一种唾液快速检测幽门螺杆菌的方法及试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种唾液快速检测幽门螺杆菌的方法及其试剂盒，该方法包括以下步骤：收集唾液0.5～1ml，吸取出0.2±0.02ml唾液后，用pH试纸检测剩余唾液pH值并记录；将吸出的唾液与检测液充分混合后反应5～20分钟，用pH试纸检测反应液的pH值并记录；将反应液的pH值与唾液pH值比较，如果反应液的pH值大于或等于唾液pH值时，其反应结果视为阳性，即含有尿素酶，存在幽门螺杆菌；如果反应液的pH值低于唾液pH值时则反应结果视为阴性，即不含尿素酶，不存在幽门螺杆菌。本发明专利技术检测方法简单、无创、经济、客观、快速，受检者无任何不适，适于推广。

【技术实现步骤摘要】
一种唾液快速检测幽门螺杆菌的方法及试剂盒 【
】 本专利技术涉及一种唾液快速检测幽门螺杆菌的方法，本专利技术还涉及一种用于该唾液 快速检测幽门螺杆菌的方法的试剂盒。 【
技术介绍
】 幽门螺杆菌（HP)是一种革兰氏阴性杆菌，流行病学调查全世界人口 HP感染率 50 %。我国被HP传染的人群大约50 %，个别地区或部门高达80 %。 实践证明HP在口腔内寄生，口腔HP与胃HP同源，是胃HP感染的供菌来源。 目前，HP的检测分为侵入性和非侵入性两大类，前者需经胃镜钳取胃粘膜进行检 测，如细菌培养、切片染色、尿素酶试验等，后者无需胃粘膜标本，如 14c、13c尿素呼气试验， HPIgG系列抗体血清学检测、唾液PCR检测技术、唾液幽门螺杆菌抗原测试板和粪便Hp抗原 测定等方法。国内外尚无一种简易、经济、安全、容易被受检者接受并能进行自我检查的HP 检测方法。 现有检测HP的常用方法如14C-尿素呼气试验（14C-UBT)需要专用设备，废弃物需 特殊处理，存在放射线，不适合儿童和孕妇检查，不能自查。唾液幽门螺杆菌抗原测试板唾 液定量存在缺陷，唾液具有粘稠性，用滴管取唾液标本（4滴）既费时又欠准确，废弃物需特 殊处理。唾液PCR技术需要专用设备并在实验室完成，时间长，费用高，不能自查。HPIgG系 列抗体血清学检测以血液为标本，需在实验室完成，实验结果不能判断是现症感染或是既 往感染，不适合治疗后复查，不能自查。粪便幽门螺杆菌抗原检测法以粪便为标本，采集不 方便，需在实验室内完成，不能自查。 已授权的专利一种pH值乙醇法舌苔快速尿素酶的检测方法及试剂 盒（ZL201110439218. 3)，也是检测幽门螺杆菌的方法，且检测快速方便又安全，但采用标 本舌苔时，取苔时受检者有可能出现恶心呕吐反应，少苔或无苔时不能检查，在一定程度上 限制了该方法的使用。 【
技术实现思路
】 本专利技术的目的是为了克服现有技术中的不足之处，提供一种简单、无创、快速、客 观、经济、可重复检查和自查，受检者无任何不适的唾液快速检测幽门螺杆菌的方法，通过 检测唾液中是否存在尿素酶从而可判断是否存在幽门螺杆菌； 本专利技术的另一个目的是提供一种用于该唾液快速检测幽门螺杆菌的方法的试剂 盒。 为了达到上述目的，本专利技术采用以下方案： 一种唾液快速检测幽门螺杆菌的方法，其特征在于包括以下步骤： A、收集唾液0. 5?1ml，吸取出0. 2 ±0. 