一种解淀粉芽孢杆菌及其培养方法和应用技术

技术编号:11466621 阅读:97 留言:0更新日期:2015-05-17 01:02
本发明专利技术公开了一种解淀粉芽孢杆菌及其培养方法和应用,所述解淀粉芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZD0531,其保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:M2014345,用作微生物菌剂的活性成分,能够显著提高作物产量,该菌种培养方法简单,易于大规模推广应用。

【技术实现步骤摘要】
一种解淀粉芽孢杆菌及其培养方法和应用
本专利技术涉及农用微生物
,尤其涉及一种解淀粉芽孢杆菌及其培养方法和应用。
技术介绍
改革开放以来,我国农业有了长足的发展。化学肥料的应用给我国的粮食生产带来了空前的丰收,由改革开放初期的亩产500-600斤增加到现在的亩产1000斤以上,使拥有十三亿多人口的中国解决了温饱问题,人民生活有了保障。化肥在农业增产中起了主要作用,我国有十八亿亩耕地,每年消耗逾1.5亿吨化肥。化肥的大量施用,对环境造成严重污染,耕地大面积盐渍化,土壤板结严重,使得产量下降。为了增产,农民加倍施用化肥,形成了恶性循环。很多地区的瓜果、蔬菜、药材大面积严重污染,很多出口导向型产品如山东蔬菜、云南田七、江西脐橙、广东火龙果和荔枝等我国优势农产品,因产品品质、农药残留超标等问题,而无法出口创汇,直接造成数十亿元的经济损失。为了解决这种问题,国家有关部门通过各项有关政策,引导企业、院校加大研发力度。自2008年以来,国家对与微生物肥料相关的生物产业进行了有史以来力度最大、涉及面最广的国家政策和产业化专项扶持,为我国微生物肥料的发展提供了极其良好的机遇。我国的微生物肥料近12年发展迅速,并已成为我国农业生物产业的重要组成部分。目前,国家农业部科技推广部门大力宣传,引导农民使用生物肥料。具专业机构估计,未来几年,生物肥料的应用会达到化肥总量的3%-5%,但目前的发展离农业生产的需求还有很大距离。截至2013年我国微生物肥料年产量约上千万吨,与欧美发达国家相比,可以说是微乎其微,而且在开发利用方面与一些发达国家还有相当大的距离。农业微生物学是微生物科学的一个重要分支学科,农业微生物研究主要包括:农用微生物资源、土壤微生物、植物营养、微生物固氮、微生物农药、微生物肥料等几个方面。我国在农业微生物研究方面突出表现在农用微生物资源上,通过从自然界中筛选分离具有良好的农业应用价值的微生物菌种,并对农用微生物的功能和作用机理进行深入研究是非常重要的。虽然在这方面,我国已有60年的发展历史,但因种种原因,未能持续化、规模化使用微生物肥料,致使我国在技术发展上远远落后于发达国家。近年来,在国家政策的引导下,一大批优秀的专家、学者努力研究,通过技术交流等方法,引进了国外先进技术,并结合多年来的经验推出了以根瘤菌、放线菌、固氮菌、解磷菌、钾细菌等为代表的生物肥料产品,带动我国生物肥料产业蓬勃发展。随着研究的深入和应用的需要,在不断扩大新品种的开发和改进上,微生物肥料已形成由豆科作物肥料向非豆科作物肥料转化,由单一菌种向复合菌种转化,由单一功能向多功能转化,由无芽孢菌种向有芽孢菌种转化。基于目前的情况,继续寻找具有优异的农业应用价值的微生物菌种并对其进行深入研究对于微生物肥料的发展具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens),其用作微生物菌剂的活性成分,能够显著提高作物产量,该菌种培养方法简单,易于大规模推广应用。本专利技术的目的还在于提供上述解淀粉芽孢杆菌的培养方法和应用。本专利技术的上述目的是通过以下技术方案实现的:一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)ZD0531,其保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC,地址:中国武汉武汉大学),保藏号为CCTCCNO:M2014345。本专利技术的解淀粉芽孢杆菌为革兰氏阳性菌,菌落呈白色或灰白色、不透明、有皱褶,菌体为直杆状,含有芽孢。其16SrDNA序列如SEQIDNO:3所示。该解淀粉芽孢杆菌能够提高作物的产量。本专利技术的解淀粉芽孢杆菌ZD0531的培养方法,包括将该解淀粉芽孢杆菌ZD0531接种于用于培养解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)的培养基进行培养。其中,上述培养基中含有2-4g/L的牛肉膏、8-12g/L的蛋白胨和4-6g/L的氯化钠。