本发明专利技术公开了一种主要用于中国人群的，用于检测人类红细胞ABO血型基因的引物组及试剂盒。用于ABO血型基因测定的引物组包括ABOINTRON2396G引物对，ABOINTRON2396C引物对，ABOEXON7272A引物对，ABOEXON7272T引物对，ABOEXON7429C引物对，ABOEXON7429G引物对，ABOEXON7635G引物对，ABOEXON7635A引物对，ABOEXON622A引物对，ABOEXON7688G引物对，ABOEXON7688C引物对及内参引物对。本发明专利技术的试剂盒克服了血清学方法鉴定ABO血型的种种限制、是正确判定血型不可缺少的辅助手段，具有广泛的应用前景和临床参考价值。
【技术实现步骤摘要】
用于检测人类红细胞ABO血型基因分型的引物组及试剂盒
本专利技术属于生物
，特别涉及一种用于检测人类红细胞ABO血型基因分型的试剂盒(PCR-SSP法)。
技术介绍
人类ABO基因座位于第9号染色体(9q34)，且A、B、O基因高度同源性，有7个外显子。ABO基因长度约1060bp，编码353个氨基酸。A基因和B基因编码糖基转移酶，而O基因为无效基因。B基因与A基因在cDNA序列第297、703、796和803bp这4个碱基位点存差异；0基因与A基因的区别为cDNA第26Ibp碱基G缺失。A型主要有Al与A2亚型，此外还有A3、Am和Ax等。与Al基因比较，A2基因在cDNA第467bp存在A/T替换和第1061bp碱基C缺失。O型主要有01与02亚型。与01基因比较，02基因除了第261bp碱基G缺失外，还存在第646T>A、681G>A、771C>T和829G>A等4个碱基替换。ABO基因的基因产物是糖基转移酶，这些酶控制ABO血型抗原的合成。ABO抗原的化学结构是糖蛋白，A基因表达A酶(a -3-N-D-氨基半乳糖转移酶)，能够将N-乙酰半乳糖加在H物质的岩藻糖末端上，产生A抗原特异性；Β基因表达B酶(a -3-D-半乳糖基转移酶)，能将半乳糖加在H物质糖末端产生B抗原特异性。AB型个体带有A和B两种糖基转移酶，因此红细胞上同时有A和B抗原。O型个体不具有A酶和B酶，所以红细胞表面不显示A和B抗原。血 清学方法通常靠检测红细胞表面抗原和血液中存在的抗体来鉴定ABO血型，而ABO血型的基因学分型方法则通过直接检测ABO基因对其进行分型。ABO血型系统是人类血型系统中免疫原性最强的血型系统，在输血医学以及器官、干细胞移植等临床医学中有重要作用。血清学技术鉴定ABO血型系统只能鉴定表型，在鉴定异常表达的个体和作遗传学分析时受到局限。ABO血型基因分型技术在输血医学中可结合血清学诊断结果应用于临床，ABO基因分型结果可作为遗传标记物应用于干细胞移植后嵌合体检测及亚型的家系研究。此外，ABO血型基因分型技术不受检材限制，羊水、毛发等包含有核细胞的物质都可作为检材，使其在胎儿和新生儿血型鉴定方面有潜在而广泛的应用价值。当患者由于疾病或衰老，ABO基因产物表达降低，造成Α，B抗原表达减弱时，基因分型技术因其不受表达影响的优势成为ABO血型准确定型的首选。不受血清中自身抗体、不规则抗体的影响，ABO血型基因分型技术克服了血清学方法的种种限制，是正确判定血型不可缺少的辅助手段，具有广泛的应用前景和临床参考价值。
技术实现思路
本专利技术的目的是:克服现有技术中的不足，提供一种适合中国人群的用于检测人类红细胞ABO血型基因的引物组。本专利技术的第二个目的是提供一种适合中国人群的具有灵敏、特异、经济、简便、快速的用于检测人类红细胞ABO血型基因的试剂盒。一种适合中国人群的用于检测人类红细胞ABO血型基因的引物组，其特征是包括ABO INTR0N2 396G 引物对，ABO INTR0N2 396C 引物对，ABO EX0N7 272A 引物对，ABO EX0N7272T 引物对，ABO EX0N7 429C 引物对，ABO EX0N7 429G 引物对，ABO EX0N7 635G 引物对，ABOEX0N7 635A 引物对，ABO EX0N6 22A 引物对，ABO EX0N7 688G 引物对，ABO EX0N7 688C 引物对及内参引物对； 所述 ABO INTR0N2 396G 位于 Intron2 520-537 和 Intron2 347-369 的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.1、SEQ ID N0.2所示的核苷酸序列； 所述 ABO INTR0N2 396C 位于 Intron2 520-537 和 Intron2 347-369 的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.1、SEQ ID N0.3所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 272A位于EX0N7455-472和EX0N7 253-272的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.4、SEQ ID N0.5所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 272T位于EX0N7455-472和EX0N7 253-272的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.4、SEQ ID N0.6所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 429C位于EX0N7 202-221和EX0N7 429-446的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.7、SEQ ID N0.8所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 429G位于EX0N7 202-221和EX0N7 429-446的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.7、SEQ ID N0.9所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 635G位于EX0N7 500-517和EX0N7 635-654的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.10、SEQ ID N0.11所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 635A位于EX0N7 500-517和EX0N7 635-654的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.10、SEQ ID N0.12所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N6 22A位于EX0N6 1_22和INTR0N6 124-146的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.13、SEQ ID N0.14所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 688G位于3’ NCR 97-119和EX0N7 671-688的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.15、SEQ ID N0.16所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 688C位于3’ NCR 97-119和EX0N7 671-688的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.15、SEQ ID N0.17所示的核苷酸序列。