一种带状疱疹病毒的制备方法技术

一种带状疱疹病毒的制备方法，直接检测到的抗体，该抗体特异性地结合到水痘-带状疱疹的多肽，检测水痘带状疱疹病毒在动物的存在下，由水痘带状疱疹病毒引起的疾病的诊断，检测水痘带状疱疹病毒具有的单核苷酸多态性ORF68。本发明专利技术还提供了一种疫苗组合物的制造改进的减毒水痘-带状疱疹病毒的方法，分离的多核苷酸，和孤立的多肽，和病毒。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】，直接检测到的抗体，该抗体特异性地结合到水痘-带状疱疹的多肽，检测水痘带状疱疹病毒在动物的存在下，由水痘带状疱疹病毒引起的疾病的诊断，检测水痘带状疱疹病毒具有的单核苷酸多态性ORF68。本专利技术还提供了一种疫苗组合物的制造改进的减毒水痘-带状疱疹病毒的方法，分离的多核苷酸，和孤立的多肽，和病毒。【专利说明】专利
本专利技术涉及医药领域，尤其是。专利技术背景 水痘-带状疱疹病毒(VZV)是一种古老的病毒。估计它的起源已建立调制解调器疱疹病毒产生约60-80万年前。VZV的alphaherpesvirus疱疫病毒亚科的成员。在童年，这是水痘的病原体后，病毒进入潜伏状态，在背根神经节，几十年后，同样的病毒重新激活，并导致疾病，带状疱疹(带状疱疹)。125 kbp的VZV基因组的全部序列已经发表(Davison等人，普通病毒学杂志，67:1759-1816 (1986))。从其他疱疹病毒的序列数据随后公布，现在已经被细分 alphaherpesvimuses 分为两个属称为 Simplexvirus Varicellovirus。VZV 被认为具有最稳定的抱疫病毒基因组的所有。目前，对带状疱疹病毒没有特异的治疗方法。
技术实现思路
本专利技术的分离的多核苷酸多态性是由于，在增加优先顺序排列，I个单核苷酸多态性的存在下，至少I个，至少2个，至少3个，最优选至少4个单核苷酸多态性的多核苷酸。优选地，本专利技术的分离的多核苷酸包括不大于4的单核苷酸多态性。甲单核苷酸多态性，可以只由一个核苷酸的分离的另一单核苷酸多态性，本专利技术的多核苷酸的一个例子是一个多态0RF37或它们的补码，其中多态性是0RF37核苷酸806。在核苷酸806的核苷酸可以是鸟嘌呤，腺嘌呤，胸腺嘧啶，优选为胸腺嘧啶。又如本专利技术的多核苷酸的核苷酸序列的核苷酸101650至103081本专利技术的多核苷酸的另一个例子是一个多态0RF68或它们的补码，其中多态性位点是在核苷酸448 0RF68。在核苷酸448的核苷酸可以是腺嘌呤，胞嘧啶，胸腺嘧啶，优选为腺嘌呤，本专利技术的多核苷酸包括，例如，克隆由水痘带状疱疹的成员或诱变的多核苷酸本领域已知的重组技术，以便它具有本专利技术的多核苷酸的碱基序列可以通过以下方式获得。或者，本专利技术的多核苷酸可以是化学或酶促合成的，例如，合成的寡核苷酸或PCR0本专利技术还包括，类似于本专利技术的多核苷酸的多核苷酸，如上所述，包括多态0RF37核苷酸或一个多态的0RF68，或它们的补充。结构的相似性的相似性被称为是由对准的两个多聚核苷酸的残基优化相同的核苷酸的数目沿它们的序列的长度，在一个或两个序列的间隙是被允许在以优化共享的核苷酸的数量的对应。本专利技术的一个优选的多核苷酸的碱基序列，本专利技术还包括隔离多核苷酸片段的多核苷酸的片段是如本文所述的分离的多核苷酸的一部分，其中的部分，优选至少约15，更优选至少约20，最优选至少约25个连续核苷酸并且包括至少一个单核苷酸多态性。的单核苷酸多态性，可以在任何位置中的多核苷酸片段，优选在其中一个片段(双链多核苷酸片段时)或核苷酸的3’末端的片段的3’末端的碱基(的多核苷酸片段的单链)。可以插入本专利技术的多核苷酸的载体。包含本专利技术的多核苷酸的载体的构建使用本领域中已知的标准连接技术。本专利技术的一个孤立的水痘带状疱疹病毒基因组包括不大于4的单核苷酸多态性。孤立的水痘-带状疱疹病毒的本专利技术的实施例的VZV MSP, VZV-VSD, VZV-VIA，VZV，冰岛，或者，分离的水痘带状疱疹病毒可以是一个修改后的水痘带状疱疹病毒，优选改进的减毒水痘-带状疱疹病毒。