微生物制剂菌体的浓缩方法技术

本发明专利技术属于应用微生物技术领域，涉及一种微生物制剂菌体的浓缩方法，按以下步骤进行：用蒸馏水配制成２０ｇ／Ｌ～３０ｇ／Ｌ海藻酸钠溶液；用蒸馏水配制成２０ｇ／Ｌ～３０ｇ／Ｌ甲基纤维素钠；按照海藻酸钠溶液∶微生物菌液＝１∶１０的比例的将海藻酸钠糊状体缓慢加入微生物菌液中，使海藻酸钠在菌液中浓度为２ｇ／Ｌ～３ｇ／Ｌ，搅拌静置使菌体与海藻酸钠粘合；按照羧甲基纤维素钠溶液∶微生物菌液＝１∶１０的比例的的将羧甲基纤维素钠溶液缓慢加入微生物菌液中，使羧甲基纤维素钠在菌液中浓度为２ｇ／Ｌ～３ｇ／Ｌ，搅拌静置后，用虹吸管吸掉上清液，收集沉淀即为浓缩菌体。本发明专利技术简单易行，无毒高效，能将微生物菌液中的菌体浓缩２０～６０倍，细胞得率可达９５％以。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于应用微生物
，涉及一种水产养殖、畜牧养殖、污水净化应用的 。
技术介绍
微生物制剂由于具有无毒副作用，无残留污染，不产生抗性等优点，在水产养殖， 畜牧养殖及环境保护方面起着越来越重要的作用。随着微生物制剂的普及和升温，人们为 了降低运输储藏成本和使用成本，提高制剂浓度，提高使用效果，对发酵所得菌体进行了不 同方式和不同程度的浓缩。目前微生物制剂的浓缩方法主要有两种一是物理方法，包括离心法和过滤法，这 种浓缩方法设备投入高，运行成本也高；二是化学方法主要采用明矾、聚铝、聚铁等高分 子化合物作为絮凝剂，这些絮凝剂本身具有毒性，对微生物产品有毒害作用，同时对微生物 产品的使用对象及其环境也有不利影响。因此，针对微生物菌剂研制出一种高效经济，安全 无毒的浓缩方法是本领域技术人员有待解决的难题之一。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对以上现有技术存在的问题，提出一种微生物 制剂菌体的浓缩方法，简单易行，无毒高效，能将微生物菌液中的菌体浓缩20-60倍，细胞 得率可达95%以。本专利技术解决以上技术问题的技术方案是，按以下步骤进行(1)将发酵好的微生物菌液装入容器中；(2)称取海藻酸钠，用蒸馏水配制成20g/L 30g/L的海藻酸钠溶液；(3)称取羧甲基纤维素钠，用蒸馏水配制成20g/L 30g/L的羧甲基纤维素钠溶 液；(4)按照海藻酸钠溶液微生物菌液=1 10 1 20的比例将步骤(2)所得海 藻酸钠溶液缓慢加入步骤(1)的微生物菌液中，使海藻酸钠在微生物菌液中的浓度为2g/ L 3g/L，搅拌静置使菌体与海藻酸钠粘合，得到菌体与海藻酸钠粘合的微生物菌液；(5)按照羧甲基纤维素钠溶液步骤(4)所得菌体与海藻酸钠粘合的微生物菌液 =1 10 1 20的比例将步骤(3)所得羧甲基纤维素钠溶液缓慢加入步骤(4)所得菌 体与海藻酸钠粘合的微生物菌液中，使羧甲基纤维素钠在微生物菌液中的浓度为2g/L 3g/L，搅拌静置后，用虹吸管吸掉上部清液，收集沉淀即为浓缩菌体。这样，本专利技术采用海藻酸钠与羧甲基纤维素钠为絮凝剂来浓缩微生物菌剂，简单 易行，无毒高效，细胞得率达到了 95%以，能将微生物菌液中的菌体浓缩20 60倍。