预防和治疗猪的继发感染的呼吸系统疾病的抗原组合物及其制备方法和应用技术方案

本发明专利技术提供了预防和治疗猪的继发感染的呼吸系统疾病的抗原组合物，其中，该抗原组合物包含至少一种免疫量的猪繁殖与呼吸综合征抗原和至少一种免疫量的副猪嗜血杆菌抗原以及佐剂，该猪繁殖与呼吸综合征抗原和副猪嗜血杆菌抗原各自独立地包括减毒活全抗原、灭活的全抗原、亚单位抗原、重组活载体抗原和DNA载体的抗原；该抗原组合物不仅不会产生两种抗原成份的相互免疫干扰或影响，而且猪繁殖与呼吸综合征和副猪嗜血杆菌抗原有相互增强免疫效果的作用，且该抗原组合物接种程序简便，安全性好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种预防和治疗副猪嗜血杆菌病与猪繁殖与呼吸综合征的疫苗组合物及其制备方法，属于兽用疫苗领域。 
技术介绍
猪繁殖与呼吸综合征（Porcine Reproductive and RespiratorySyndrome，PRRS），又称猪蓝耳病，是由单股正链RNA猪繁殖和呼吸障碍综合征病毒引起，以妊娠母猪的繁殖障碍（流产、死胎、木乃伊胎）及各种年龄猪特别是仔猪的呼吸道疾病为特征，现已经成为规模化猪场的主要疫病之一。2006年我国部分地区爆发的高致病性猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸障碍综合征（俗称蓝耳病）病毒变异株引起的一种急性高致死性疫病，属于国家二类动物疫病。该病在我国出现新的流行特点，病毒发生变异，致病力增强，在部分地区出现大规模爆发流行。临床以高热、皮肤发绀、眼结膜炎、呼吸系统症状、神经症状及死亡为主，解剖后可见肺脏呈间质性肺炎，淋巴结肿大并伴有出血充血，表现为发病快、症状严重、病变明显，死亡率高，短时间内母猪大量流产，给我国养猪业带来了巨大的经济损失。直至今日，疫病形势依然严峻，同其他病毒性疾病一样，目前尚无有效的治疗性药物用于繁殖与呼吸综合征的治疗，疫苗免疫接种是防制该病的最有效方法。 副猪嗜血杆菌病是副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)引起的猪的多发性浆膜炎和关节炎,该病又称为猪革拉泽氏病(Glasser’sDisease)。副猪嗜血杆菌可以影响从2周龄到4月龄的青年猪,主要在断奶后和保育阶段发病,通常见于5～8周龄的猪,发病率可达40%,死亡率可达50%。主要临床症状表现为咳嗽、呼吸困难、消瘦、跛行和 被毛粗乱;剖检可见纤维素性胸膜炎、心包炎、关节炎和脑膜炎，也可见腹腔器官表面出现纤维素性渗出物，导致肠道之间粘连等。此外,副猪嗜血杆菌还可引起败血症,并且在急性感染后可能留下后遗症,即母猪流产、公猪慢性跛行。在大量分离副猪嗜血杆菌的基础上,发现该菌的血清型复杂多样,按Kieletein-Rapp-Gabriedson(KRG)琼脂扩散血清分型方法,至少可将副猪嗜血杆菌分为15个血清型;根据我国血清流行病学调查和分离菌株的鉴定，以4、5型最为流行。近年来，由于我国目前饲养技术的调整进行不当,以及突发新的呼吸道综合征,使得该病日趋流行,危害日渐严重。 根据近几年猪场流行病学研究结果显示，呼吸系统疾病越来越多，临床上表现为呼吸道症状，主要特征是发热、生长迟缓、食欲降低、呼吸困难，死亡猪四肢、耳朵发紫；母猪流产前体温升高，厌食，尤其第一胎的母猪更为常见。死亡猪剖检呈现心包炎、胸膜炎、腹膜炎和关节炎，肺部炎症，淋巴结出血、肿大。从发病猪中分离出最常见的病原体是猪繁殖与呼吸综合征病毒和副猪嗜血杆菌，然而，本专利技术人在一项重现表现上述症状的呼吸系统疾病时发现，当猪群中只感染副猪嗜血杆菌，并不会引发疾病，只有当猪群中存在繁殖与呼吸综合征的情况下，才会引发上述症状的呼吸系统疾病。表明这些症状的病猪是由这两种病原体协同作用引起，并且，一旦继发感染副猪嗜血杆菌引发疾病，各种抗菌药物均难以奏效。 