本发明专利技术公开了一种瘦素和瘦素受体基因多态性检测芯片及其制备方法和用途。在载体上设有如右所示探针。本发明专利技术的优点是：实现了对瘦素基因ＣＡＡ２５ＣＡＧ和瘦素受体基因Ａｓｎ８５Ｓｅｒ、Ｌｙｓ１０９Ａｒｇ和Ｇｌｎ２２３Ａｒｇ多态性进行检测，具有快速、简捷、高通量的特点，有助于肥胖、糖尿病等易感者的筛选，推动基因诊断和治疗的发展具有重要的社会和经济效益。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种瘦素和瘦素受体基因多态性检测芯片及其制备方法和用途。
技术介绍
瘦素是人和动物肥胖基因编码的一种多靶器官、多功能的分泌型产物，并与瘦素运转蛋白结合，通过与定位于中枢和外周多种组织及其多种形式的瘦素受体结合发挥生物学效应，作为一种机体代谢状态的信号，影响机体生理功能及代谢通路，进而调节体内脂质沉积和能量平衡。肥胖、糖耐量异常和糖尿病、血脂异常、高血压、高胰岛素血症和胰岛素抵抗以及高瘦素血症等因素密切相关。而瘦素受体的结构和功能的改变直接影响着瘦素的生物学功能。至今为止，已发现多种瘦素瘦素受体基因多态性，如瘦素CAA25CAG、瘦素受体Asn85Ser、Lys109Arg和Gln223Arg等，这些多态性导致基因产物发生变化，而这些变化与糖尿病、高血压、肥胖等多种疾病相关。日本学者研究发现肥胖患者中瘦素25CAG变异发生率较正常对照者明显增多，认为瘦素25CAG变异可以作为一个新的肥胖易感的遗传标志。日本学者认为瘦素受体在胰岛素抵抗的发病机制中起着修饰基因的作用。Van等学者认为Lys109Arg变异对瘦素受体功能有修饰作用，研究发现肥胖者携带Arg109等位基因比非携带者瘦素水平明显升高，瘦素受体基因Lys109Arg多态性可能导致肥胖表型的差异，并对体重增加的易感性增加。Gln223Arg变异影响外周和中枢瘦素与瘦素受体的结合能力。Stefan N研究发现Arg223纯合体24小时能量消耗和体力劳动强度低于Gln223纯合体、而腹部皮下脂肪细胞体积明显大于Gln223纯合体。Chiu Kc等通过多因素方差分析发现Gln223Arg基因多态性与胰岛素敏感指数和葡萄糖清除率独立相关。日本学者发现LEPR Arg223Gln基因型携带者血清胆固醇和LDL-C明显升高，而Arg223基因型携带者血清HDL-C水平降低，并对HMG-CoA还原酶抑制剂的反应减弱。用于SNPs做基因分析是特指检测人类基因组中大量存在的单核苷酸变异，这与疾病易感性和毒物易感性有关。SNPs不仅是人类种族和个体差异的标记，亦是决定不同人群种族和个体差异的标记，可以成为寻找疾病相关基因，进行疾病诊断、预防和药物筛选的基础。用于SNPs检测的常规方法有等位基因特异性寡核苷酸(ASO)杂交，限制性内切酶法(RFLP)，位点特异性引物PCR(PCR-SSP)和直接测序等。基因芯片技术的发展为新的SNPs的检测方法提供了可能性。寡核苷酸芯片技术是新近发展起来的一种基因检测技术，它可将大量的寡核苷酸探针有规律地排列在一张玻片上，这些探针可以与信号显示物质标记的样品DNA的扩增序列的互补序列进行相结合，通过对信号物质进行检测，对杂交结果进行计算机软件处理分析，从而获得杂交信号的强度及其分布模式图。1.Ohshiro Y，Ueda K，Nishi M，Ishigame M，Wakasaki H，Kawashima H，Furuta H，SasakiH，Sanke T，Takasu N，Nanjo K.A polymorphic marker in the leptin gene associatedwith Japanese morbid obesity.J Mol Med.2000；78(9)516-202.van Rossum CT，Hoebee B，van Baak MA，et al.Genetic variation in the leptinreceptor gene，leptin，and weight gain in young Dutch adults.Obes Res.2003Mar；11(3)377-863.Takahashi-Yasuno A，Masuzaki H，Miyawaki T，et al.Association of Ob-R genepolymorphism and insulin resistance in Japanese men.Metabolism.2004May；53(5)650-44.Liu