一种维生素H的提取纯化方法技术

本发明专利技术涉及一种利用维生素H发酵液制备维生素H的方法，该方法是将维生素H发酵液经过预处理、陶瓷膜过滤、超滤、纳滤、结晶和干燥得到维生素H。本发明专利技术可实现原料药维生素H稳定、高效的生产。同时利用该方法，可以提高维生素H产量，具有节能、减少环境污染、操作简便、工作效率高等优。

【技术实现步骤摘要】
一种维生素H的提取纯化方法
本专利技术属于维生素提取、合成
，特别是涉及一种维生素H的提取纯化方法。
技术介绍
维生素H是一种含硫元素的水溶性B族维生素，100多年前作为酵母生长因子被发现，随后又在蛋黄和肝脏中发现。维生素H在生物体内作为酶的辅因子参与羧化、脱羧和转羧反应，起着将羧基从供体转移到受体的运载体作用。维生素H的生物学作用自从发现以来作为食品和化妆品添加剂，广泛应用于畜牧业、医药、生物医学检测、发酵工业等多个领域，全球市场每年需求量较高，超过了200吨。目前，国内采用合成法和发酵法生产维生素H，但采用发酵法生产维生素H的提取、纯化工艺没有相关的文献报道。
技术实现思路
本专利技术的目的就在于提供一种有效提高提取收率，降低成本，减少环境污染，实现稳定、高效生产的维生素H的提取纯化方法。为实现上述目的所采取的技术方案为：一种维生素H的提取纯化方法，其特征在于包括如下工艺步骤：1)预处理：首先将维生素H发酵液调节pH至7.1～7.5，静置20～40min，然后升温至60～80℃，再次静置40～60min，后降至室温，加入吸附剂，充分搅拌，继续静置80～100min，用不锈钢金属网过滤，得到维生素H滤液；2)将过程1)所得的维生素H滤液稀释，升温至35～40℃后依次进行陶瓷膜过滤、超滤和纳滤处理，所得纳滤滤液升温至60～80℃，然后冷却结晶，固液分离，干燥和筛分即可。所述过程1)中，调节pH采用的是质量浓度为10～30％碳酸钠溶液。所述过程1)中，过滤后的不锈钢金属网用去离子水冲洗，至冲洗液体积等同于发酵液体积时停止冲洗，该冲洗液与维生素H滤液混合；所述不锈钢金属网的过滤精度为300～500μm。所述过程1)中，吸附剂为重金属吸附剂，其加入量为维生素H发酵液质量的0.01～0.05％。重金属吸附剂可以选用重金属吸附剂H2061。所述过程2)中，稀释是指在维生素H滤液加入去离子水，其加量为滤液体积的20～40％。所述过程2)中，陶瓷膜过滤过程中，压力控制在0.3～0.4MPa，陶瓷膜为管束式多孔陶瓷膜材质为氧化铝，截留分子量为5KD。所述过程2)中，超滤温度控制在30～35℃，压力控制在0.2～0.3MPa；超滤采用中空纤维超滤膜，材质为PVDF，膜孔径为0.01μm。所述过程2)中，在纳滤处理前，先将超滤滤液降至室温，再加入去离子水稀释维生素H，使其化学效价降至500～1000μ/ml，然后进行纳滤。所述过程2)中，纳滤是采用陶氏纳滤膜NF90-400/34i脱盐型纳滤膜，纳滤压力控制在2～2.5MPa，纳滤流速300～400L/h，纳滤的浓缩体积倍数为3～5倍，纳滤结束，采用去离子水顶洗8～10min。所述过程2)中，冷却结晶过程为：按照10～12℃/h的降温速率进行冷却，期间，连续慢速恒流导入纳滤滤液体积的5～10％的反溶剂去离子水，当出现结晶现象时，快速加入纳滤滤液总亿的0.1～0.5％的晶种维生素H，至温度降至-10～-5℃时停止降温和去离子水的填加，继续搅拌20～40min，然后静置2～4h即可。所述过程2)中，干燥是采用双锥混粉机，调节进风温度至120～130℃，排风温度至50～80℃。所述过程2)中，超滤过程中，加入透析水，该透析水为陶瓷膜过滤的滤液，当首次陶瓷膜过滤的滤液体积达到发酵液体积的30％时，将其稀释3倍作为透析水，连续加入2次。所述过程2)中，晶种维生素H用量(g)＝维生素H滤液的化学效价(u/ml)×体积(m3)×比例系数(％)。本专利技术的技术效果为：1)本专利技术建立了一种利用维生素H发酵液制备维生素H的方法。2)总收率在85％以上。3)成品质量符合相关规定。具体实施方式下面用实例予以说明本专利技术，应该理解的是，实例是用于说明本专利技术而不是对本专利技术的限制。本专利技术的范围与核心内容依据权利要求书加以确定。下述实施例中维生素H发酵液是采用产氨短杆菌，通过二级发酵模式得到维生素H发酵液，该发酵培养基中的碳源主要是葡萄糖和淀粉，氮源主要是豆饼粉、蛋白胨和酵母粉。材料来源：重金属吸附剂H2061由上海辉建实业有限公司提供。实施例1维生素H发酵液10m3，效价为2540u/ml。1)预处理：搅拌转速控制在30r/min；首先用10％碳酸钠溶液调节发酵液pH至7.1，静置20min；其次将维生素H发酵液升温至60℃，然后静置40min；最后发酵液降至室温，加入1kg的吸附剂H2061，搅拌转速控制在100r/min；搅拌1min，静置80min，用不锈钢金属网过滤，过滤精度为300μm，得到维生素H滤液8.2m3；用去离子水冲洗不锈钢金属网，冲洗液与维生素H滤液混合，滤液的体积为10m3，效价为2497u/ml，预处理的收率为98.3％。2)稀释：将维生素H滤液加入去离子水2m3，滤液的体积为12m3。3)陶瓷膜过滤：将过程2)得到的维生素H溶液升温至35℃，采用管束式多孔陶瓷膜过滤。过滤过程中，压力控制在0.3～0.4MPa。陶瓷膜过滤结束，滤液的体积为11.8m3。4)超滤：将过程3)得到的维生素H溶液控制在30℃，进行超滤，压力控制在0.2～0.3MPa，超滤结束，滤液的体积为11.6m3。5)纳滤：将过程4)得到的滤液温度降至室温，再加入去离子水稀释维生素H，使其化学效价降至500u/ml，然后进行纳滤，纳滤结束，滤液的体积为19.3m3。6)冷却结晶：搅拌转速控制在30r/min；将过程5)所得滤液升温至60℃，然后开始降温，降温的速率控制在10～12℃/h，降温至-10℃时停止降温；降温过程中，连续慢速恒流导入反溶剂去离子水，加量为1m3，温度降至-10℃，停止加入去离子水。降温过程中，出现结晶现象时，快速加入晶种维生素H24.9g。温度降至-10℃，继续搅拌20min，然后静置2h。7)干燥滤液经固液分离，所得固体维生素H进行干燥。启用双锥混粉机，调节进风温度至120～130℃，排风温度至50～80℃，加湿粉于加料口，经8～12目不锈钢筛网后，随气流至旋风分离器，到达筛粉机经过筛得到维生素H21.53kg。总收率为85.3％。实施例2维生素H发酵液10m3，效价为2365u/ml。1)预处理：搅拌转速控制在35r/min；首先用15％碳酸钠溶液调节发酵液pH至7.2，静置25min；其次将维生素H发酵液升温至65℃，然后静置45min；最后发酵液降至室温，加入2kg的吸附剂H2061，搅拌转速控制在105r/min；搅拌2min，静置85min，用不锈钢金属网过滤，过滤精度为350μm，得到维生素H滤液8.3m3；用去离子水冲洗不锈钢金属网，冲洗液与维生素H滤液混合，滤液的体积为10m3，效价为2327u/ml，预处理的收率为98.4％。2)稀释：将维生素H滤液加入去离子水2.5m3，滤液的体积为12.5m3。3)陶瓷膜过滤：将过程2)得到的维生素H溶液升温至36℃，采用管束式多孔陶瓷膜过滤。过滤过程中，压力控制在0.3～0.4MPa。陶瓷膜过滤结束，滤液的体积为12.3m3。4)超滤：将过程3)得到的维生素H溶液控制在31℃，进行超滤，压力控制在0.2～0.3MPa，超滤结束，滤液的体积为12.1m3。5)纳滤：将过程4)得到的滤液温度降至室温，再加入去离子水稀释维生素H本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种维生素H的提取纯化方法，其特征在于包括如下工艺步骤：1)预处理：首先将维生素H发酵液调节pH至7.1～7.5，静置20～40min，然后升温至60～80℃，再次静置40～60min，后降至室温，加入吸附剂，充分搅拌，继续静置80～100min，用不锈钢金属网过滤，得到维生素H滤液；2)将过程1)所得的维生素H滤液稀释，升温至35～40℃后依次进行陶瓷膜过滤、超滤和纳滤处理，所得纳滤滤液升温至60～80℃，然后冷却结晶，固液分离，干燥和筛分即可。

