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一种气微菌及其应用制造技术

技术编号:11796208 阅读:79 留言:0更新日期:2015-07-30 01:00
本发明专利技术涉及一种气微菌及其应用。本发明专利技术所提供的气微菌(Aeromicrobium sp.)分离自陈熟普洱茶,保藏号为CGMCC No.9738。依据多相分类学方法,该菌株是气微菌属的一个新种,其分类地位是Aeromicrobium sp.,依据国际细菌系统分类委员会的命名方法,将该种命名为Aeromicrobium camelliae sp.nov.。本发明专利技术所提供的气微菌新菌种中温生长(30-37℃),易培养。该新种的发现和利用丰富了我们的可利用微生物资源。本发明专利技术所提供的气微菌新菌种具有蛋白酶和酯酶活性,为蛋白酶和酯酶在食品、医药和化工等行业应用提供菌种资源。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。
技术介绍
气微菌属由 Miller 等在 1991 年建立,模式种为 NRRL Β-3381τ。到现在为止,气微菌属共包括11个种,分离自土壤、空气、海洋和牧草等环境。2005 年,由Yoon等对气微菌属的相关特性做了修正。好氧生长,不产芽孢,细胞呈杆状或球状, 中温,主要的脂肪酸为10-甲基C18:0,C16:0,C 18:1〇9c和(或)C16:Q2-OH。气微菌属G+C 含量范围为70. 6~73mol%〇 多相分类的概念最初由Colwell于1970年提出,是指利用微生物多种不同的信 息,包括表型的、基因型的和系统发育的信息,综合起来研宄微生物分类和系统进化的过 程。其中DNA同源性分析是确定正确的分类地位的最直接的方法,而DNA-DNA杂交可以在 总体水平上研宄微生物间的关系,用于种水平上的分类学研宄。1987年,国际系统细菌学委 员会(International Committee on Systematic Bacteriology, ICSB)规定,DNA 同源性 多70%为细菌种的界限。 气微菌属的很多微生物可产生多种生物活性物质,如酶、抗菌物质、絮凝剂以及牛 磺胆酸,因此在工农业生产中具有很好的应用潜力。
技术实现思路
本专利技术的目的之一在于提供一种气微菌,该气微菌为SEQ ID NO. 1所示的碱基序 列。 本专利技术的目的之二在于提供该气微菌在液体发酵生产蛋白酶和酯酶中的应用。 为达到上述目的,本专利技术采用如下技术方案: 一种气微菌,该菌株的保藏号为CGMCC No. 9738。 -种上述的气微菌的培养方法,其特征在于该方法是将气微菌YS17 CGMCC No. 9738接种于培养基中,在15-50°C,pH5. 5-12. 0的条件下进行培养。 上述最适培养温度为30-37 °C。 上述最适 pH 为 7. 0-8. 0。 上述的培养的培养基中还包括质量百分比浓度不超过11%的NaCl。 上述的培养在需氧条件下进行。 一种根据上述的气微菌在液体发酵生产蛋白酶和酯酶中的应用。 本专利技术所述的培养可以是各种微生物的培养方式,比如液体培养、固体培养、半固 体培养等,可以是摇床培养,也可以是发酵罐深层发酵,优选的摇床培养。 本专利技术所述的培养的接种量为常规,优选2%,所述百分比为体积百分比。 本专利技术所述的培养基为气微菌常规培养基,优选是TYB培养基。 在符合本领域常识的基础上,上述各优选条件,可任意组合,即得本专利技术各较佳实 例。 本专利技术所用试剂和原料均市售可得。 本专利技术的积极进步效果在于:本专利技术提供了气微菌属的一个新种,该菌株的分类 地位是,依照国际细菌系统分类委员会的命名方法,欲将该种命名为 caffieBiae sp.nov.。该新种的发现和利用丰富了我们的可利用微生物资 源,对我们以后更好地利用气微菌做出了一定的贡献。本专利技术的气微菌YS17,可提取酯酶和 蛋白酶,在食品、医药和化工等行业具有有广泛应用。 生物材料保藏信息 本专利技术的气微菌YS17,已于2014年9月26日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会 普通微生物中心(CGMCC),保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生 物研宄所,邮编:1〇〇1〇1。该菌株的保藏编号为:CGMCC No.9738。该菌株的分类命名是气微 菌乂a?sp.,名称为 YS17。