近年来，人们发现猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的猪易继发感染其他病原，特别是侵害呼吸系统的病原体，临床上最常见的是多杀性巴氏杆菌、肺炎支原体、链球菌、副猪嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、波氏杆菌和沙门氏菌等，造成猪群高发病率与高死亡率。杨汉春（“猪免疫抑制性疾病的流行特点与控制对策”，中国畜牧兽医，2004，31（5）：41-43）、万遂如（“防控猪免疫抑制的主要技术措施”，养猪，2009，1：42-46）等研究发现蓝耳病病毒在猪体内的持续性感染还可导致猪瘟疫苗的体液免疫受到明显的抑制，影响猪瘟弱毒疫苗的免疫效果，因此认为猪繁殖与呼吸综合征是一种免疫抑制性疾病。 目前市场没有出现副猪嗜血杆菌病和蓝耳病的组合疫苗，以及二者的同时联合使用，这是因为存在副猪嗜血杆菌灭活疫苗会对蓝耳病活疫苗免疫效果产生影响，可能的原因有：一是灭活疫苗使用的油性佐剂粘度太大不能作为稀释剂稀释活疫苗；二是灭活疫苗部分所含的有毒成分：灭活剂如甲醛；防腐剂如硫柳汞、叠氮钠；毒素如大量内毒素、培养过程代谢物及杂蛋白等对活疫苗毒价影响显著而使活疫苗效力下降。而且市售商品疫苗需多次免疫，成本较高，对猪只的应激较大。 
技术实现思路
本专利技术所要解决的问题为提供一种能够预防和治疗猪的继发感染的呼吸系统疾病的抗原组合物，所述抗原组合物包括至少一种免疫量的猪繁殖与呼吸综合征抗原和至少一种免疫量的副猪嗜血杆菌抗原，所述猪繁殖与呼吸综合征抗原和副猪嗜血杆菌抗原各自独立地包含减毒活全抗原、灭活的全抗原、亚单位抗原、重组活载体抗原和DNA载体的抗原。所述呼吸系统疾病主要特征是发热、生长迟缓、食欲降低、呼吸困难，死亡猪四肢、耳朵发紫。死亡猪剖检呈现心包炎、胸膜炎、腹膜炎和关节炎。应该理解，对于给定组合，不一定使用相同形式。此外，正如人们所已知的，抗原制品可包含兽医学上可接受的载体或赋形剂，并可选择包含兽医学上可接受的佐剂。 本专利技术所要解决的另一个问题为提供一种能同时预防和治疗猪繁殖与呼吸综合征和副猪嗜血杆菌病的疫苗组合物，在给猪接种猪繁殖与呼吸综合征疫苗，并联合接种副猪嗜血杆菌疫苗。可以理解为给猪同时接种猪繁殖与呼吸综合征疫苗和副猪嗜血杆菌疫苗。以解决在预防这两种疾病时所面临的上述问题，且在此过程中意外的发现，同时接种用副猪嗜血杆菌灭活疫苗稀释的猪繁殖与呼吸综合征活疫苗，没有影响抗副猪嗜血杆菌抗体的产生，抗原之间没有出现相互干扰。联合使用后，可以减轻猪繁殖与呼吸综合征强病毒攻击时的临床症状，而且副猪嗜血杆菌病灭活疫苗抗原含量减半也能达到单独使用时 的免疫效果。 本专利技术的主题还涉及抵抗一种猪的继发感染的呼吸系统疾病的免疫原性组合物或疫苗，其包含处于兽医学上可接受的载体或赋形剂之中的有效量的上述猪繁殖与呼吸综合征抗原+副猪嗜血杆菌抗原制品，并可选择包含兽医学上可接受的佐剂。免疫原性组合物引起免疫应答。因此，术语“免疫原性组合物”包括“疫苗组合物”。 本专利技术主题还涉及包装上分开的抵抗猪繁殖与呼吸综合征的抗原制品或免疫原性组合物或疫苗和抵抗副猪嗜血杆菌的抗原制品或免疫原性组合物或疫苗的免疫或疫苗接种试剂盒。所述试剂盒可具有上述定义抗原制品、免疫原性组合物和疫苗的各种特征。 本专利技术主题还有抵抗一种猪的继发感染的呼吸系统疾病的免疫或疫苗接种方法，包括施用抵抗猪繁殖与呼吸综合征的免疫原性组合物或疫苗和抵抗副猪嗜血杆菌的免疫原性组合物或疫苗，或施用在同一制剂中包含一种对两种病原均特异的抗原制品的二联免疫原性组合物或疫苗。具体地，所述免疫或接种方法使用上述疫苗。 本专利技术的主题还在于抵抗特别是以上定义的抵抗副猪嗜血杆菌的抗原制品或免疫原性组合物或疫苗，联合抵抗猪繁殖与呼吸综合征的抗原制品或免疫原性组合物或疫苗，在制备用于抵抗一种猪的继发感染的呼吸系统疾病的药物组合物中的应用。 在联合免疫或疫苗接种计划中，抵抗猪繁殖与呼吸综合征和副猪嗜血杆菌的免疫或疫苗接种也可联合抵抗其它猪病原体特别是可能与继发感染的呼吸系统疾病有关的病原体的免疫或疫苗接种。因此，本文档来自技高网...

