本发明专利技术涉及体外诊断试剂领域，特别是涉及一种可溶性瘦素受体的胶乳增强免疫比浊检测试剂盒。本发明专利技术提供一种可溶性瘦素受体的胶乳增强免疫比浊检测试剂盒，包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1由缓冲液1、稳定剂1、防腐剂1、EDTA、增凝剂和保护剂1组成；所述试剂R2由交联sOB-R抗体的聚苯乙烯胶乳微球、缓冲液2、稳定剂2、防腐剂2、保护剂2组成，其中聚苯乙烯胶乳微球与sOB-R抗体之间以共价交联方式连接。本发明专利技术采用胶乳增强免疫比浊法，当血液中的sOB-R与sOB-R抗体反应时，带动了聚苯乙烯胶乳聚集产生一定的浊度，检测更为方便，容易在临床中应用。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及体外诊断试剂领域，特别是涉及一种可溶性瘦素受体的胶乳增强免疫比浊检测试剂盒。本专利技术提供一种可溶性瘦素受体的胶乳增强免疫比浊检测试剂盒，包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1由缓冲液1、稳定剂1、防腐剂1、EDTA、增凝剂和保护剂1组成；所述试剂R2由交联sOB-R抗体的聚苯乙烯胶乳微球、缓冲液2、稳定剂2、防腐剂2、保护剂2组成，其中聚苯乙烯胶乳微球与sOB-R抗体之间以共价交联方式连接。本专利技术采用胶乳增强免疫比浊法，当血液中的sOB-R与sOB-R抗体反应时，带动了聚苯乙烯胶乳聚集产生一定的浊度，检测更为方便，容易在临床中应用。【专利说明】一种可溶性瘦素受体的胶乳增强免疫比浊检测试剂盒
本专利技术涉及体外诊断试剂领域，特别是涉及一种可溶性瘦素受体的胶乳增强免疫 比浊检测试剂盒。
技术介绍
可溶性瘦素受体（soluble 1印tin rec印tor, S0B-R)是血液循环中最主要的瘦素 结合蛋白。天然状态下，人体血液中瘦素结合蛋白有两种大小，分子量为140kD和IlOkD,经 糖苷酶脱糖基后，分子量为90kD和60kD，在人体，可溶性瘦素受体主要来自跨膜瘦素受体 的脱落，它在调节瘦素信号功能中具有至关重要的作用。sOB-R只存在于正常人外周血循环 中，脑脊液中尚未发现sOB-R。生理状态下，sOB-R均具有明显的昼夜节律，饥饿时，sOB-R水 平升高。健康人体sOB-R与高密度脂蛋白（HDL)和脂联素（adiponectin)水平呈正相关， 与体重指数（BMI)、瘦素水平、空腹胰岛素及胰岛素抵抗指数（HOM-IR)呈负相关。肥胖者 体内sOB-R水平降低，经低热卡饮食减肥后，sOB-R水平升高，在实施胃部分切除的减肥者 中，sOB-R水平升高。在代谢综合征患者中，sOB-R与胰岛素抵抗指数（HOM-IR)呈负相关， 多囊卵巢综合症患者，sOB-R水平降低。临床研究发现，严重肾病综合征患者血液中，sOB-R 水平升高，推测这一降低可能是瘦素抵抗的生化指征（marker)，是代谢综合征的构成成分 之一。 越来越多的临床研究也显示，在不同的生理及病理情况下，如1型糖尿病、肥胖等 患者中，血浆sOB-R的水平不同。因此，sOB-R可能通过增强或减弱瘦素的信号功能，从而在 疾病的发生发展中起重要的调节作用。在近期的一项前瞻性研究中调查了 916例18岁的健 康青年男性，并在两年后再次调查了其中91例受试者，发现sOB-R的水平与肥胖的所有基 础测量值和新陈代谢风险因子（血压、总的低密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖）成负相关，而 与高密度脂蛋白胆固醇呈正相关性，这是目前为止第一个前瞻性的较大样本的临床研究， 这些结果提示，sOB-R可能成为代谢综合征和空腹血糖的预警指标。研究还发现血浆sOB-R 的水平与2型糖尿病的风险呈显著负相关，通过校正了 BMI、生活方式、饮食等因素后，发现 血浆瘦素水平与2型糖尿病的风险没有显著关联性，但sOB-R的水平与2型糖尿病的风险 仍然呈显著负相关。这种关联性不依赖BMI、瘦素和脂联素水平，提示sOB-R是2型糖尿病 风险独立的负性指标。sOB-R检测可广泛用于内分泌、消化科、感染科、肿瘤科、新生儿监护 室、器官移植科和治疗实验室等。 对于SOB-R检测，现有检测方法主要有定量检测方法，检测方法有双抗夹心法 (ELISA)、放射免疫分析法（RIA)等，其中放射免疫分析法在临床中有一定的限制，目前通 常应用ELISA方法检测。尽管ELISA的灵敏度较高，但其操作复杂，需要较多时间，一般结 果为定性或半定量，定量时偏差较大，且线性范围窄，对于样品稀释度不好控制。
技术实现思路
