一种猪蓝耳病卵黄抗体口服液及其制备方法技术

技术编号:11336485 阅读:78 留言:0更新日期:2015-04-23 08:46
本发明专利技术公开了一种猪蓝耳病卵黄抗体口服液及其制备方法。其配方在于,包括以下按照体积比计算的原料:含卵黄抗体的全蛋水溶液95-105、辛酸0.2-0.3、甲醛0.2-0.3、硫柳汞0.01-0.02;还包括800-1000单位/毫升口服液的青链霉素。制备时采用高免蛋全蛋得到澄清卵黄抗体口服液。这种方法制备的卵黄抗体口服液不仅使生产过程中损失少、免疫活性物质强多、生物活性高、无临床副作用,同时,含有蛋清中大量的各种蛋白质,可以减少口服时对抗体的不良影响。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于猪用生物制品
,涉及一种猪蓝耳病卵黄抗体口服液及其制备 方法。
技术介绍
猪蓝耳病,俗称猪繁殖与呼吸综合征(Porcinereproductiveandrespiratory syndrome,PRRS),是由猪蓝耳病病毒引起的,感染猪发热、厌食,妊娠母猪晚期流产、早产、 产死胎、弱胎和木乃伊胎,各种年龄猪(特别是仔猪)呼吸障碍为特征的高度传染性疾病, 具有高度传染性和致死性。 卵黄抗体IgY是的一种免疫球蛋白Ig,IgY在功能上相当于哺乳动物IgG,但结构 上有所不同,具有典型的的免疫球蛋白的空间构象。卵黄抗体具有很多优越性。(1)由于鸟 类与哺乳类动物种系发生学的差距,鸟类更适于生产抗哺乳动物抗原的特异性抗体。卵黄 抗体不会激发补体系统,不与抗哺乳动物抗原的抗体发生反应,不与哺乳动物和细菌的Fc 受体结合,这在免疫诊断中具有重要意义。(2)卵黄抗体作为一种具有生物活性的免疫球蛋 白,在贮存、生产、加工、摄食及消化过程中保证其稳定性是非常关键的。多项试验表明,IgY 具有较好的稳定性,耐酸、耐碱、耐热。卵黄抗体较易保存,4°C条件下存放5年或室温条件 下存放6个月对抗体活性无明显影响。
技术实现思路
本专利技术提供,解决注射用的猪蓝耳病 卵黄抗体使用不方便的问题。 本专利技术的目的是通过以下形式实现的: 一种猪蓝耳病卵黄抗体口服液,包括以下按照体积比计算的原料:含卵黄抗体的全蛋 水溶液95-105、辛酸0. 2-0. 3、甲醛0. 2-0. 3、硫柳汞0. 01-0. 02 ;还包括800-1000单位/毫 升口服液的青链霉素。 制备步骤是: 1) 采用猪蓝耳病毒灭活疫苗对鸡只进行强化免疫:采用三次免疫程序,每次间隔10 天,每只鸡每次疫苗用量为2ml,当抗体效价达到1 : (128-256)时,进行高免蛋收集; 2) 使用0. 1-0. 2%新洁尔灭对高免蛋进行消毒; 3) 将2)中高免蛋的全蛋液进行乳化,乳化时间7-10min,然后加入pH为4. 2-4. 3的、 温度为4-6°C的盐酸酸化水,盐酸酸化水的加入量为全蛋液体积的5. 5-6. 5倍,混匀后,降 温至3-5°C,静置18-24小时; 4) 取3)中的上层清液,升温到25-32°C,加入辛酸,搅拌l_2h,然后静置10-12h,过滤; 其中辛酸体积量:上层清液体积量为(〇. 2-0. 3) : (95-105); 5) 加入甲醛、硫柳汞、青链霉素,使卵黄抗体的全蛋水溶液:辛酸:甲醛:硫柳汞的体积 比为(95-105) : (0? 2-0. 3) : (0? 2-0. 3) : (0? 01-0. 02),青链霉素的含量为 800-1000 单位 / 晕升口服液; 6)分装,保存。 步骤4)过滤时依次通过1. 0mm、0. 45mm、0. 22mm的滤膜进行过滤。 本专利技术通过对高免蛋全蛋提取、低温酸化处理、辛酸处理后得到澄清卵黄抗体口 服液。本专利技术将全蛋使用到卵黄抗体的提取中,可以直接在临床上进行口服使用,蛋清中含 有大量的各类蛋白质,可充分利用高免蛋的价值,提高动物机体的免疫力和应激能力,生物 利用度高,具有生物活性不受影响的优点。【具体实施方式】 实施例1 : 一种猪蓝耳病卵黄抗体口服液的配方包括以下原料:含卵黄抗体的全蛋水溶液95L、 辛酸0. 2L、甲醛0. 3L、硫柳汞0. 02L,以及1000单位/毫升口服液的青链霉素。 其制备方法包括以下步骤: 1)采用市售的猪蓝耳病灭活疫苗进行强化免疫,每只鸡每次疫苗用量为2ml,每次间隔 10天,进行三次免疫程序,当抗体效价达到1 :256时,开始收集高免蛋。 