LOC401296基因及其在调控细胞周期和细胞生长中的应用制造技术

本发明专利技术公开LOC401296基因及其在调控细胞周期和细胞生长中的应用，属于基因工程技术领域。本发明专利技术发现假想基因LOC401296基因在多种细胞系广泛表达。下调该基因表达后细胞生长受到明显抑制、凋亡增加、出现了明显的G2/M期阻滞，进一步研究证明LOC401296基因参与细胞有丝分裂进程和纺锤体的形成，是一种新的细胞周期调控分子。本发明专利技术成果为后续功能研究提供奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】
LOC401296基因及其在调控细胞周期和细胞生长中的应用
本专利技术涉及一种LOC401296基因及相应的蛋白在调节细胞周期、控制细胞生长等方面的应用，属于基因工程

技术介绍
细胞周期是进行连续分裂的细胞完成一次分裂开始至下一次分裂完成时为止的一段时期，被认为是细胞完整的生命过程，是维持细胞生长、增殖的基本生物学事件。细胞周期是一个连续变化过程，根据研究的需要被人为划分为间期和分裂期，间期包括G1期、S期、G2期，分裂期指M期，另外，停止分裂的细胞被视为处于周期静止的G0期。其中，M期指染色体开始凝集浓缩、核膜崩解、遗传物质重新分配、一个母细胞分裂形成两个子细胞的一段时间，是细胞的“分娩”阶段。细胞周期过程，尤其是有丝分裂期在细胞生长、凋亡发生、肿瘤生长等生物学过程发挥重要作用，这些生物学过程受到多种基因的调控。LOC401296是大规模基因组测序中发现的一个假想基因，该基因编码全长194个氨基酸的假想蛋白，目前对该基因未有任何功能报道。我们研究发现，LOC401296基因在多种细胞系中广泛表达，采用siRNA方法下调LOC401296表达可以促使细胞发生G2/M期阻滞，引起细胞发生有丝分裂异常，诱导细胞凋亡。进一步分析发现，下调LOC401296基因表达可以引起纺锤体形成异常，抑制HeLa、A549、MCF-7等多种细胞生长。
技术实现思路
本专利技术提供一种调控细胞周期的基因：LOC401296基因。LOC401296基因或其对应mRNA或其编码的蛋白可用于调控细胞增殖和凋亡的速度、调节细胞周期、制备抗癌药物、筛选鉴定抗癌药物。本专利技术中的LOC401296基因对应的cDNA序列如SEQIDNO.1所示。所述LOC401296基因编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQIDNO.6所示。本专利技术中的“抑制剂”可以是蛋白、RNA或小分子化合物等。优选地，抑制剂是一种蛋白，更优选地，抑制剂是一种抗体，该抗体能够结合LOC401296基因编码蛋白质，从而抑制LOC401296基因和/或它对应的mRNA和/或它对应的蛋白质。优选地，抑制剂是一种RNA，可以是干扰性RNA分子，所述干扰性RNA分子可以是双链RNA，例如siRNA(shortinterferingRNA)、miRNA(microinterferingRNA)等，或者单链RNA，例如shRNA(shorthairpinRNA)，它们能通过RNA干扰作用引起LOC401296靶基因mRNA的降解(例如siRNA或miRNA的情形)或者能够形成具有这种功能的分子(例如shRNA的情形)。更优选地，抑制剂是一种siRNA，所述siRNA的两条链的核苷酸序列分别如SEQIDNO.2、SEQIDNO.3所示，或如SEQIDNO.4、SEQIDNO.5所示。本专利技术中的癌症为包括但不限于卵巢癌、胰腺癌、肺癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肺腺癌、肝癌、黑素瘤、视网膜母细胞瘤、乳腺癌、结肠癌、白血病、淋巴瘤、脑瘤、子宫颈癌、肉瘤、前列腺瘤、膀胱瘤、网状内皮组织瘤、Wilm氏瘤、星细胞瘤、成胶质细胞瘤、成神经细胞瘤、骨肉瘤、肾癌、或头颈癌。优选地，所述癌症是子宫颈癌、乳腺癌、肺癌。本专利技术提供了一种调控细胞周期的方法，是通过调控LOC401296基因的表达或其对应mRNA的表达或其编码的蛋白的表达量和活性。本专利技术还提供一种调控细胞增殖的方法，是通过调控LOC401296基因的表达或调控LOC401296基因对应mRNA的表达或调控LOC401296编码的蛋白的表达量和活性，从而调控细胞增殖。进一步，本专利技术提供了一种抑制细胞增殖的方法，其特征在于，是通过抑制剂抑制LOC401296基因的表达或其对应mRNA的表达或其编码的蛋白的表达量和活性，从而抑制细胞增殖。本专利技术还提供一种抑制细胞凋亡的方法，是通过表达或上调LOC401296基因或其对应mRNA或其编码的蛋白活性，从而抑制细胞凋亡。本专利技术还提供了一种诱导细胞凋亡的方法，是通过抑制剂抑制LOC401296基因的表达或抑制LOC401296基因对应mRNA的表达或抑制LOC401296编码的蛋白的表达量和活性。