【技术特征摘要】
1.一种维生素H的提取纯化方法，其特征在于包括如下工艺步骤：1）预处理：首先将维生素H发酵液调节pH至7.1～7.5，静置20～40min，然后升温至60～80℃，再次静置40～60min，后降至室温，加入吸附剂，充分搅拌，继续静置80～100min，用不锈钢金属网过滤，得到维生素H滤液，所述吸附剂为重金属吸附剂，其加入量为维生素H发酵液质量的0.01～0.05%；2）将过程1）所得的维生素H滤液稀释，升温至35～40℃后依次进行陶瓷膜过滤、超滤和纳滤处理，所得纳滤滤液升温至60～80℃，然后冷却结晶，固液分离，干燥和筛分即可；所述陶瓷膜过滤过程中，压力控制在0.3～0.4MPa，陶瓷膜为管束式多孔陶瓷膜，材质为氧化铝，截留分子量为5KD；所述超滤温度控制在30～35℃，压力控制在0.2～0.3MPa\；所述在纳滤处理前，先将超滤滤液降至室温，再加入去离子水稀释维生素H，使其化学效价降至500～1000μ/ml，然后进行纳滤，纳滤压力控制在2～2.5MPa，纳滤流速300～400L/h，纳滤的浓缩体积倍数为3～5倍，纳滤结束，采用去离子水顶洗8～10min；所述冷却结晶过程为：按照10～12℃/h的降温速率进行冷却，期间，连续慢速恒流导入纳滤滤液体积的5～10%的反溶剂去离子水，当出现结晶现象时，快速加入纳滤滤液总亿的0.1～0.5%的晶种维生素H，至温度降至-10～-5℃时停止降温和去离子水的填加，继续搅拌20～40min，然后静置2～4h即可。2.按照权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：王义，周丽娜，王文超，
申请(专利权)人：宁夏泰瑞制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：宁夏;64