【附图说明】 图1显示本专利技术气微菌新种菌株YS17的16S rRNA系统发育进化树。【具体实施方式】 下面通过实施例的方式进一步说明本专利技术,但并不因此将本专利技术限制在所述的实 施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,按照常规方法和条件,或按照商 品说明书选择。本专利技术中所述的室温是指进行试验的操作间的温度,一般为25°C。 Jeroffiicro办ia? e/yiAre應DSM 8599τ购自德国微生物菌种保藏中心, Aeromicrobium alkaliterrae 为W Aeromicrobium ginsengisoli 14732? 自曰本微生物菌种保藏中心。 实施例1、本专利技术新菌株YS17的分离制备 取普洱熟茶浸出液,将其稀释涂布于LB固体培养基中,30°C培养5-6天,挑取单菌落, 然后划线纯化得到。 将其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),其保藏编 号为 CGMCC No. 9738。 实施例2、本专利技术新菌株YS17的表观特征 1.菌落特征 取菌株YS17的单菌落,转接到TYB固体培养基(琼脂)上,于30°C恒温培养箱中培养 24h、36h和48h,分别观察其菌落的大小、颜色、边缘、凸起、光滑度、粘性、透明度等特点。结 果显示,菌株YS17在TYB固体培养基上形成边缘整齐,光滑,湿润,不透明,黄色的菌落,直 径约1mm。 2.细胞形态学特征 细胞为短杆,顶端圆钝;革兰氏染色阳性;细胞菌体大小为〇. 3-0. 5 μ mXO. 9-1. 6 μ m, 单生。 实施例3、本专利技术新菌株YS17的生长特性 挑取在TYC固体培养基(琼脂)上培养24 h的新鲜培养物,接种到TYB液体培养基,37°C 摇床培养20~24h,作为种子。 液体TYB培养基的组成(/L):胰蛋白胨15g,NaCl 5g,大豆蛋白胨5g,蒸馏水定容 至 1000 ml0 L生长温度: 将所培养的YS17种子按2%(v/v)接种量转接新鲜的无菌接种TYB (液体培养基中,混 匀。分别置于 4°C、10°C、15°C、20°C、25°C、30°C、37°C、40°C、45°C、50°C和 60°C 的水浴培养, 每个温度梯度做三个平行,分别在24 h和48 h时测定其生长情况。得到菌株YS17生长温 度范围为15~50°C,最适温度30~37°C。 2.生长NaCl耐受性 所培养的YS17种子按2%(v/v)接种量转接氯化钠浓度分别为0. 0%、2. 0%、 5.0%、7.0%、9%、10.0%、11.0%和12.0%的了¥8培养基,30°〇培养,分别于24 11和48 11的 生长状态做记录。结果显示菌株YS17的NaCl耐受性为11%。 3.生长pH范围 用无菌的lmol/L HCl和lmol/L NaOH将灭好菌的TYB培养基调至pH值分别为3. 0、 4· 0、5· 0、5· 5、6· 0、6· 5、7· 0、8· 0、8· 5、9· 0、10· 0,将所培养的 YS17 种子按 2% 接种量接入, 30°C培养,分别于24 h和48 h的生长状态做记录。得到菌株YS17生长的pH范围为 5. 5~12· 0,最适 pH 为 7. 0~8· 0。 实施例4、本专利技术新菌株YS17的生理生化特性 利用API ZYM和API20E鉴定系统(生产厂商:bioMe' rieux)及常规的生理生化测定 方法(东秀珠,蔡妙英等,2001)对菌株YS17及相关的同属菌株进行生理生化特征鉴定。 菌株YS7的主要生理生化特征:好氧生长;接触酶阳性;核酸酶阴性;β -半乳糖 苷酶阴性,精氨酸双水解酶阴性,赖氨酸脱羧酶阴性,鸟氨酸脱羧酶阴性,脲酶阴性,酯酶 (C4)阳性,类脂酯酶(C8)阳性,胰凝乳蛋白酶阳性,不产生吲噪,VP反应阳本文档来自技高网...
一种<a href="http://www.xjishu.com/zhuanli/27/CN104805042.html" title="一种气微菌及其应用原文来自X技术">气微菌及其应用</a>

【技术保护点】
一种气微菌,该菌株的保藏号为CGMCC No.9738。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:牛莉莉唐天羿熊梦洁陈婷婷陈佳娴董文凯
申请(专利权)人:上海大学
类型:发明
国别省市:上海;31

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