作为本专利技术进一步限定的技术方案步骤(4)中，海藻酸钠溶液缓慢加入微生物菌液中后，先快速搅拌5 10分钟，随后缓慢搅拌30 60分钟，随后静置1 2小时使菌体与海藻酸钠粘合。步骤(5)中，羧甲基纤维素钠溶液缓慢加入步骤(4)所得菌体与海藻酸钠粘合的 微生物菌液中后，先快速搅拌5 10分钟，随后缓慢搅拌30 60分钟，最后静置24 36 小时，再用虹吸管吸掉上清液，收集沉淀即为浓缩菌体。步骤(1)中，容器为圆柱形容器。本专利技术的优点是(1)成本低廉本专利技术中需要的设备投入很少，耗能少，运行成 本低，原材料来源广泛，成本低廉；(2)无毒无害，安全性高本专利技术中所用的海藻酸钠与羧 甲基纤维素钠都是安全无毒的食品添加剂，作为增稠剂，粘合剂广泛的应用于食品，医药等 行业；(3)浓缩效率高本专利技术的方法能将液体微生物菌剂浓缩20 60倍，浓缩回收率达 到95 %以上，具有高效的浓缩效果；(4)操作简便，易于大规模生产本专利技术操作简便，成 本低，克服了传统的离心法和过滤法设备投资大，耗能高成本高的缺点，非常便于大规模生 产。具体实施例方式实施例一光合细菌菌剂的浓缩将光合细菌菌剂成品100L倒入圆柱型容器中，在圆柱型容器中抽取IOmL菌液对 其进行菌体浓度检测，检测方法按照NY527-2002《光合细菌菌剂》标准中的MPN5管法进行； 称取海藻酸钠和羧甲基纤维素钠，用蒸馏水分别单独配制成20g/L溶液；先加入海藻酸钠 溶液，按海藻酸钠溶液微生物菌液=1 10的比例的将海藻酸钠溶液缓慢加入光合细菌 微生物菌液中，先快速搅拌5分钟，随后缓慢搅拌30分钟，静置1小时使菌体与海藻酸钠粘 合充分；再加入羧甲基纤维素钠溶液，按羧甲基纤维素钠溶液微生物菌液=1 10的比 例缓慢加入菌液中，先快速搅拌5分钟，随后缓慢搅拌30分钟，随后静置24小时，用虹吸管 吸掉上清液，收集沉淀，约得到4. 6L的浓缩的光合细菌菌剂。吸取浓缩后的光合细菌菌剂 10mL，测定浓缩后菌体浓度。检测结果如下表表1 实施例二枯草芽孢杆菌菌剂的浓缩将枯草芽孢杆菌菌剂成品IOOL倒入圆柱型容器中，在圆柱型容器中抽取IOmL菌 液对其进行菌体浓度检测，检测方法按照NYT 1467-2007《饲料微生物添加剂-地衣芽孢 杆菌》标准中的方法进行；称取海藻酸钠和羧甲基纤维素钠，用蒸馏水分别单独配制成25g/ L溶液；先加入海藻酸钠溶液，按海藻酸钠溶液微生物菌液=1 15的比例的将海藻酸钠溶液缓慢加入光合细菌微生物菌液中，先快速搅拌8分钟，随后缓慢搅拌45分钟，随后静 置1. 5小时使菌体与海藻酸钠粘合充分；再加入羧甲基纤维素钠溶液，按羧甲基纤维素钠 溶液微生物菌液=1 20的比例缓慢加入菌液中，先快速搅拌10分钟，随后缓慢搅拌60 分钟，随后静置30小时，用虹吸管吸掉上清液，收集沉淀，用虹吸管吸掉上清液，收集沉淀， 约得到4. 4L的浓缩的枯草芽孢杆菌菌剂。吸取浓缩后的枯草芽孢杆菌菌剂10mL，测定浓缩 后菌体浓度。检测结果如下表 表 2 实施例三产朊假丝酵母菌菌剂的浓缩将产朊假丝酵母菌菌剂成品IOOL倒入圆柱型容器中，在圆柱型容器中抽取IOmL 菌液对其进行菌体浓度检测，检测方法按照GB/T4789. 