用于FGFR1的四氢苯并噻吩并[2,3‑d]氨基嘧啶衍生物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术一种作用于FGFR1的四氢苯并噻吩并[2,3‑d]氨基嘧啶衍生物及其制备方法与应用，该四氢苯并噻吩并[2,3‑d]氨基嘧啶类衍生物的结构如式(I)所示。本发明专利技术通过对三种细胞：H460(人肺癌细胞)、A549(人肺腺癌细胞)、U251(胶质瘤细胞)的抗凋亡实验的研究，表明所测化合物都有一定程度的抑制活性，且随浓度的增加，抑制活性增强。同时，FGFR1激酶抑制活性实验表明该类化合物具有一定的抗肿瘤活性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药技术和有机合成领域，具体涉及一种作用于FGFRl受体的四氢苯 并噻吩并氨基嘧啶类衍生物及其制备方法与应用。
技术介绍
酪氨酸激酶（TKs)是一组酶系，可催化ATP的磷酸基转移到许多重要蛋白质的酪 氨酸残基上，使酚羟基磷酸化。之后激活下游信号通路，这些信号通路直接负责调节下游的 生物反应。在除神经细胞外的一般正常细胞中，蛋白质的酪氨酸磷酸化是极少发生的，但在 带有酪氨酸激酶活性的癌基因病毒转化的细胞中，磷酸化的酪氨酸增加10倍甚至更多，TK 活性的增加可能与增生性疾病，如肿瘤、动脉粥样硬化、牛皮癣等有关。因此，TK不仅在癌 基因机制研宄方面，而且在抑制肿瘤疾病方面都有重要的意义。 受体酪氨酸激酶（RTKs)包括有成纤维细胞生长因子受体FGFRs，表皮生长因子的 受体EGFRs，血管内皮生长因子受体VEGFRs，血小板衍生生长因子受体I3DGFRs等。RTK由 胞外受体结构域、单通道跨膜域和一个细胞质的羧基末端域三个区域组成。当RTKs突变、 过度表达，RTK信号系统的异常活化就会导致细胞过度增殖、血管生成和其他生理病理的 变化，最终发展为癌症和其他疾病。研宄表明，肿瘤的发生通常是各种RTK的一个网络共 活化。因此，研宄RTK靶标的小分子抑制剂作为抗癌药物已经成为研宄的激烈领域。其中 PI-88、苏拉明、PNU145156E、反应停等以FGFs为靶标的抑制剂已进入临床试验。 成纤维细胞生长因子受体家族是一类穿膜的酪氨酸激酶受体，包括4个高度保守 的酪氨酸激酶受体亚型（FGFR1，2,3和4)及一些异构分子，由四种基因编码，是一种跨膜蛋 白质，它们的结构具有相同的特征，第一，在胞外的结合区域，包含三对Cys形成的三个免 疫球蛋白结构域和一个N末端的信号肽，在免疫球蛋白的第二和第三个结构域支架有一个 由8个氨基酸残基组成的酸盒。第二，跨膜区是保守的疏水区域。第三，胞内区域，由近膜 区、酪氨酸激酶活性区及碳端，组成碳端的7个氨基酸在配体被结合后可能发生了磷酸化。 成纤维细胞生长因子受体通过与成纤维细胞生长因子（FGF)和硫酸乙酰肝素形成三元复 合物，进而引发一系列的信号传导途径，参与调节生物体内的生理过程。 2010年，Krishna等研宄人员对ZINC数据库的220万个化合物进行FGFRl激酶 筛选，和XP Glide对接，发现苯并噻吩并嘧啶类化合物有较好抑制FGFRl的抑制活性，其中 一个代表化合物A IC5tl达到1. 9 μ mol/L，和FGFRl激酶对接所得的配合物中可以看出它被 绑定在铰链区，在激酶的Ala564有氢键链接，这是化合物嘧啶环上的酰胺结构所形成的两 个氢键。这与吲哚化合物对接时的情况有所不同，同样是内酰胺，吲哚类化合物是羰基氧与 Glu562形成一个氢键，氨基与Ala564形成另一个氢键。 对以FGFRl为靶标的小分子抑制剂，研宄最多的是吲哚类和喹诺酮类的化合物， 噻吩并嘧啶类化合物目前还研宄的不够多，开发出更多的可以作为FGFRl小分子抑制剂的 新化合物具有重要的意义。
技术实现思路