一种适合中国人群的用于检测人类红细胞ABO血型基因的试剂盒，其特征是包括包被有 ABO INTR0N2 396G 引物对，ABO INTR0N2 396C 引物对，ABO EX0N7 272A 引物对，ABOEX0N7 272T 引物对，ABO EX0N7 429C 引物对，ABO EX0N7 429G 引物对，ABO EX0N7 635G 引物对，ABO EX0N7 635A 引物对，ABO EX0N6 22A 引物对，ABO EX0N7 688G 引物对，ABO EX0N7 688C引物对及内参引物对的引物板和浓缩dNTP-Buffer ； 所述 ABO INTR0N2 396G位于 Intron2 520-537 和 Intron2 347-369 的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.1、SEQ ID N0.2所示的核苷酸序列； 所述 ABO INTR0N2 396C 位于 Intron2 520-537 和 Intron2本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于检测人类红细胞ABO血型基因的引物组，其特征是包括ABO INTRON2 396G引物对，ABO INTRON2 396C引物对，ABO EXON7 272A引物对，ABO EXON7 272T引物对，ABO EXON7 429C引物对，ABO EXON7 429G引物对，ABO EXON7 635G引物对，ABO EXON7 635A引物对，ABO EXON6 22A引物对，ABO EXON7 688G引物对，ABO EXON7 688C引物对及内参引物对；所述ABO INTRON2 396G位于Intron2 520‑537和Intron2 347‑369的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列；所述ABO INTRON2 396C位于Intron2 520‑537和Intron2 347‑369的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列；所述ABO EXON7 272A位于EXON7455‑472和EXON7 253‑272的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5所示的核苷酸序列；所述ABO EXON7 272T位于EXON7455‑472和EXON7 253‑272的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列；所述ABO EXON7 429C位于EXON7 202‑221和EXON7 429‑446的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8所示的核苷酸序列；所述ABO EXON7 429G 位于EXON7 202‑221和EXON7 429‑446的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.9所示的核苷酸序列；所述ABO EXON7 635G位于EXON7 500‑517和EXON7 635‑654的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.11所示的核苷酸序列；所述ABO EXON7 635A位于EXON7 500‑517和EXON7 635‑654的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.12所示的核苷酸序列；所述ABO EXON6 22A位于EXON6 1‑22和INTRON6 124‑146的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14所示的核苷酸序列；所述ABO EXON7 688G位于3’NCR 97‑119和EXON7 671‑688的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.16所示的核苷酸序列；所述ABO EXON7 688C位于3’NCR 97‑119和EXON7 671‑688的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.17所示的核苷酸序列。...
【技术特征摘要】
1.一种用于检测人类红细胞ABO血型基因的引物组，其特征是包括ABO INTR0N2 396G引物对，ABO INTR0N2 396C 引物对，ABO EX0N7 272A 引物对，ABO EX0N7 272T 引物对，ABOEX0N7 429C 引物对，ABO EX0N7 429G 引物对，ABO EX0N7 635G 引物对，ABO EX0N7 635A 引物对，ABO EX0N6 22A引物对，ABO EX0N7 688G引物对，ABO EX0N7 688C引物对及内参引物对； 所述 ABO INTR0N2 396G 位于 Intron2 520-537 和 Intron2 347-369 的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.1、SEQ ID N0.2所示的核苷酸序列；所述 ABO INTR0N2 396C 位于 Intron2 520-537 和 Intron2 347-369 的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.1、SEQ ID N0.3所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 272A位于EX0N7455-472和EX0N7 253-272的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.4、SEQ ID N0.5所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 272T位于EX0N7455-472和EX0N7 253-272的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.4、SEQ ID N0.6所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 429C位于EX0N7 202-221和EX0N7 429-446的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.7、SEQ ID N0.8所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 429G位于EX0N7 202-221和EX0N7 429-446的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.7、SEQ ID N0.9所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 635G位于EX0N7 500-517和EX0N7 635-654的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.10、SEQ ID N0.11所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 635A位于EX0N7 500-517和EX0N7 635-654的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.10、SEQ ID N0.12所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N6 22A位于EX0N6 1_22和INTR0N6 124-146的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.13、SEQ ID N0.14所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 688G位于3’ NCR 97-119和EX0N7 671-688的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.15、SEQ ID N0.16所示的核苷酸序列； 所述ABO EX0N7 688C位于3’ NCR 97-119和EX0N7 671-688的引物对的上、下游引物分别是序列表中SEQ ID N0.15、SEQ ID N0.17所示的核苷酸序列。2.一种用于检测人类红细胞...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵卫军，李劲松，马静，
申请(专利权)人：天津市秀鹏生物技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12
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