用于降低非特异性扩增的方法和试剂技术

本发明专利技术提供了用于核酸扩增的方法和试剂。与使用未经修饰的寡核苷酸进行的扩增相比较，使用含有N2-苄基-dG核苷酸的探针寡核苷酸进行的扩增和检测可以导致更少的涉及探针的非特异性扩增，可能这是由于在模板中大量N2-苄基-dG小沟结合剂的存在防止通过DNA聚合酶的互补链的延伸。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于降低非特异性扩增的方法和试剂专利
本专利技术涉及分子生物学和核酸化学领域。更具体而言，它涉及用于改进核酸扩增反应的可靠性的方法和试剂。专利技术背景 聚合酶链反应(PCR)的专利技术使得核酸序列的体外扩增成为可能。PCR在美国专利号 4，683，195 ;4，683，202 ；和 4，965，188 ；Saiki 等人，1985，Science 230:1350-1354 ；Mullis 等人，1986, Cold Springs Harbor Symp.Quant.Biol.51:263-273 ;以及 Mullis 和Faloona, 1987，Methods Enzymo1.155:335-350中描述。PCR的开发和应用在文献中广泛描述。例如，一系列 PCR相关主题在 PCR Technology - principles and applications for DNAamplification, 1989, (H.A.Erlich编辑)Stockton Press, New York ；PCR Protocols: A guideto methods and ap本文档来自技高网...

【技术保护点】
在采用以模板依赖性方式的引物延伸的测定中，防止与模板核苷酸序列杂交的引物寡核苷酸通过DNA聚合酶延伸的方法，其包括将小沟结合剂掺入所述模板核苷酸序列上，并且其中所述引物寡核苷酸不能被延伸超出N2‑苄基‑dG核苷酸位置多于2个核苷酸。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.12.22 US 61/5793171.在采用以模板依赖性方式的引物延伸的测定中，防止与模板核苷酸序列杂交的引物寡核苷酸通过DNA聚合酶延伸的方法，其包括将小沟结合剂掺入所述模板核苷酸序列上，并且其中所述引物寡核苷酸不能被延伸超出N2-苄基-dG核苷酸位置多于2个核苷酸。2.权利要求1的方法，其中所述小沟结合剂是经修饰的核苷酸。3.权利要求3的方法，其中所述经修饰的核苷酸是N2-苄基-脱氧鸟苷(N2-苄基-dG)。4.权利要求1的方法，其中所述测定选自PCR扩增、DNA测序和基因分型。5.权利要求4的方法，其中所述测定是PCR扩增。6.降低或防止在扩增反应过程中核酸的非特异性扩增的方法，其包括提供能够扩增靶核酸序列的至少一对引物寡核苷酸；和提供掺入小沟结合剂的探针寡核苷酸，当所述引物寡核苷酸与所述探针寡核苷酸杂交时，所述小沟结合剂阻断所述引物寡核苷酸通过DNA聚合酶延伸超出经修饰的核...

【专利技术属性】
技术研发人员：V博德普迪，NJ舍恩布伦纳，S威尔，
申请(专利权)人：霍夫曼拉罗奇有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士;CH