15-2003《食品卫生微生物学检验霉 菌和酵母计数》标准进行；称取海藻酸钠和羧甲基纤维素钠，用蒸馏水分别单独配制成30g/ L溶液；先加入海藻酸钠溶液，按海藻酸钠溶液微生物菌液=1 20的比例的将海藻酸 钠溶液缓慢加入产朊假丝酵母菌微生物菌液中，先快速搅拌10分钟，随后缓慢搅拌60分 钟，静置2小时使菌体与海藻酸钠粘合充分；再加入羧甲基纤维素钠溶液，按羧甲基纤维素 钠溶液微生物菌液=1 15的比例缓慢加入菌液中，先快速搅拌8分钟，随后缓慢搅拌 40分钟，随后静置36小时，用虹吸管吸掉上清液，收集沉淀，约得到3. 2L的浓缩的产朊假丝 酵母菌菌剂。吸取浓缩后的产朊假丝酵母菌菌剂10mL，测定浓缩后菌体浓度。检测结果如 下表表3 本专利技术还可以有其它实施方式，凡采用同等替换或等效变换形成的技术方案，均 落在本专利技术要求保护的范围之内。权利要求，其特征在于按以下步骤进行(1)将发酵好的微生物菌液装入容器中；(2)称取海藻酸钠，用蒸馏水配制成20g/L～30g/L的海藻酸钠溶液；(3)称取羧甲基纤维素钠，用蒸馏水配制成20g/L～30g/L的羧甲基纤维素钠溶液；(4)按照海藻酸钠溶液∶微生物菌液＝1∶10～1∶20的比例将步骤(2)所得海藻酸钠溶液缓慢加入步骤(1)的微生物菌液中，使海藻酸钠在微生物菌液中的浓度为2g/L～3g/L，搅拌静置使菌体与海藻酸钠粘合，得到菌体与海藻酸钠粘合的微生物菌液；(5)按照羧甲基纤维素钠溶液步骤(4)所得菌体与海藻酸钠粘合的微生物菌液＝1∶10～1∶20的比例将步骤(3)所得羧甲基纤维素钠溶液缓慢加入步骤(4)所得菌体与海藻酸钠粘合的微生物菌液中，使羧甲基纤维素钠在微生物菌液中的浓度为2g/L～3g/L，搅本文档来自技高网...

【技术保护点】
微生物制剂菌体的浓缩方法，其特征在于：按以下步骤进行：　　（１）将发酵好的微生物菌液装入容器中；　　（２）称取海藻酸钠，用蒸馏水配制成２０ｇ／Ｌ～３０ｇ／Ｌ的海藻酸钠溶液；　　（３）称取羧甲基纤维素钠，用蒸馏水配制成２０ｇ／Ｌ～３０ｇ／Ｌ的羧甲基纤维素钠溶液；　　（４）按照海藻酸钠溶液∶微生物菌液＝１∶１０～１∶２０的比例将步骤（２）所得海藻酸钠溶液缓慢加入步骤（１）的微生物菌液中，使海藻酸钠在微生物菌液中的浓度为２ｇ／Ｌ～３ｇ／Ｌ，搅拌静置使菌体与海藻酸钠粘合，得到菌体与海藻酸钠粘合的微生物菌液；　　（５）按照羧甲基纤维素钠溶液：步骤（４）所得菌体与海藻酸钠粘合的微生物菌液＝１∶１０～１∶２０的比例将步骤（３）所得羧甲基纤维素钠溶液缓慢加入步骤（４）所得菌体与海藻酸钠粘合的微生物菌液中，使羧甲基纤维素钠在微生物菌液中的浓度为２ｇ／Ｌ～３ｇ／Ｌ，搅拌静置后，用虹吸管吸掉上部清液，收集沉淀即为浓缩菌体。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：孙义，
申请(专利权)人：领绿生物镇江有限公司，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]