C.BESCII耐热酶制造技术

技术编号:10366887 阅读:185 留言:0更新日期:2014-08-28 10:51
本发明专利技术提供从Caldicellulosiruptor bescii中分离出来的耐热酶及其片段,用于降解纤维素和/或半纤维素,该耐热酶包括耐热纤维素酶和半纤维素酶。本发明专利技术进一步提供编码本发明专利技术的耐热酶的核酸。本发明专利技术也提供用本发明专利技术的耐热酶将纤维素和半纤维素转化成可发酵的糖的方法。本发明专利技术还提供含有在此公布的多种酶的酶合剂。该酶可用于释放存在于纤维素或半纤维素中的糖,用于随后的发酵,以生产增值产物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】C.BESCI I耐热酶相关申请的交叉引用本申请要求2010年12月21提交的美国临时申请61/425,623和2011年9月7日提交的美国临时申请61/532,060的优先权,其内容在此予以全文引用。
本专利技术涉及用于降解纤维素,半纤维素,及含纤维素和/或半纤维素的材料的组合物和方法。特别地,本公布提供用于降解纤维素的耐热酶,编码该酶的核酸,及其使用方法。本公布也提供用于降解 半纤维素的耐热酶,编码该酶的核酸,及其使用方法。本专利技术进一步提供提高耐热纤维素酶和/或半纤维素酶的活性的耐热酶,编码该酶的核酸,及其使用方法。在ASCII文本文件上提交的序列表在此,以全文引用的方式结合ASCII文本文件上提交的内容:计算机可读形式(CRF)序列表(文件名:658012000940SeqListing.txt,记录日期:2011 年 12 月 7 日,大小:513KB)。
技术介绍
目前,用于使糖发酵成生物燃料比如乙醇的微生物不能利用复杂的多糖,比如纤维素和半纤维素。结果,木素纤维材料转化成生物燃料存在重大瓶颈。纤维素,植物的主要成分和地球上最丰富的有机化合物之一,是由β (1-本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种宿主细胞,其特征在于,包括选自核苷酸序列SEQ ID NOs:4,8,14,20,28,34和38的两种或更多种重组核酸。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.12.21 US 61/425,623;2011.09.07 US 61/532,0601.一种宿主细胞,其特征在于,包括选自核苷酸序列SEQ ID NOs: 4,8,14,20,28,34和38的两种或更多种重组核酸。2.根据权利要求1所述的宿主细胞,其特征在于,包括选自核苷酸序列SEQIDNOs: 4, 8,14,20,28,34和38的三种重组核酸。3.根据权利要求1所述的宿主细胞,其特征在于,包括选自核苷酸序列SEQIDNOs: 4, 8,14,20,28,34和38的四种重组核酸。4.根据权利要求1所述的宿主细胞,其特征在于,包括选自核苷酸序列SEQIDNOs: 4, 8,14,20,28,34和38的五种重组核酸。5.根据权利要求1所述的宿主细胞,其特征在于,包括选自核苷酸序列SEQIDNOs: 4, 8,14,20,28,34和38的六种重组核酸。6.一种宿主细胞,包括选自以下各项的两种或更多种重组核酸:a)编码多肽SEQ IDNO: 3 [Caldicellulosiruptor bescii 内切木聚糖酶(Cbl93)]的核酸;b)编码多妝 SEQ IDNO: 7 [Caldicellulosiruptor bescii 内切木聚糖酶(Cbl95)]的核酸;c)编码多妝 SEQ IDNO: 13 [Caldicellulosiruptor bescii α-阿拉伯呋喃糖酶(Cbll72)]的核酸;d)编码多妝SEQ ID NO: 19 [Caldicellulosiruptor bescii α -葡萄糖醒酸酶(Cb909)]的核酸;e)编码多妝 SEQ ID NO: 27 [Caldicellulosiruptor bescii β -木糖苷酶(Cb2487)]的核酸;f)编码多妝 SEQ ID NO: 33 [Caldicellulosiruptor bescii 乙酸木聚糖酯酶(Cbl62)]的核酸;以及g)编码多肽SEQ ID N0:37[缺失信号肽的Caldicellulosiruptor bescii内切木聚糖酶(Cb 193)]的核酸。7.用于生产至少两 种酶的方法,所述至少两种酶选自:内切木聚糖酶、α-阿拉伯呋喃糖酶、α-葡萄糖醛酸酶、β_木糖苷酶、和乙酰木聚糖酯酶,包括在合适的条件下,在培养基中培养权利要求1-6中任何一项所述的宿主细胞,以生产内切木聚糖酶、α -阿拉伯呋喃糖酶、α-葡萄糖醛酸酶、β -木糖苷酶、和乙酰木聚糖酯酶。8.