牛肉膏的含量例如2.2g/L、2.5g/L、2.8g/L、3.2g/L、3.5g/L、3.8g/L、3.9g/L等,蛋白胨的含量例如8.5g/L、9.0g/L、9.5g/L、10.0g/L、10.5g/L、11.0g/L、11.5g/L、11.8g/L等,氯化钠的含量例如4.2g/L、4.5g/L、4.8g/L、5.2g/L、5.5g/L、5.8g/L、5.9g/L等。优选地,上述培养基中含有3g/L的牛肉膏、10g/L的蛋白胨和5g/L的氯化钠。上述培养温度为25-34℃,例如25℃、25.5℃、26℃、26.5℃、27℃、28℃、29℃、30℃、31℃、32℃、32.5℃、33℃、33.5℃、33.8℃等;培养时间为12-48小时,例如15小时、18小时、20小时、21小时、25小时、28小时、32小时、36小时、40小时、42小时、45小时、46小时、47小时等。本专利技术还提供上述解淀粉芽孢杆菌ZD0531在制备微生物菌剂中的应用。其中,所述微生物菌剂能够提高作物的产量。本专利技术的解淀粉芽孢杆菌ZD0531可用作制备微生物菌剂,用于作物生产中能够显著提升作物的产量,因此本专利技术的解淀粉芽孢杆菌ZD0531是一种非常有价值的农用微生物。生物样品保藏信息:菌株名称:BacillusamyloliquefaciensZD0531保藏日期:2014年7月21日保藏单位:湖北省武汉市武昌珞珈山武汉大学保藏中心,即中国典型培养物保藏中心(CCTCC)保藏编号:CCTCCNO:M2014345附图说明图1为本专利技术的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)ZD0531的划线培养结果的照片;图2为本专利技术的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)ZD0531的革兰氏染色结果的光学显微镜照片。具体实施方式下面结合具体实施例来进一步描述本专利技术,本专利技术的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是示例性的,并不对本专利技术的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是,在不偏离本专利技术的精神和范围下可以对本专利技术技术方案的细节和形式进行修改或替换,但这些修改和替换均落入本专利技术的保护范围内。实施例1:解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)ZD0531的筛选和分离本专利技术的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)ZD0531是从土壤中采用稀释平板法和平板划线法分离获得的,分离方法为:于6、7月份从吉林省长白山森林中采集树根周围的肥沃湿土,采用牛肉膏-蛋白胨固体培养基进行筛选。具体筛选方法如下:称取1-2g土样溶解在200mL无菌水中,置于30℃摇床中250rpm震荡摇晃30min;静置待上层澄清后,取100μL上清液,进行10-1、10-2、10-3、10-4稀释,然后将稀释液涂布于牛肉膏-蛋白胨固体培养基平板上,每个梯度浓度涂布三个平板,在30℃培养2d后,依据解淀粉芽孢杆菌的主要生物学特征挑取几十个菌落进行个别单独培养。将35株个别单独培养的菌落分别于牛肉膏-蛋白胨液体培养基中32℃培养36小时后,得到浓度大约2.0×108cfu/mL的培养液,使用分别来自35株菌体的培养液分别进行实验室喷施实验。具体本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZD0531,其保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:M2014345。

【技术特征摘要】
1.一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)ZD0531,其保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCCNO:M2014345。2.一种权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌ZD0531的培养方法,包括将所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)ZD0531接种于用于培养解淀粉芽孢杆菌的培养基进行培养。3.根据权利要求2所述的培养方法,其特征在于,所述培养基中含有2-4g/...

【专利技术属性】
技术研发人员:张永军
申请(专利权)人:深圳市润田生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:广东;44

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