乳腺癌特异抗原表位多肽负载的树突状细胞疫苗制备及其试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了乳腺癌特异抗原表位多肽负载的树突状细胞疫苗制备方法，其中，所述方法包括采用鉴定的乳腺癌特异表达的人类表皮生长因子受体2、乳腺癌耐药蛋白和IQ基序与Sec7结构域1蛋白的人白细胞抗原A201阳性表位多肽，即SEQ ID NO.1-6中任一项所示的氨基酸序列组成的多肽，并由SEQ ID NO.1-6中一项以上多肽负载树突状细胞，制备成树突状细胞疫苗，可引发很强的靶向乳腺癌的细胞毒性T淋巴细胞反应。本发明专利技术还提供了制备所述乳腺癌特异抗原表位多肽负载的树突状细胞疫苗的试剂盒。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及制备乳腺癌特异抗原表位多肽负载的树突状细胞疫苗的方法、使用所述方法的试剂盒、以及通过所述方法获得的树突细胞和疫苗。特别地，本专利技术涉及采用鉴定的乳腺癌特异表达的人类表皮生长因子受体2、乳腺癌耐药蛋白和IQ基序与Sec7结构域1蛋白的人白细胞抗原A201阳性表位多肽，负载树突状细胞的制备方法、使用所述方法的试剂盒、以及通过所述方法获得的树突细胞疫苗。
技术介绍
目前，乳腺癌是威胁女性健康最主要的疾病之一，中国是乳腺癌发病率增长速度最快的国家之一，约有47万患者，现在乳腺癌发病率正以每年3％的速度递增，已成为城市女性的第一杀手。现有技术即常规治疗手段手术、化疗和放疗等可以去除或杀死机体大部分乳腺癌，但还存在一些残余的乳腺癌细胞或产生耐药的乳腺癌细胞成为癌症复发和转移的“元凶”，使得患者不能得到较长的生存期以及预后不佳。随着分子生物学和细胞生物学的发展，临床治疗癌症的技术也不断呈现并发挥着很好效果，其中细胞免疫治疗癌症得到很好的发展，应用患者自体免疫细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种乳腺癌特异抗原表位多肽负载的树突状细胞疫苗的制备方法，其特征在于，所述方法包括采用鉴定的乳腺癌特异表达的人类表皮生长因子受体2、乳腺癌耐药蛋白和IQ基序与Sec7结构域1蛋白的人白细胞抗原A201阳性表位多肽，即SEQ ID NO.1‑6中任一项所示的氨基酸序列组成的多肽，负载树突状细胞，可引发特异性的靶向乳腺癌的细胞毒性T淋巴细胞反应。

【技术特征摘要】
1.一种乳腺癌特异抗原表位多肽负载的树突状细胞疫苗的制备方法，其特
征在于，所述方法包括采用鉴定的乳腺癌特异表达的人类表皮生长因子受体2、
乳腺癌耐药蛋白和IQ基序与Sec7结构域1蛋白的人白细胞抗原A201阳性表
位多肽，即SEQ ID NO.1-6中任一项所示的氨基酸序列组成的多肽，负载树突
状细胞，可引发特异性的靶向乳腺癌的细胞毒性T淋巴细胞反应。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述树突状细胞疫苗为
由SEQ ID NO.1-6中人类表皮生长因子受体2、乳腺癌耐药蛋白和IQ基序与
Sec7结构域1蛋白中任一项以上抗原表位多肽负载的树突状细胞。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述树突状细胞疫苗，
优选地由SEQ ID NO.1-6中人类表皮生长因子受体2、乳腺癌耐药蛋白和IQ基
序与Sec7结构域1蛋白三项抗原表位多肽组成的多肽组合物负载。
4.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述树突状细胞通
过以下方法获取：
取100mL外周血经Ficoll-Hypaque密度梯度离心，得到单个核细胞；外周
血单个核细胞用RPMI1640培养基重悬，并加入6孔板中贴壁；
在37℃、5％CO2培养箱中孵育90min后，未贴壁细胞洗涤收集下来，用于
诱导CIK细胞；贴壁细胞加入完全培养基RPMI1640诱导培养，含有5％的自
体血清、2000IU／mL重组人粒细胞巨噬集落刺激因子和1500IU／mL IL-4；
在培养到第三天时细胞更换新鲜培养基；
培养到第五天收获未成熟树突状细胞(DC...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈丽，黄启明，郝丽敏，
申请(专利权)人：北京弘润源生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11