【技术实现步骤摘要】
一种肿瘤特异抗原表位多肽负载的树突状细胞疫苗制备方法及其试剂盒
本专利技术涉及制备肿瘤特异抗原表位多肽负载的树突状细胞疫苗的方法、使用所述方法的试剂盒、以及通过所述方法获得的树突细胞和疫苗。特别地,本专利技术涉及采用鉴定的肿瘤特异表达的上皮细胞粘附分子的人白细胞抗原A201阳性表位多肽,负载树突状细胞的制备方法、使用所述方法的试剂盒、以及通过所述方法获得的树突细胞疫苗。
技术介绍
目前,恶性肿瘤是威胁人类健康最主要的疾病之一,全世界现有癌症病人2200万,每年新增病例1000万。中国每年新发癌症280万,并且癌症发病数以年均3%-5%的速度递增。现有技术即常规治疗手段手术、化疗和放疗等可以去除或杀死机体大部分恶性肿瘤,但还存在一些残余的肿瘤细胞或产生耐药的肿瘤细胞成为癌症复发和转移的“元凶”,使得患者不能得到较长的生存期以及预后不佳。随着分子生物学和细胞生物学的发展,临床治疗癌症的技术也不断呈现并发挥着很好效果,其中细胞免疫治疗癌症得到很好的发展,应用患者自体免疫细胞临床治疗各类实体肿瘤和血液肿瘤取得良好的疗效,能有效清除患者机体内残余肿瘤细胞,抑制肿瘤的复发和转 ...
【技术保护点】
一种肿瘤特异抗原表位多肽负载的树突状细胞疫苗制备方法,其特征在于,所述方法包括采用鉴定的肿瘤特异表达的上皮细胞粘附分子的人白细胞抗原A201阳性表位多肽,即SEQ?ID?NO.1?6中任一项所示的氨基酸序列组成的多肽,负载树突状细胞,可引发特异性的靶向抗肿瘤的细胞毒性T淋巴细胞反应。
【技术特征摘要】
1.一种肿瘤特异抗原表位多肽负载的树突状细胞疫苗制备方法,其特征在于,所述方法包括采用鉴定的肿瘤特异表达的上皮细胞粘附分子的人白细胞抗原A201阳性表位多肽,即SEQIDNO.1-6中三项以上所示的氨基酸序列组成的多肽,负载树突状细胞,可引发特异性的靶向抗肿瘤的细胞毒性T淋巴细胞反应;所述树突状细胞通过以下方法获取:通过血细胞分离机单采肿瘤患者2-4升外周血并经淋巴细胞分离液纯化得到单个核细胞;细胞计数仪计数后单个核细胞用AIM-V培养基稀释到3-5×106,加入75cm2培养瓶中贴壁;在37℃、5%CO2培养箱中孵育90min后,未贴壁细胞洗涤收集下来,用于激活毒性T淋巴细胞之用;贴壁细胞加入完全AIM-V培养基诱导培养,含有5%的自体血清、1000IU/mL重组人粒细胞巨噬集落刺激因子和500IU/mL重组人干扰素α;培养到第四天收获未成熟树突状细胞(DCs);成熟DCs采用完全AIM-V培养基再诱导到第五天得到,含5%的自体血清、1000IU/mL重组人粒细胞巨噬集落刺激因子和500...
【专利技术属性】
技术研发人员:金光瑞,王琳,
申请(专利权)人:甘肃中科生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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