本专利技术提供了一种用于FGFRl的四氢苯并噻吩并氨基嘧啶衍生物及其制 备方法与应用，该四氢苯并噻吩并氨基嘧啶衍生物具有较好的抗肿瘤活性。 -种用于FGFRl的四氢苯并噻吩并氨基嘧啶衍生物，结构如式（I )所 示： 式（I )中，R 为· 其中，R1独立地选自H、卤素或NH2; 札的个数可以为一个或者多个； R2或者R3独立地选自H、烷基、取代或者未取代的苯基； 所述苯基上的取代基为(^~C4烷基、C C4烷氧基或者卤素。 本专利技术以四氢苯并噻吩并氨基嘧啶为母核，在C2位进行结构修饰，合成一系列的 四氢苯并噻吩并氨基嘧啶衍生物，并采用体外激酶活性抑制筛选方法测得其体外 FGFRl抑制活性，采用MTT法在细胞水平测试衍生物对FGFRl高表达细胞的抗肿瘤活性，最 后通过分子生物学手段检测活性化合物对FGFR下游信号通道的抑制活性，确认了该类衍 生物具有确切的FGFRl抑制活性。 依据四氢苯并噻吩并氨基嘧啶衍生物对FGFRl抑制活性的大小，作为优 选，所述的R2或者R 3独立地选自H、C C 5烷基或者苯基。这些化合物的活性更佳。 作为优选，所述的四氢苯并噻吩并氨基嘧啶衍生物，结构如式（II )所 示： 本专利技术还提供了一种所述的四氢苯并噻吩并氨基嘧啶衍生物的制备方 法，包括以下步骤： (1)在碱的作用下，环己酮与硫和丙二腈进行噻吩化反应，反应结束后经过后处理 得到2-氨基-3-腈基-4, 5, 6, 7-四氢苯并噻吩； (2)步骤（1)得到的2_氨基_3_腈基_4, 5, 6, 7-四氢苯并噻吩与氯乙腈进行 嘧啶化反应，反应结束后经过后处理得到2-氯甲基-4-氨基-5, 6, 7, 8-四氢苯并噻吩并 嘧啶； (3)步骤⑵得到的2-氯甲基-4-氨基-5, 6, 7, 8-四氢苯并噻吩并嘧啶 与胺类化合物进行取代反应，反应结束后经过后处理得到所述的四氢苯并噻吩并 氨基嘧啶衍生物。 反应式如下： 步骤（1)中，影响反应收率的主要因素为碱的种类和溶剂的种类，作为优选，所述 的碱为吗啡啉； 所述的噻吩化反应在乙醇中进行。此时，反应的收率较高，后处理简单。 步骤（1)中，所述的噻吩化反应的温度为室温。 步骤（1)中，所述的环己酮、硫和丙二腈的摩尔比为1:1:1。 步骤（2)中，影响反应收率最主要的因素为反应溶剂的种类，作为优选，所述的嘧 啶化反应在二氧六环中进行。此时，反应的收率较高，后处理简单。 步骤（2)中，所述的嘧啶化反应的温度为70~90°C。 步骤（2)中，所述的2-氨基-3-腈基-4, 5, 6, 7-四氢苯并噻吩和氯乙腈的摩尔比 为 1:1. 5〇 步骤（3)中，影响反应收率最主要的因素为反应溶剂的种类，作为优选，步骤（3) 中，所述的取代反应在二氧六环中进行。此时，反应的收率较高，后处理简单，得到的产品的 纯度高。 步骤（3)中，所述的取代反应的温度为溶剂的回流温度，2-氯甲基-4-氨 基-5, 6, 7, 8-四氢苯并噻吩并嘧啶与胺类化合物的摩尔比为1 :2~4。 本专利技术还提供了一种所述的四氢苯并噻吩并氨基嘧啶类衍生物的应用， 所述的四氢苯并噻吩并氨基嘧啶类衍生物用于制备治疗与FGFRl受体相关疾病的 药物； 所述的药物含有治疗有效量的四氢苯并噻吩并氨基嘧啶类衍生物和药 用辅料。 激酶抑制活性实验表明该类化合物具有一定的抗肿瘤活性。作为优选，所述的药 物用于抗肿瘤。 试验结果表明，本专利技术的四氢苯并噻吩并氨基嘧啶类衍生物对人肺癌细 胞（H460)、人肺腺癌细胞（A549)和胶质瘤细胞（U251)具有一定的抑制活性，且随浓度的 增加，抑制活性增强。作为优选，所述的药物用于抑制人肺癌细胞（H460)、人肺腺癌细胞 (A549)和胶质瘤细胞（U251)中的至少一种。 同现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：本专利技术所述的四氢苯并噻吩并 氨基嘧啶衍生物对H460 (人肺癌细胞）、A549 (人肺腺癌细胞）、U251 (胶质瘤细 胞）的抗凋亡有一定程度的抑制活性，且随浓度的增加，抑制活性增强。同时，激酶抑制活 性实验表明该类化合物具有一定的抗肿瘤活性。【附图说明】 图1为FGF本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于FGFR1的四氢苯并噻吩并[2,3‑d]氨基嘧啶衍生物，其特征在于，结构如式(Ⅰ)所示：式(Ⅰ)中，R为或者‑NR2R3；其中，R1独立地选自H、卤素或NH2；R2或者R3独立地选自H、烷基、取代或者未取代的苯基；所述苯基上的取代基为C1～C4烷基、C1～C4烷氧基或者卤素。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：叶发青，陈弟，谢自新，刘志国，林丹，张金三，王学宝，张园，梁广，李校堃，王宇，俞淑芳，
申请(专利权)人：温州医科大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33