOOkg牛肉就会有12~20kg的牛骨产生。在我国的骨加工业中，畜骨大部分用于生 产动物饲料，例如生产骨胶、骨油、骨粉等，其附加值都很低，尤其是牛骨深加工开发研究较 少。骨的营养价值丰富，骨中的粗蛋白含量与肉十分接近，且大部分是胶原，胶原占骨中蛋 白质总量的80%以上。胶原蛋白是动物体骨骼中含量最大的一种蛋白质，将胶原蛋白进一 步酶解可得到性能更加优良的胶原肽，将其应用于美容化妆品、医学、药用、食品工业等领 域，能够充分提升其附加值。 胶原蛋白是广泛存在于动物和人体中的一种蛋白质，具有多种生理活性，但因分 子量大而难以被人体完全吸收。胶原多肽是胶原蛋白经酶解而形成的小分子的生物活性 肽，由于其源于动物胶原蛋白，分子结构和植物蛋白、胶原蛋白相比更适合人体吸收。胶原 多肽不仅具有一般蛋白质的营养作用，还具有不可替代的调节功能和良好的营养特征、生 理功能、加工特性等，人体吸收率达100%。其中，从牛骨中提取的胶原蛋白肽经酶解后所得 到的牛骨胶原蛋白肽在增加骨密度、预防与治疗骨关节炎和骨质疏松、抑制血管紧张素转 化酶活性、抑制血小板凝集活性、抗氧化活性、抗肿瘤活性等多方面具有特别的功能作用。 近年来关于骨骼酶解的相关专利，大多采用胃蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、 胰蛋白酶等，虽然取得了一定的效果，但由于骨骼中主要成分是胶原蛋白，其三股螺旋结构 导致胶原蛋白难以分解，且产物分子量分布范围广、不集中，大分子肽含量较高，因此至今 没有找到真正合适的降解骨骼的大工业生产利用的酶类。且目前国内利用牛骨制备的胶原 肽，产品分子量多数分布在5000道尔顿至10000道尔顿之间。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对现有技术中存在的缺陷，提供了一种小分子牛 骨胶原肽及其制备方法。 本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：一种小分子牛骨胶原肽的制备方法， 依次包括以下步骤：粉碎、提取分离、酶解、复合过滤、浓缩和干燥； 所述酶解过程是：向提取分离后获得的牛骨胶原蛋白提取液中加入骨胶原蛋白酶 进行一次酶解，一次酶解温度为50°C -55°C，一次酶解时间为lh_2h，骨胶原蛋白酶的加入 量为牛骨胶原蛋白质量的〇. 1% -〇. 3%，一次酶解结束后进行灭酶处理； -次酶解后，用混合酸调节一次酶解液的pH值至6-7,然后加入脯氨酸蛋白酶 进行二次酶解，二次酶解时间为2 h - 4 h，脯氨酸蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的 0. 1% -0. 3%，二次酶解结束后进行灭酶处理。 本专利技术的有益效果是：本专利技术根据牛骨胶原蛋白的特殊性，首次采用脯氨酸蛋白 酶和骨胶原蛋白酶进行复合酶解，使得到的产品实用性强，小分子活性肽的得率很高，得率 尚达90 %。 在上述技术方案的基础上，本专利技术还可以做如下改进。 进一步，所述复合过滤包括活性碳过滤和膜过滤步骤，所述活性碳过滤步骤是向 灭酶处理后的牛骨胶原蛋白酶解液中加入活性碳，活性碳的加入量为牛骨胶原蛋白质量 的2% -4%，将牛骨胶原蛋白酶解液升温至80°C -100°c，并保温5min-10min ;然后降温至 70°C -80°C，静置 30min-2h ; 所述膜过滤步骤是将经过活性碳过滤后的牛骨胶原肽溶液依次经过桶式过滤器、 棉饼过滤器和孔径为〇. 1 μπι的多层膜过滤器进行过滤，膜过滤压力为0.1 MPa-O. 3MPa。 采用上述进一步方案的有益效果是：利用活性碳的吸附作用以及膜设备过滤作 用，能有效去除有害重金属，使最终得到的牛骨胶原肽产品安全无毒。 进一步，所述浓缩过程为：将经过过滤的牛骨胶原肽溶液在蒸发器中浓缩至固形 物含量为25 % -35 %，浓缩温度控制在55°C -65°C，浓缩压力为-0· 4MPa至-0· 6MPa。 进一步，所述干燥过程为：将经过浓缩的牛骨胶原蛋白浓缩液经干燥塔干燥，干燥 过程中的进口温度为180 °C -190 °C，出口温度为85 °C -95 °C。 进一步，所述提取分离过程为：将经过粉碎后的牛骨清洗干净后，放入蒸煮罐中进 行蒸煮，牛骨与水的体积比为1:3-5,蒸煮压力为0. 