改性的水痘-带状疱疹病毒在本文中更详细地描述一个单一的核苷酸多态性可以存在另外，单核苷酸多态性可以是沉默的，即不能在一个编码序列，它可以导致在编码的多肽含有比较序列X04370的碱基序列所编码的多肽时，一个单一的氨基酸多态性。在一个孤立的水痘带状疱疹病毒编码的多肽具有的本专利技术的改变的编码序列所编码的多肽的氨基酸序列。的是不是一个编码序列的基因组的区域中可以存在单核苷酸多态性。单一的氨基酸多态性，水痘病毒可具有比本领域已知的血清型是不同的血清型优选地。本专利技术的一个孤立的水痘带状疱疹病毒的血清型是不包含的抗原表位的单克隆抗体3B3结合单克隆抗体可以从ATCC具有血清型VZV-MSP水痘带状疱疹病毒的一个例子。本专利技术的分离的水痘-带状疱疹病毒传播的能力，从一个细胞另一个的速度是大于以前的特点的水痘-带状疱疹病毒，这种表型，这是在此也称为在体外生长速率和细胞至细胞传播。 【具体实施方式】 本专利技术的另一个方面向体外生长率，具有较高的水痘带状疱疹病毒的制造方法的。优选的是，水痘带状疱疹病毒在体外生长率大于在体外生长的汇率的第二水痘带状疱疹病毒。在本专利技术的一些方面中，检测到水痘带状疱疹病毒包括检测到水痘-带状疱疹多肽特异性结合的抗体。本专利技术的水痘带状疱疹病毒的多肽包含多态性。本文中描述了这样的多肽。优选地，由一个多态0RF68编码水痘带状疱疹病毒的多肽，编码的多肽包括天冬酰胺氨基酸150。水痘带状疱疹病毒的制备，其中包括可能还包括试剂，例如一个缓冲区，提供适当的条件下形成的多肽抗体复合物。多肽:抗体复合物，然后检测。抗体的检测在本领域中是已知的，并且可以包括，例如，免疫荧光和过氧化物酶。到水痘-带状疱疹的多肽特异性结合的抗体，该抗体的存在下，用于检测的方法已被用于在各种不同的格式，可用于检测抗体水痘带状疱疹病毒，其中包括补体结合，间接荧光抗体，膜抗原的荧光抗体，中和间接血凝，免疫粘附血凝，放射免疫测定法，乳胶凝集法，酶联免疫吸附试验。检测水痘带状疱疹病毒的其他方法包括扩增的多核苷酸，优选通过PCR。的多核苷酸可以是，例如，来自被摄体的分离，优选具有由水痘带状疱疹病毒引起的疾病的怀疑的主体。优选地，所述的多核苷酸，例如来自受试者的生物样品，优选血液，囊泡液，骨髓，或脑组织。本专利技术在一些方面中，该方法包括接触的多核苷酸，优选的分离的多核苷酸，用引物对，适合于形成可检测的扩增产物的条件下温育，并检测扩增产物。本专利技术还提供了一种用于检测水痘带状疱疹病毒的试剂盒。该套件包括一个水痘-带状疱疹多肽如本文所述的(当检测到水痘带状疱疹病毒的抗体)，或如本文所述的(当扩增的多核苷酸)在一个合适的包装材料的量足以中的至少一个检测的引物对。任选地，能够实施本专利技术所需要的缓冲液和溶液等其他试剂也包括在内。打包的多肽或引物是指用于容纳的试剂盒中的一个或多个物理结构。该包装材料是通过公知的方法，最好能提供一种无菌，无污染物的环境。该包装材料具有一个标签，这表明可用于检测水痘带状疱疹病毒的多肽或引物对。另外，包装材料中包含指令指示内的试剂盒的材料是如何被检测到水痘带状疱疹病毒。如本文所用，术语“包”是指固体基质或材料，如玻璃，塑料，纸，金属箔等，能够持有的多肽或引物对在规定的界限。因此，例如，一个程序包可以是用于包含的引物对的毫克量的玻璃小瓶中，或它可以是一个微量滴定板的井微克量的多肽已贴。“使用说明”通常包括一个有形的表达切合的试剂浓度的至少一种测定方法参数，如试剂和样品的相对量，以混合的试剂/样品的外加剂，温度，缓冲液条件下，维修的时间段，本专利技术还涉及疫苗。在一个方面中，本专利技术的疫本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种带状疱疹病毒的制备方法，其包含的核苷酸115,808至117,679的SEQ ID NO：76的核苷酸序列，其条件是腺嘌呤核苷酸116255。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王阿慧，
申请(专利权)人：上海满益科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31