从广金钱草中提取分离黄酮氧苷类化合物单体的方法和系统技术方案

本发明专利技术提供了一种提取分离染料木素-7-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷即式1所示化合物的方法，该方法包括以下步骤：利用乙醇对广金钱草进行回流提取，获得广金钱草提取物；利用醇体系对提取物进行多级色谱分离，其中包括，利用第一醇体系对提取物进行第一色谱分离，获得第一分离部分，利用第二醇体系对第一分离部分进行第二色谱分离，获得第二分离部分，利用第三醇体系对第二分离部分进行第三色谱分离，以获得所述式1所示化合物。利用本发明专利技术的方法从广金钱草中分离提取式1所示化合物，工艺简单，生产时间短，收率高，纯度高，能够获得纯度95％以上的式1所示化合物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物化学
，涉及从广金钱草中提取分离黄酮氧苷类化合物单 体的方法和系统，具体的，本专利技术涉及一种从广金钱草中提取分离黄酮氧苷类化合物单体 染料木素 -7-0- β -D-呋喃芹糖基-(1 - 6) -0- β -D-吡喃葡萄糖苷的方法和系统。
技术介绍
广金钱草为豆科山蚂幢属植物Desmodium Styracifolium(Osbeck)Merr.，其药用 部位为干燥地上部分，主要化学成分为黄酮、皂苷、多糖、生物碱等化合物。具有清热除湿， 利尿通淋之功效。用于热淋、沙淋、石淋、小便涩痛、水肿尿少、黄疸尿赤、尿路结石。 染料木素 -7-0-β -D-呋喃芹糖基-(1 - 6)-0-β -D-吡喃葡萄糖苷，其化学结构 式如式1所不，其为黄色粉末，分子式：C26H28O14;分子量：564 ;式1所不化合物如下： R1= Glc (6 - I) Api。 9 该化合物存在于广金钱草药材中，是广金钱草中重要的药效物质之一，且含量相 对较高。同时，式1所示化合物也可作为广金钱草鉴别和含量测定用的对照品，以及用于广 金钱草及其相关药物制剂如广金钱草总黄酮胶囊的质量控制用。现有提取分离该化合物的 方法和系统亟待改进。
技术实现思路
本专利技术旨在至少在一定程度上解决现有技术中的技术问题至少之一或者提供 一种商业选择。为此，本专利技术的一个目的在于提出一种从广金钱草中提取分离染料木 素 -7-0- β -D-呋喃芹糖基-(1 - 6) -0- β -D-吡喃葡萄糖苷的方法和系统，利用该提取分 离方法和系统得到的式1所示化合物，纯度高，有利于作为广金钱草鉴别和含量测定用的 对照品、以及作为广金钱草及其相关药物制剂的质量控制。 依据本专利技术的一方面，本专利技术提供一种提取分离式1所示化合物的方法，该方法 包括以下步骤：利用乙醇对广金钱草进行回流提取，获得广金钱草提取物；利用醇体系对 所述提取物进行多级色谱分离，其中包括，利用第一醇体系对所述提取物进行第一色谱分 离，获得第一分离部分，利用第二醇体系对所述第一分离部分进行第二色谱分离，获得第二 分离部分，利用第三醇体系对所述第二分离部分进行第三色谱分离，以获得所述式1所示 化合物。 本专利技术的该方法，利用多级色谱分离，包括组合利用大孔树脂纯化技术，中压制备 及凝胶色谱技术，采用醇-水体系，从广金钱草提取物中分离提取式1所示化合物，该工艺 操作简单，生产时间短，产品收率高，纯度高，能够获得纯度达到95%以上的式1所示化合 物，获得的式1所示化合物可作为含量测定用化学对照品。该工艺步骤以及各个步骤的参 数条件，是专利技术人综合考虑、多次调整试验大孔树脂色谱、反相中压色谱和凝胶色谱的组合 顺序及其各自的洗脱检测条件对广金钱草中的式1所示化合物的分离纯化效果的影响而 确定下来的，该提取纯化过程不涉及毒性相对强的有机溶剂，提取分离操作过程及提取物 都安全可靠。 图1为本专利技术的一个实施例中的提取分离式1所示化合物的方法的步骤流程图。 根据本专利技术的实施例，上述本专利技术一方面的式1所示化合物提取分离方法，还可以具有以 下技术特征至少之一： 根据本专利技术的一个实施例，所述利用乙醇对广金钱草进行回流提取，获得广金钱 草提取物，包括：利用浓度50-95%的乙醇对所述广金钱草进行两次回流提取，合并两次回 流提取所得的提取液，获得合并提取液，除去所述合并提取液中的乙醇，和/或除去所述合 并提取液中的乙醇和离子，以及任选的，进行干燥，以获得所述提取物。两次浓度为50-95% 乙醇回流提取获得提取物，是专利技术人经过多次试验摸索确定的，既能充分利用原料也能节 省时间，利于规模化生产制备；去除提取液中的乙醇和/或离子，利于排除它们对后续分离 纯化的干扰。 