02ml唾液后，用pH试纸检测剩余唾液pH 值并记录； B、将吸出的唾液与检测液充分混合后反应5?20分钟，用pH试纸检测反应液的 pH值并记录； C、将反应液的pH值与唾液pH值比较，如果反应液的pH值大于或等于唾液pH值 时，其反应结果视为阳性，即含有尿素酶，存在幽门螺杆菌；如果反应液的pH值低于唾液pH 值时则反应结果视为阴性，即不含尿素酶，不存在幽门螺杆菌。 本专利技术中所用的pH试纸为pH精密试纸，检测范围：5. 5?9.0。 本专利技术中的检测液由质量浓度12?15%的尿素溶液和95%乙醇溶液按体积比 I :1. 24组成，所述检测液的体积是所吸取唾液的体积的2. 25±0. 02倍。该尿素溶液由 135± 15g尿素结晶溶解于IOOOg去离子水而成。 本专利技术中用pH试纸检测唾液和反应液的pH值时，使pH试纸被充分浸湿观察60? 120秒，记录pH值。在正常室温状态下，唾液与检测液的反应时间控制在5?10分钟，室温 较低时可延长至20分钟。室温较高时5分钟即可。 一种用于上述唾液快速检测幽门螺杆菌的试剂盒，其特征在于包括有盒体，在所 述的盒体内设有盛装唾液的量杯，密封的带囊吸管，检测范围5. 5?9. 0的pH精密试纸，所 述的带囊吸管的囊内装有检测液。 本专利技术试剂盒中的带囊吸管为整体模压成型，分为管部和囊部，部长10cm，管部长 7cm，周径为1.0cm，带囊吸管的吸管嘴口采用加热密封，吸管嘴口上方依次设有第一刻度 标志和第二刻度标志，该第一刻度标志和第二刻度标志均为模压而成，吸管嘴口的密封位 置在第一刻度标志的下方，第一刻度至第二刻度距离为3cm，该段管腔容量0. 2±0. 02ml， 囊部的长度为3. 0cm，囊部的周径为2. 4cm，囊部的容量为1.2±0. 15ml，囊部内的检测液 体积为0. 45±0. 04ml，其中质量浓度12?15%的尿素溶液0. 2±0. 02ml，95 %乙醇溶液 0. 25±0. 02ml。 本专利技术试剂盒中的量杯为宽口塑料杯，带囊吸管优选塑料制成。 本专利技术检测时需要注意的事项如下： 本专利技术正常的带囊吸管内的检测液为透明无色，如变色或混浊则不宜继续使用， 密封的带囊吸管的贮藏温度为2?KTC ;正常情况下，轻挤囊部，囊腔有一定的张力，如无 张力或有液体漏出时不宜继续使用。 检查前应空腹，不宜含服食品或药物，也不宜漱口，餐后应隔2小时方可检查。检 测前2周内没使用抗菌药物和抗酸剂（包括质子泵拮抗剂）及铋剂、无上消化道出血、无急 性肝炎、肾功能不全、口腔急性炎症或口腔手术者。 pH试纸潮湿或变色不宜使用。 本专利技术的检测原理如下： 1、幽门螺杆菌产生尿素酶，尿素酶使尿素分解，产生氨和CO2，氨使局部pH值升高。 根据PH值的变化判断是否存在幽门螺杆菌感染。 2、去离子水在pH试纸上显示的pH值5. 5?6. 0,尿素结晶pH值彡7. 0,95%乙醇 PH值彡5. 5 ;三者混合后溶液pH值彡5. 5,低于常态唾液PH(6?7. 9)值。 3、带囊吸管的囊部内检测液容量约0. 45 ±0. 04ml，是被检测唾液量0. 2 ±0. 02ml 的2. 25±0. 02倍，当唾液与检测液混合后浓度被稀释，其pH值降低。如果唾液内含大量的 尿素酶，分解尿素产生氨和CO2,使检测液pH值升高。 4、95%乙醇溶液起到祛除唾液泡沫、防腐、去污等作用。