本专利技术还提供了一种鉴定、筛选抗癌药物的方法，是利用LOC401296基因或其对应mRNA或其编码的蛋白筛选能够抑制LOC401296基因或其对应mRNA或其编码的蛋白活性的物质。优选地，将将待测试剂与细胞接触，进一步检测LOC401296基因或其对应mRNA或其编码的蛋白，与对照细胞相比，LOC401296基因表达水平降低或其编码的蛋白活性降低时，指示待测试剂为抗癌或抗肿瘤药物。本专利技术还提供了一种制备抗癌药物的方法，是采用抑制剂来制备抗癌或抗肿瘤药物，该抑制剂抑制LOC401296基因或其对应mRNA或其编码的蛋白。本专利技术还提供了一种LOC401296基因和/或它对应的mRNA序列和/或它对应的蛋白质序列在抑制细胞凋亡中的应用，优选地，通过上调LOC401296基因或其对应mRNA或其编码的蛋白活性，从而抑制细胞凋亡。本专利技术还提供了一种LOC401296基因和/或它对应的mRNA序列和/或它对应的蛋白质序列在鉴定和/或筛选抗癌药物中的应用，是利用LOC401296基因或其对应mRNA或其编码的蛋白筛选能够抑制LOC401296基因或其对应mRNA或其编码的蛋白活性的物质。优选地，将将待测试剂与细胞接触，进一步检测LOC401296基因或其对应mRNA或其编码的蛋白，与对照细胞相比，LOC401296基因表达水平降低或其编码的蛋白活性降低时，指示待测试剂为抗癌或抗肿瘤药物。本专利技术还提供了一种LOC401296基因和/或它对应的mRNA序列和/或它对应的蛋白质序列在调节细胞周期中的应用，是通过调控LOC401296基因的表达或其对应mRNA的表达或其编码的蛋白的表达量和活性。本专利技术还提供了一种抑制剂在促进细胞凋亡中的应用，所述的抑制剂抑制LOC401296基因的表达或其对应mRNA的表达或其编码的蛋白的表达量和活性。本专利技术还提供了一种抑制剂在抑制细胞增殖中的应用，所述的抑制剂抑制LOC401296基因的表达或其对应mRNA的表达或其编码的蛋白的表达量和活性。本专利技术还提供了一种抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用，所述的抑制剂抑制LOC401296基因的表达或其对应mRNA的表达或其编码的蛋白的表达量和活性。本专利技术还提供了一种药物组合物，该药物组合物可以用于治疗癌症或肿瘤，该药物组合物可以用于促进细胞凋亡，抑制细胞增殖，所述的药物组合物包含一种抑制剂，该抑制剂抑制LOC401296基因或其对应mRNA或其编码的蛋白。该药物组合物还可以进一步包含其他物质，优选地，可以包含药学上可接受的载体、赋形剂，可以包含其他抗肿瘤药物、具有肿瘤靶向功能的配体等。本专利技术又提供了一种预防、治疗或缓解LOC401296基因相关疾病或病症、例如肿瘤的方法，其包括对有此需要的个体施用一种抑制剂，该抑制剂抑制LOC401296基因或其对应mRNA或其编码的蛋白。优选地，向有此需要的个体施用本专利技术的一种或多种干扰性RNA、药物组合物。本专利技术对功能未知基因LOC401296进行研究。经研究发现LOC401296基因在多种细胞系(HEK293、U937、He本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种调控细胞周期的基因，其特征在于，为LOC401296基因，所述LOC401296基因对应的cDNA序列如SEQ ID NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.一种体外调控细胞周期的方法，其特征在于，是通过调控LOC401296基因的表达，从而调控细胞周期，所述LOC401296基因对应的cDNA序列如SEQIDNO.1所示；通过抑制剂抑制LOC401296基因的表达，从而引起细胞周期阻滞；所述抑制剂为siRNA，siRNA的两条链的核苷酸序列分别如SEQIDNO.2、SEQIDNO.3所示，或如SEQIDNO.4、SEQIDNO.5所示。2.一种体外诱导细胞凋亡的方法，其特征在于，是通过抑制剂抑制LOC401296基因的表达，从而诱导细胞凋亡，所述LOC401296基因对应的cDNA序列如SEQIDNO.1所示，所述抑制剂为siRNA，siRNA的两条链的核苷酸序列分别如SEQIDNO.2、SEQIDNO.3所示，或如SEQIDNO.4、SEQIDNO.5所示。3.一种体外抑制细胞增殖的方法，其特征在于，是通过抑制剂抑制LOC401296基因的表达，从而抑制细胞增殖，所述LOC401296基因对应的cDNA序列如SEQIDNO.1所示，所述抑制剂为siRNA，siRNA的两条链的核苷酸序列分别如SEQIDNO.2、SEQIDNO.3所示，或如SEQIDNO.4、SEQIDNO.5所示。4.一种制备治疗癌症药物的方法，其特征在于，是...

【专利技术属性】
技术研发人员：王治东，沈丽萍，陈虹，张学清，周平坤，陈英，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11