2)将收集高免蛋整理,0. 2%新洁尔灭消毒,备用。 3)水稀释法酸化处理:将2)步高免蛋全蛋打入巴氏罐体内进行充分乳化,乳化时 间7min,然后将乳化后的全蛋液加入pH为4. 2、温度为4°C的盐酸,盐酸加入量为全蛋液体 积的6倍,混匀,放置4°C环境中18小时静置沉淀,取上清液;其中,盐酸酸化水是在水中加 入盐酸使其PH值达到4. 2。 4)辛酸处理;将步骤3)的上清液,即含卵黄抗体的全蛋水溶液进行称量,升温到 25°C,加入辛酸,充分混匀lh,然后静置10h;其中,按体积比,上层清液:辛酸=95 :0. 2 ; 5) 对步骤4)所得澄清液依次用1. 0_、0. 45mm、0. 22mm的滤膜过滤,留取滤液; 6) 向步骤5)所得滤液加入甲醛、硫柳汞、青链霉素;按体积比,含卵黄抗体的全蛋全蛋 水溶液:辛酸:甲醛:硫柳汞=95 :0. 2 :0. 3 :0. 02 ;青链霉素在该口服液中的含量为1000单 位/毫升; 7) 分装,保存。 为确定卵黄抗体口服液在常温下的放置有效期,做了以下试验:将本品保存在 37°C培养箱中,保存24个月,分别1周、2周、1月、2月、4月、8月、12月、16月、20月、24月 后,用琼脂扩散(AGP)法,测定每个时间点取样品的卵黄抗体效价变化,结果见表1。 表1.常温放置口服液不同时间段效价的变化【主权项】1. 一种猪蓝耳病卵黄抗体口服液,其特征在于:包括以下按照体积比计算的原料:含 卵黄抗体的全蛋水溶液95-105、辛酸0. 2-0. 3、甲醛0. 2-0. 3、硫柳汞0. 01-0. 02 ;还包括 800-1000单位/毫升口服液的青链霉素。2. -种如权利要求1所述猪蓝耳病卵黄抗体口服液的制备方法,其特征在于具体步骤 是: 1) 采用猪蓝耳病毒灭活疫苗对鸡只进行强化免疫:采用三次免疫程序,每次间隔10 天,每只鸡每次疫苗用量为2ml,当抗体效价达到1 : (128-256)时,进行高免蛋收集; 2) 使用0. 1-0. 2%新洁尔灭对高免蛋进行消毒; 3) 将2)中高免蛋的全蛋液进行乳化,乳化时间7-10min,然后加入pH为4. 2-4. 3的、 温度为4-6°C的盐酸酸化水,盐酸酸化水的加入量为全蛋液体积的5. 5-6. 5倍,混匀后,降 温至3-5°C,静置18-24小时; 4) 取3)中的上层清液,升温到25-32°C,加入辛酸,搅拌l_2h,然后静置10-12h,过滤; 其中辛酸体积量:上层清液体积量为(〇. 2-0. 3) : (95-105); 5) 加入甲醛、硫柳汞、青链霉素,使卵黄抗体的全蛋水溶液:辛酸:甲醛:硫柳汞的体积 比为(95-105) : (0? 2-0. 3) : (0? 2-0. 3) : (0? 01-0. 02),青链霉素的含量为 800-1000 单位 / 晕升口服液; 6) 分装,保存。3. 根据权利要求2所述的猪蓝耳病卵黄抗体口服液的制备方法,其特征在于:步骤4) 过滤时依次通过1. 〇mm、〇. 45mm、0. 22mm的滤膜进行过滤。【专利摘要】本专利技术公开了。其配方在于,包括以下按照体积比计算的原料:含卵黄抗体的全蛋水溶液95-105、辛酸0.2-0.3、甲醛0.2-0.3、硫柳汞0.01-0.02;还包括800-1000单位/毫升口服液的青链霉素。制备时采用高免蛋全蛋得到澄清卵黄抗体口服液。这种方法制备的卵黄抗体口服液不仅使生产过程中损失少、免疫活性物质强多、生物活性高、无临床副作用,同时,含本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种猪蓝耳病卵黄抗体口服液,其特征在于:包括以下按照体积比计算的原料:含卵黄抗体的全蛋水溶液95‑105、辛酸0.2‑0.3、甲醛0.2‑0.3、硫柳汞0.01‑0.02;还包括800‑1000单位/毫升口服液的青链霉素。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:徐进郭俊清
申请(专利权)人:郑州后羿制药有限公司
类型:发明
国别省市:河南;41

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