口腔内唾液链球菌、内氏 放线菌、沃氏葡萄球菌等产生的尿素酶处于细胞质中，乙醇对上述细菌起封闭作用，阻止尿 素酶的释出，减少对实验结果的影响。幽门螺杆菌产生的尿素酶量大、位于细胞膜上和细胞 膜外，能迅速与尿素发生反应，不受乙醇的影响。 5、pH试纸用于测量唾液和反应试液的酸碱度，获得检测结果。 综上所述，本专利技术具有以下有益效果： 本专利技术属于一种体外试验,所取标本为唾液,是离体标本,对人体无任何损害；本 方法无放射线，标本易得，废弃物少不需特殊处理，对环境无污染；不需特殊设备，操作简 单，操作方法容易掌握，适合不同年龄人群和孕妇检查。可用于HP的初查、复查、普查和自 查。 本专利技术检测方法简单、无创、经济、客观、快速，受检者无任何不适，适于推广。 【【附图说明】】 图1为试剂盒内所装物品示意图， 其中1为量杯，2为带囊吸管，3为试纸，21为第一刻度标志，22为第二刻度标志， 23为管部，24为囊部。 【【具体实施方式】】 为了更好地理解本专利技术，下面结合具体实施例来对本专利技术作进一步说明，但本发 明所要求保护的范围并不局限于实施例所记载的范围。 使用本专利技术的试剂盒并收集唾液快速检测幽门螺杆菌的方法，包括以下步骤： A、用量杯收集唾液0. 5?1ml，用带囊吸管吸取0. 2ml±0. 02ml唾液后，将检测范 围5. 5?9. 0的pH试纸本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种唾液快速检测幽门螺杆菌的方法，其特征在于包括以下步骤：A、收集唾液0.5～1ml，吸取出0.2±0.02ml唾液后，用pH试纸检测剩余唾液pH值并记录；B、将吸出的唾液与检测液充分混合后反应5～20分钟，用pH试纸检测反应液的pH值并记录；C、将反应液的pH值与唾液pH值比较，如果反应液的pH值大于或等于唾液pH值时，其反应结果视为阳性，即含有尿素酶，存在幽门螺杆菌；如果反应液的pH值低于唾液pH值时则反应结果视为阴性，即不含尿素酶，不存在幽门螺杆菌。

【技术特征摘要】
1. 一种唾液快速检测幽门螺杆菌的方法，其特征在于包括以下步骤： A、 收集唾液0.5?lml，吸取出0.2 ± 0.02ml唾液后，用pH试纸检测剩余唾液pH值并 记录； B、 将吸出的唾液与检测液充分混合后反应5?20分钟，用pH试纸检测反应液的pH值 并记录； C、 将反应液的pH值与唾液pH值比较，如果反应液的pH值大于或等于唾液pH值时，其 反应结果视为阳性，即含有尿素酶，存在幽门螺杆菌；如果反应液的pH值低于唾液pH值时 则反应结果视为阴性，即不含尿素酶，不存在幽门螺杆菌。2. 根据权利要求1所述的一种唾液快速检测幽门螺杆菌的方法，其特征在于所述的pH 试纸为pH精密试纸，检测范围：5. 5?9. 0。3. 根据权利要求1所述的一种唾液快速检测幽门螺杆菌的方法，其特征在于所述的检 测液由质量浓度12?15%的尿素溶液和95%乙醇溶液按体积比1 :1. 24组成，所述检测液 的体积是所吸取唾液的体积的2. 25±0. 02倍。4. 根据权利要求1所述的一种唾液快速检测幽门螺杆菌的方法，其特征在于用pH试纸 检测唾液和反应液的pH值时，使pH试纸被充分浸湿观察60?120秒，记录pH值。5. -种用于权...

【专利技术属性】
技术研发人员：李雄，
申请(专利权)人：李雄，
类型：发明
国别省市：广东;44