针对现有技术存在的上述不足，本专利技术所要解决的技术问题是：提供一种制备成 本低廉，稳定性好，易于保存，数据重复性好，检测灵敏度高，可广泛应用于临床生化仪的 sOB-R检测试剂盒。 为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术第一方面提供一种可溶性瘦素受体的胶 乳增强免疫比浊检测试剂盒，其特征在于，包括试剂Rl和试剂R2,所述试剂Rl由缓冲液1、 稳定剂1、防腐剂1、EDTA、增凝剂和保护剂1组成；所述试剂R2由交联sOB-R抗体的聚苯乙 烯胶乳微球、缓冲液2、稳定剂2、防腐剂2、保护剂2组成，其中聚苯乙烯胶乳微球与sOB-R 抗体之间以共价交联方式连接。 本技术方案中的防腐剂1和2是指可以抑制试剂中细菌和微生物污染的一类试 齐U，对试剂具有防腐杀菌的作用。试剂R2中的保护剂一类能够保护胶乳颗粒表面的抗体的 试剂。稳定剂1和2可以保持试剂内的电荷平衡。本技术方案中的sOB-R胶乳增强免疫比 浊试剂盒，将sOB-R抗体交联在聚苯乙烯胶乳微球表面，当血液中的sOB-R与sOB-R抗体反 应时，带动聚苯乙烯胶乳微球聚集产生一定浊度，而浊度与血液中的sOB-R含量在一定范 围成正比，可以用全自动生化仪在400-800nm波长下检测血液中sOB-R的含量。 优选的，所述试剂Rl中的缓冲液1选自Ifepes缓冲液、Tris-HCl缓冲液、MOPS缓 冲液、PBS缓冲液、甘氨酸缓冲液、硼砂缓冲液中的一种或多种的组合，其pH为7. 0?9. 0， 浓度为25?500mmol/L ;所述试剂R2中的缓冲液2选自PBS缓冲液、硼砂缓冲液、甘氨酸 缓冲液、H印es缓冲液、GOODS缓冲液、MOPS缓冲液中的一种或几种，其pH为7. 0?9. 0,浓 度为 25 ?500mmol/L。 本专利技术试剂Rl中的缓冲液1可使用上述本领域各种常用的缓冲液，但为了使得试 剂盒具有更佳的灵敏度和显色效果，本专利技术中所述试剂Rl中缓冲液1优选为包括下列组 分：水苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠和甘氨酸的水溶液，且水苏糖、明矾、果糖二磷 酸钠、六偏磷酸钠、甘氨酸的总浓度为3. 5 - 7. 5g/L，缓冲液的pH值为7. 2 - 7. 6。 优选的，各组分在缓冲液1中的浓度为： 水苏糖 0.8-3g/L; 明矶 0,-1-lg/L; 果糖二磷酸钠 0.8-3 g/L; 六偏磷酸钠 0.05-0.5 g/L; 甘氨酸 1.5-2.25g/L; 所述缓冲液1的溶剂为水。 所述缓冲液1可使用本领域各种常用的pH调节剂进行pH值的调节。 优选的，所述试剂Rl中的稳定剂1选自KCUNaCl、CaCl中的一种或多种的组合， 其质量浓度为〇. 5%?10%;所述试剂R2中的稳定剂2采用离子稳定剂和悬浮稳定剂配合 使用；其中离子稳定剂为NaCl、KCl、Na2C03、Na2SCM或K2S04,悬浮稳定剂为PEG8000、蔗糖、 甘油或葡萄糖。 上述技术方案中稳定剂1选自KCl、NaCl、CaCl中的一种或多种的组合，其质量浓 度为0. 5%?10%，这样的稳定剂1具有价格低廉、原料易得的优点。稳定剂2采用离子稳 定剂和悬浮稳定剂配合使用；其中离子稳定剂为NaCl、KCl、Na2C03、Na2S04或者K 2S04,悬浮 稳定剂为PEG8000、蔗糖、甘油或者葡萄糖；其中优选NaCl和蔗糖配合使用，这样可以保持 体系长期稳定。 优选的，所述试剂Rl中的防腐剂1为叠氮本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种可溶性瘦素受体的胶乳增强免疫比浊检测试剂盒，包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1由缓冲液1、稳定剂1、防腐剂1、EDTA、增凝剂和保护剂1组成；所述试剂R2由交联sOB‑R抗体的聚苯乙烯胶乳微球、缓冲液2、稳定剂2、防腐剂2、保护剂2组成，其中聚苯乙烯胶乳微球与sOB‑R抗体之间以共价交联方式连接，所述试剂R1中缓冲液1为包括下列组分：水苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠和甘氨酸的水溶液，且水苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠、甘氨酸的总浓度为3.5－7.5g/L，缓冲液的pH值为7.2－7.6，各组分在缓冲液1中的浓度为：所述缓冲液1的溶剂为水；所述试剂R2中的缓冲液2选自PBS缓冲液、硼砂缓冲液、甘氨酸缓冲液、Hepes缓冲液、GOODS缓冲液、MOPS缓冲液中的一种或几种，其pH为7.0～9.0，浓度为25～500mmol/L。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：余英，
申请(专利权)人：重庆中元生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆;85
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