【技术保护点】
预防和治疗猪的继发感染的呼吸系统疾病的抗原组合物，其中，所述抗原组合物包含至少一种免疫量的猪繁殖与呼吸综合征抗原和至少一种免疫量的副猪嗜血杆菌抗原以及佐剂，所述猪繁殖与呼吸综合征抗原和副猪嗜血杆菌抗原各自独立地包括减毒活全抗原、灭活的全抗原、亚单位抗原、重组活载体抗原和DNA载体的抗原。

【技术特征摘要】
1.预防和治疗猪的继发感染的呼吸系统疾病的抗原组合物，其中，
所述抗原组合物包含至少一种免疫量的猪繁殖与呼吸综合征抗原和至
少一种免疫量的副猪嗜血杆菌抗原以及佐剂，所述猪繁殖与呼吸综合征
抗原和副猪嗜血杆菌抗原各自独立地包括减毒活全抗原、灭活的全抗
原、亚单位抗原、重组活载体抗原和DNA载体的抗原。
2.根据权利要求1所述的抗原组合物，其中，所述猪繁殖与呼吸综
合征抗原为NVDC-JXA1-R减毒全病毒疫苗，所述副猪嗜血杆菌抗原为
血清型4型JS株和血清5型ZJ株的灭活全菌疫苗，所述副猪嗜血杆菌
血清4型JS株保藏号为CCTCC No.M2011172，所述副猪嗜血杆菌血清
5型ZJ株保藏号为CCTCC No.M2011173。
3.根据权利要求1或2所述的抗原组合物，其中，所述猪繁殖与呼
吸综合征全病毒抗原为每头份病毒含量104.5TCID50～107.0TCID50；更优
地，所述全病毒抗原为每头份病毒含量104.8TCID50～106.5TCID50；再优
选地，所述全病毒抗原为每头份病毒含量105.0TCID50。
4.根据权利要求1或2所述的抗原组合物，其中，所述血清4型副
猪嗜血杆菌全病毒抗原含量为灭活前5×108CFU/头份～8×109CFU/头份；
更优地，所述副猪嗜血杆菌全病毒抗原含量为灭活前为4×109 CFU/头
份，再优选所述血清4型副猪嗜血杆菌全病毒抗原含量为灭活前2×109CFU/头份；
所述血清5型副猪嗜血杆菌全病毒抗原含量为灭活前5×108CFU/头
份～8×109CFU/头份；更优地，所述副猪嗜血杆菌全病毒抗原含量为灭
活前4×109CFU/头份，再优选所述血清5型副猪嗜血杆菌全病毒抗原含
量为灭活前2×109CFU/头份。
5.根据权利要求1-2任意一项所述的抗原组合物，其中，所述佐剂
包括纳米化氢氧化铝胶、矿物油、卡波姆、MONTANIDE GEL ST、蜂
胶、细胞因子、脂质体、免疫刺激复合物、含CpC脱氧寡核苷酸、纳米
化ISA206、ISA760VG、纳米化磷酸铝、皂苷、山梨聚糖、植物油、油

\t酸乙酯、二（辛酸／癸酸）丙二醇酯、三（辛酸／癸酸）甘油酯、二油
酸丙二醇酯、异硬脂酸酯、山梨聚糖、二缩甘露醇、甘油、聚甘油、丙
二醇、油酸、异硬脂酸、蓖麻油酸、羟基硬脂酸酯、聚氧丙烯、聚氧乙
烯嵌段共聚物、丙烯酸或甲基丙烯酸聚合物、顺...

【专利技术属性】
技术研发人员：张许科，孙进忠，白朝勇，
申请(专利权)人：普莱柯生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41