根据权利要求1-6中的任何一项所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞进一步包括一种或更多种重组核酸,其中所述重组核酸编码选自Cbl952、Cbl953、Cbl954、Cbl946、Cb629和Cb486多肽中的一种或更多种多肽。9.根据权利要求8所述的宿主细胞,其特征在于,包括两种或更多种重组核酸,其中所述重组核酸编码两种或更多种所述多肽。10.根据权利要求8所述的宿主细胞,其特征在于,包括三种或更多种重组核酸,其中所述重组核酸编码三种或更多种所述多肽。11.根据权利要求8所述的宿主细胞,其特征在于,包括四种或更多种重组核酸,其中所述重组核酸编码四种或更多种所述多肽。12.根据权利要求8所述的宿主细胞,其特征在于,包括五种或更多种重组核酸,其中所述重组核酸编码五种或更多种所述多肽。13.根据权利要求8所述的宿主细胞,其特征在于,包括六种或更多种重组核酸,其中所述重组核酸编码六种所述多肽。14.根据权利要求8-13中任何一项所述的宿主细胞,其特征在于,其中Cbl952多肽具有选自 SEQ ID NOs: 44、114、124、126、128 和 46 中的序列; 其中Cbl953多肽具有选自SEQ IDN0s:60、61和111中的序列;其中Cbl954多肽具有选自SEQ ID NOs: 74、121和76中的序列; 其中Cb 1946多肽具有选自SEQ ID NOs:86,87 113中的序列; 其中Cb629多肽具有选自SEQ ID NOs:98,119 100中的序列;并且 其中Cb486多肽具有SEQ ID NO: 106序列。15.根据权利要求14所述的宿主细胞,其特征在于, 其中Cb 1952多肽具有SEQ ID NO:46序列; 其中Cbl953多肽具有SEQ ID NO: 111序列; 其中Cb 1954多肽具有SEQ ID NO:76序列; 其中Cb 19 46多肽具有SEQ ID NO: 113序列; 其中Cb629多肽具有SEQ ID NO: 100序列;并且 其中Cb486多肽具有SEQ ID NO: 106序列。16.根据权利要求8-13中任何一项所述的宿主细胞,其特征在于, 其中编码Cbl952多肽的重组核酸具有选自SEQ ID NOs:45, 115,125,127,129和47的序列; 其中编码Cbl953多肽的重组核酸具有选自SEQ ID N0s:62、63和110的序列; 其中编码Cbl954多肽的重组核酸具有选自SEQ ID NOs: 116,75和77的序列; 其中编码Cbl946多肽的重组核酸具有选自SEQ ID NOs:88,89和112的序列; 其中编码Cb629多肽的重组核酸具有选自SEQ ID NOs: 99、120和101的序列;以及 其中编码Cb486多肽的重组核酸具有SEQ ID NO: 107序列。17.根据权利要求16所述的宿主细胞,其特征在于, 其中所述编码Cbl952多肽的重组核酸具有SEQ ID NO:47序列; 其中所述编码Cbl953多肽的重组核酸具有SEQ ID NO: 110序列; 其中所述编码Cbl954多肽的重组核酸具有SEQ ID NO:77序列; 其中所述编码Cbl946多肽的重组核酸具有SEQ ID NO: 112序列; 其中所述编码Cb629多肽的重组核酸具有SEQ ID NO: 101序列;以及 其中所述编码Cb486多肽的重组核酸具有SEQ ID NO: 107序列。18.根据权利要求1-6中任何一项所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞进一步包括具有SEQ IDN0s:47、110、77、112、101和107序列的6种重组核酸。19.根据权利要求1-6中任何一项所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞进一步包括编码一种或两种多肽的一种或两种重组核酸,所述一种或两种多肽具有选自SEQ IDN0s:46、lll、76、113、124、126、128 和 100 的序列。20.一种包括一种或两种重组核酸的宿主细胞,其特征在于,所述重组核酸编码选自Cbl952、Cbl953、Cbl954、Cbl946、Cb629 和 Cb486 多肽中的一种或更多种多肽。21.根据权利要求20所述的宿主细胞,其特征在于,包括两种或更多种重组核酸,其中所述重组核酸编码两种或更多种所述多肽。22.根据权利要求20所述的宿主细胞,其特征在于,包括三种或更多种重组核酸,其中所述重组核酸编码三种或更多种所述多肽。23.根据权利要求20所述的宿主细胞,其特征在于,包括四种或更多种重组核酸,其中所述重组核酸编码四种或更多种所述多肽。24.根据权利要求20所述的宿主细胞,其特征在于,包括五种或更多种重组核酸,其中所述重组核酸编码五种或更多种所述多肽。25.根据权利要求20所述的宿主细胞,其特征在于,包括六种或更多种重组核酸,其中所述重组核酸编码六种所述多肽。26.