15MPa-2MPa，蒸煮温度为100°C _120°C， 蒸煮时间为2h-4h。 进一步，所述粉碎过程为：将新鲜的动物骨头先人工除去骨头上的杂质后，再利用 碎骨机粉碎至2cm_3cm的骨块。 进一步，所述灭酶处理过程为：将经过一次酶解或二次酶解获得的牛骨胶原蛋白 酶解液加热至90°C -100°C，并保持5min-10min，进行灭酶处理。 采用上述方法即制得本专利技术所述的一种小分子牛骨胶原肽，小分子牛骨胶原肽的 平均分子量为200道尔顿-1000道尔顿。【具体实施方式】 结合以下实施例对本专利技术的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本专利技术， 并非用于限定本专利技术的范围。、 实施例1 本实施例的一种小分子牛骨胶原肽的制备方法，具体包括以下步骤： 1)粉碎：将新鲜的牛骨头先人工除去骨头上的杂质后，再利用碎骨机粉碎至2cm 的骨块。 2)提取分离：所述提取分离过程为：将经过粉碎后的牛骨清洗干净后，放入蒸煮 罐中进行蒸煮，牛骨与水的体积比为1:3,蒸煮压力为0. 15MPa，蒸煮温度为100°C，蒸煮时 间为2h。提取分离后得到牛骨胶原蛋白提取液，采用波美计或凯氏定氮法对牛骨胶原蛋白 提取液中的牛骨胶原蛋白含量进行检测。 3)酶解：在牛骨胶原蛋白提取液中加入骨胶原蛋白酶进行一次酶解，一次酶解温 度为50°C，一次酶解时间为lh，骨胶原蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0. 1% ; 骨胶原蛋白酶解后，用混合酸调节一次酶解液的pH值至7,然后加入脯氨酸蛋 白酶进行二次酶解，二次酶解时间为2 h，脯氨酸蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的 0. 1% ； 将经过二次酶解的牛骨胶原蛋白酶解液加热至90°C，并保持5min，进行灭酶处 理。 本实施例根据牛骨胶原蛋白的特殊性，首次采用脯氨酸蛋白酶和骨胶原蛋白酶进 行复合酶解，使得到的产品实用性强，小分子活性肽的得率很高，得率高达90%。 4)复合过滤：复合过滤包括活性碳过滤和膜过滤，所述活性碳过滤为将灭酶处理 后的牛骨胶原蛋白酶解液中加入活性碳，活性碳的加入量为牛骨胶原蛋白质量的2%，将牛 骨胶原蛋白酶解液升温至80°C，并保温IOmin ;然后降温至70°C，静置30min ; 膜过滤为将经过活性碳过滤后的牛骨胶原肽溶液依次经过桶式过滤器、棉饼过滤 器和孔径为0. 1 μ m的多层膜过滤器进行过滤，膜过滤压力为0.1 MPa。 本实施例利用活性碳的吸附作用以及膜设备过滤作用，能有效去除有害重金属， 使最终得到的小分子骨胶原肽产品安全无毒。 5)浓缩：将经过过滤的牛骨胶原肽溶液进入蒸发器中浓缩至固形物含量为30%， 浓缩温度控制在65°C，浓缩压力为-0· 6MPa。 6)干当前第1页1 2 3 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种小分子牛骨胶原肽的制备方法，其特征在于，依次包括以下步骤：粉碎、提取分离、酶解、复合过滤、浓缩和干燥；所述酶解过程是：向提取分离后获得的牛骨胶原蛋白提取液中加入骨胶原蛋白酶进行一次酶解，一次酶解温度为50℃‑55℃，一次酶解时间为1h‑2h，骨胶原蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1％‑0.3％，一次酶解结束后进行灭酶处理；一次酶解后，用混合酸调节一次酶解液的pH值至6‑7，然后加入脯氨酸蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为2h‑4h，脯氨酸蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1％‑0.3％，二次酶解结束后进行灭酶处理。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李俊伟，
申请(专利权)人：北京天肽生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11