YJ，Rocha-Sanchez SM，Liu PY，et al.Tests of linkage and/or association ofthe LEPR gene polymorphisms with obesity phenotypes in Caucasian nuclear families.Physiol Genomics.2004 Apr 13；17(2)101-65.van Rossum CT，Hoebee B，Seidell JC，et al.Genetic factors as predictors of weightgain in young adult Dutch men and women.Int J Obes Relat Metab Disord.2002；26(4)517-286.Stefan N，Vozarova B，Del Parigi A，Ossowski V，Thompson DB，Hanson RL，RavussinE，Tataranni PA.The Gln223Arg polymorphism of the leptin receptor in Pima Indiansinfluence on energy expenditure，physical activity and lipid metabolism.Int JObes Relat Metab Disord.2002 Dec；26(12)1629-327.Chiu KC，Chu A，Chuang LM，Saad MF.Association of leptin receptor polymorphismwith insulin resistance.Eur J Endocrinol.2004 May；150(5)725-98.Takahashi-Yasuno A，Masuzaki H，Miyawaki T，Ogawa Y，Matsuoka N，Hayashi T，HosodaK，Inoue G，Yoshimasa Y，Nakao K.Leptin receptor polymorphism is associated withserum lipid levels and impairment of cholesterol lowering effect by simvastatinin Japanese men.Diabetes Res Clin Pract.2003 Dec；62(3)169-759.Khner M K，Beerli P，Yamato J，et al.Usefulness of single nucleatide polymorphismdata for estimating population parameters.Genetics，2000，156439-44710.Hirschlhorn J N，Sklar P，Lindblad-Toh K，et al.SBE-TAGSan array-based method forefficient single-nu本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种瘦素和瘦素受体基因多态性检测芯片，其特征在于：在载体上设有如下探针：１２５ ＣＣＣＡＴＣＣＡＡＡＡＡＧＴＣ２２５ＣＣＣＡＴＣＣＡＧＡＡＡ ＧＴＣ３２５ＣＣＣ ＡＴＣＣＡＣＡＡＡＧＴＣ４２５ＣＣＣＡＴＣＣＡＴＡＡＡＧＴＣ５８５ＴＡＴＣＣＡＡＡＡＣＡＡＣＴＴＴＣＣ６８５ＴＡＴＣＣＡＡＡＧＣ ＡＡＣＴＴＴＣＣ７８５ＴＡＴ ＣＣＡＡＡＣＣＡＡＣＴＴＴＣＣ８８５ＴＡＴＣＣＡＡＡＴＣＡＡ ＣＴＴＴＣＣ９１０９ＴＧＡＡＧＧＡＡＡＧ ＡＣＡＴＴＴＧＴ１０１０９ＴＧＡＡＧＧＡＡＧＧＡＣＡＴＴＴＧＴ１１１０９ＴＧＡＡＧＧＡＡＣＧＡＣＡＴＴＴＧＴ１２１０９ＴＧＡＡＧＧＡＡＴ ＧＡＣＡＴＴＴＧＴ１３２２３ＡＴＴＴＴＣＣＡＧＴＣＡＣＣＴＣＴ１４２２３ＡＴＴＴＴＣＣＧＧＴＣＡＣＣＴＣＴ１５２２３ＡＴＴＴＴＣＣＣ ＧＴＣＡＣＣＴＣＴ１６２２３ＡＴＴＴＴＣＣＴＧＴＣＡ ＣＣＴＣＴ。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：厉有名，陈韶华，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]
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