根据权利要求20-25所述的宿主细胞,其特征在于, 其中Cbl952多肽具有选自SEQ ID NOs:44、114、124、126、128和46中的序列; 其中Cbl953多肽具有选自SEQ ID N0s:60、61和111中的序列; 其中Cbl954多肽具有选自SEQ ID NOs: 74、121和76中的序列; 其中Cb 1946多肽具有选自SEQ ID NOs:86,87 113中的序列; 其中Cb629多肽具有选自SE Q ID NOs:98,119 100中的序列;并且 其中Cb486多肽具有SEQ ID NO: 106序列。27.根据权利要求26所述的宿主细胞,其特征在于, 其中Cb 1952多肽具有SEQ ID NO:46序列; 其中Cbl953多肽具有SEQ ID NO: 111序列; 其中Cb 1954多肽具有SEQ ID NO:76序列; 其中Cb 1946多肽具有SEQ ID NO: 113序列; 其中Cb629多肽具有SEQ ID NO: 100序列;并且 其中Cb486多肽具有SEQ ID NO: 106序列。28.根据权利要求20-25中任何一项所述的宿主细胞,其特征在于, 其中编码Cbl952多肽的重组核酸具有选自SEQ ID NOs:45, 115,125,127,129和47的序列; 其中编码Cbl953多肽的重组核酸具有选自SEQ ID N0s:62、63和110的序列; 其中编码Cbl954多肽的重组核酸具有选自SEQ ID NOs: 116,75和77的序列; 其中编码Cbl946多肽的重组核酸具有选自SEQ ID NOs:88,89和112的序列; 其中编码Cb629多肽的重组核酸具有选自SEQ ID NOs: 99、120和101的序列;以及 其中编码Cb486多肽的重组核酸具有SEQ ID NO: 107序列。29.根据权利要求28所述的宿主细胞,其特征在于, 其中所述编码Cbl952多肽的重组核酸具有SEQ ID NO:47序列; 其中所述编码Cbl953多肽的重组核酸具有SEQ ID NO: 110序列; 其中所述编码Cbl954多肽的重组核酸具有SEQ ID NO:77序列; 其中所述编码Cbl946多肽的重组核酸具有SEQ ID NO: 112序列; 其中所述编码Cb629多肽的重组核酸具有SEQ ID NO: 101序列;以及 其中所述编码Cb486多肽的重组核酸具有SEQ ID NO: 107序列。30.一种宿主细胞,包括6种重组核酸,其特征在于,其中所述核酸具有SEQ ID NOs: 47、110、77、112、101 和 107 序列。31.一种宿主细胞,包括一种或更多种重组核酸,其特征在于,所述核酸编码一种或两种多肽,所述一种或两种多肽具有选自SEQ ID N0s:46、lll、76、113、124、126、128和100的序列。32.根据权利要求20-31中的任何一项所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞进一步包括选自SEQ IDN0s:4、8、14、20、28、34和38核苷酸序列中的两种或更多种重组核酸。33.根据权利要求32所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞包括三种重组核酸,该三种重组核酸选自SEQ IDN0s:4、8、14、20、28、34和38核苷酸序列。34.根据权利要求32所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞包括四种重组核酸,该四种重组核酸选自SEQ IDN0s:4、8、14、20、28、34和38核苷酸序列。35.根据权利要 求32所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞包括五种重组核酸,该五种重组核酸选自SEQ IDN0s:4、8、14、20、28、34和38核苷酸序列。36.根据权利要求32所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞包括六种重组核酸,该六种重组核酸选自SEQ IDN0s:4、8、14、20、28、34和38核苷酸序列。37.根据权利要求20-31中的任何一项所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞进一步包括选自以下核酸中的两种或更多种重组核酸:a)编码多肽SEQ IDNO: 3 [Caldicellulosiruptor besc...

【专利技术属性】
技术研发人员:韩业君文永焕苏小运吉田章介宫城笃志迪伦·多德罗德里克·I·麦克凯艾萨克·KO·坎恩
申请(专利权)人:伊利诺伊大学董事会
类型:发明
国别省市:美国;US

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