根据本专利技术的一个实施例，所述两次回流提取，其中一次的乙醇和广金钱草的重 量比为12:1，回流提取的时间为I. 5h-3h，任选的为2h，另一次的乙醇和广金钱草的重量比 为10:1，回流提取的时间为lh-2h，任选的为I. 5h。回流时，浓度为50-95%乙醇和广金钱 草的比例以及回流时间，是专利技术人经过多次试验检测确定的，能够使原料得到高提取。 根据本专利技术的一些实施例，所述第一醇体系为乙醇-水体系，该乙醇-水体系中的 乙醇的浓度为60-65 %，较佳的，所述乙醇-水体系中的乙醇的浓度为60%，所述第一色谱 为大孔树脂。该乙醇-水洗脱体系中乙醇的浓度是专利技术人结合后续色谱分离条件、多次试 验检测洗脱下来的峰中的式1所示化合物比例，经过多次调整优化确定的。 根据本专利技术的一些实施例，所述第二醇体系为乙醇-水体系，该乙醇-水体系中的 乙醇的浓度为20-40 %，所述第二色谱为反向色谱，较佳的，选择的反向色谱为反向中压色 谱，更佳的，选择C18柱，其柱压为l-10bar，洗脱流速为5~30ml/min。该乙醇-水洗脱体 系中的乙醇浓度是专利技术人结合第一分离部分中目标成分的比例，以及第一色谱分离中的乙 醇-水洗脱体系，多次试验优化确定的，利于在简单操作和短时间内，获得收率高、纯度高 的式1所示化合物。 根据本专利技术的一个实施例，所述利用第二醇体系对第一分离部分进行第二色谱分 离，获得第二分离部分，包括：利用乙醇浓度为a的乙醇-水体系对所述第一分离部分进行 等度洗脱28-35min，接着换用乙醇浓度为的乙醇-水体系对所述第一分离部分进行 梯度洗脱180_220min，收集以获得所述第二分离部分，其中，a的取值范围为20-28%，b的 取值范围为35-40%。先利用一个浓度的乙醇-水体系等度洗脱，再进行梯度洗脱，能够提 高分离提取效率；等度洗脱和梯度洗脱的乙醇浓度或浓度范围，以及洗脱时间，是专利技术人考 虑收率、时间、回收的分离部分的复杂度、分离部分中目标成分的比例等，多次试验确定的。 如图2所示，根据本专利技术的另一个实施例，所述利用第二醇体系对第一分离部分 进行第二色谱分离，获得第二分离部分，包括：利用乙醇浓度为C的乙醇-水体系对所述第 一分离部分进行等度洗脱30min，接着换用乙醇浓度为的乙醇-水体系对所述第一分 离部分进行梯度洗脱200min，收集获得初级第二分离部分；利用乙醇浓度为e的乙醇-水 体系对所述初级第二分离部分进行等度洗脱30min，接着换用乙醇浓度为的乙醇-水 体系对所述初级第二分离部分进行梯度洗脱200min，收集获得所述第二分离部分，其中，c 和e的取值范围为20-28%，d和f的取值范围为35-40%，e>c，d>f。前后两次，都先利用 一个浓度的乙醇-水体系等度洗脱，再进行梯度洗脱，能够提高分离提取式1所示化合物 的效率；前后两次的等度洗脱和梯度洗脱的乙醇浓度或浓度范围、各自的洗脱时间、速度， 是专利技术人结合考虑两次等度-梯度洗脱的条件、收率、时间、回收的分离部分的复杂度、分 离部分中目标成分的比例等，多次试验优化确定的，利于在简单操作和短时间内，获得收率 高、纯度高的式1所示化合物。在本专利技术的一个较佳实施例中，c = 20%，d = 40%，e = 28%，f = 35%，能够使最终获得的提取纯化产物的纯度达95 %以上。 根据本专利技术的另一个实施例，所述第三醇体系为纯甲醇，所述第三色谱为凝胶色 谱。在本专利技术的一个实施例中，所选本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种提取分离染料木素‑7‑O‑β‑D‑呋喃芹糖基‑(1→6)‑O‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷的方法，其特征在于，包括以下步骤：利用乙醇对广金钱草进行回流提取，获得广金钱草提取物；利用醇体系对所述提取物进行多级色谱分离，其中包括，利用第一醇体系对所述提取物进行第一色谱分离，获得第一分离部分，利用第二醇体系对所述第一分离部分进行第二色谱分离，获得第二分离部分，利用第三醇体系对所述第二分离部分进行第三色谱分离，以获得所述染料木素‑7‑O‑β‑D‑呋喃芹糖基‑(1→6)‑O‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王学海，许勇，李莉娥，杨仲文，余通，冯芸，尹海龙，杨婷，黄璐，曹儒宾，谢长，
申请(专利权)人：武汉光谷人福生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42