【技术实现步骤摘要】
本专利技术是于2013年2月28日申请的申请号为201310062950. 2、专利技术名称为大 肠杆菌外膜蛋白TolC核酸适配体的序列及用途的分案申请。
本专利技术属于分子生物学和医学微生物
,涉及大肠杆菌外膜蛋白TolC核 酸适配体的序列及用途。
技术介绍
大肠杆菌(Escherichia coli)是埃希氏菌属的代表菌,是构成人类肠道中的正常 菌群之一,又是重要的条件致病菌,极易通过多种形式和途径侵入肠道外的组织和器官,造 成各种严重感染。随着抗菌药物的临床广泛应用,诱导了大量该菌属耐药菌株的产生,并 形成了该菌对单一抗菌药物耐药到对多种抗菌药物同时耐药,由低耐药率到高耐药率的发 展,给临床治疗带来了极大的困难,导致较高的病死率。目前国内外对大肠杆菌的耐药性机 理展开了深入的研究。研究表明,主动外排泵为大肠杆菌多重耐药的重要机制。大肠杆菌 外排泵包括:RND、MFS、ABC、SMR、MATE五类,其中前三者必须与外膜蛋白(OMP) TolC构成转 运共同体,才能完成对多种药物的外排,由此可见TolC是构成大肠杆菌外排泵的重要组成 成分。TolC是位于外膜上的孔道蛋白,上端为开放结构,以便给外排底物提供泵出的宽阔通 道;下端为封闭结构。外排泵三联复合物构象的改变,可使孔道定期开放或闭合。TolC结 构的改变会引起它们三者相互作用的减弱甚至三联复合物的解体。在关于大肠杆菌外膜蛋 白的研究报导中,很多结果提示了 TolC蛋白在大肠杆菌的多重耐药机制中起到至关重要 的作用。但目前没有报道通过改变该蛋白结构来抑制耐药性。 ...
【技术保护点】
特异结合大肠杆菌外膜蛋白TolC的核酸适配体,所述核酸适配体如SEQ ID NO:11所示序列。
【技术特征摘要】
1. 特异结合大肠杆菌外膜蛋白TolC的核酸适配体,所述核酸适配体如SEQ ID NO :11 所示序列。2. 按权利要求1所述的适配体,其特征在于,所述大肠杆菌外膜蛋白TolC采用如下方 法纯化得到: 采用分子克隆技术,根据大肠杆菌外膜蛋白TolC的基因组序列设计特异引物,所述特 异引物之上游引物Pa为5' -CGGGATCCATGAAGAAAITGCTCCCCAITCTT - 3',其下游引物Pb为 5' - CCGCTCGAGGITACGGAAAGGGITATGACCGTT - 3',以全长 cDNA 为模板,PCR 扩增,得到目的基 因经Bam H I和Xho I双酶切,同样处理PET-30a质...
【专利技术属性】
技术研发人员:张晓青,陈伶利,李杰,
申请(专利权)人:湖南中医药大学,
类型:发明
国别省市:湖南;43
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