一种鱼腥草注射液中抗原性物质检测方法技术

一种鱼腥草注射液中抗原性物质检测方法，通过鱼腥草药材或制剂经提取、浓缩、乙醇沉淀、超滤等步骤获得鱼腥草蛋白抗原性物质；通过鱼腥草抗原性物质与弗氏完全佐剂配制的标准抗原对家兔进行免疫处理得到标准血清抗体；通过ELISA法检测待测样品中相应的残留植物蛋白类抗原性物质限量。本发明专利技术首次根据抗原抗体免疫反应机理，建立了一种专属性强、灵敏度高的鱼腥草蛋白的ELISA检测方法，充分保障了鱼腥草注射液的临床用药的安全。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于中药注射制剂质量检查
，具体而言，涉及鱼腥草注射液抗原性物质提取，抗鱼腥草抗原抗体制备，以及使用基于抗原-抗体反应原理建立的酶联免疫吸附法，对鱼腥草注射制剂中残留的抗原性物质进行检测的方法。
技术介绍
鱼腥草注射液是由鱼腥草单味药材制备而成，具有明显的抗菌、抗病毒、增强机体免疫力、抗炎、抗过敏、镇咳、降糖等作用，临床用于治疗呼吸道感染、病毒性肠炎、湿疹、恶性肿瘤。是医院临床常用的抗病毒产品，被列为《全国中医医院急诊科(室)必备中成药》，但从1988年至2006年期间，有关鱼腥草类的注射液严重不良反应报告已有222例，SFDA于2006年发布关于暂停使用和审批鱼腥草注射液等7个注射剂的通告。鱼腥草注射液其主要成分为挥发油，其制备工艺为水蒸气蒸馏法，在蒸馏过程中，鱼腥草中的植物蛋白会随着泡沫进入到蒸馏液中，从而给临床使用带来风险。现行的2010版《中华人民共和国药典》在“中药注射剂安全性检查法应用指导原则”中规定，过敏反应检查采用主动全身过敏试验(ASA)，《中药本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鱼腥草注射液中抗原性物质检测方法，其特征在于步骤为：⑴通过鱼腥草药材或制剂经提取、浓缩、乙醇沉淀、超滤等步骤获得鱼腥草蛋白抗原性物质；⑵通过鱼腥草抗原性物质与弗氏完全佐剂配制的标准抗原对家兔进行免疫处理得到标准血清抗体；⑶通过ELISA法检测待测样品中相应的残留植物蛋白类抗原性物质限量。

【技术特征摘要】
1.一种鱼腥草注射液中抗原性物质检测方法，其特征在于步骤为：⑴通过鱼腥草药材或制剂经提取、浓缩、乙醇沉淀、超滤等步骤获得鱼腥草蛋白抗原性物质；⑵通过鱼腥草抗原性物质与弗氏完全佐剂配制的标准抗原对家兔进行免疫处理得到标准血清抗体；⑶通过ELISA法检测待测样品中相应的残留植物蛋白类抗原性物质限量。
2.根据权利要求1所述鱼腥草注射液中抗原性物质检测方法，其特征在于步骤⑴中取鱼腥草药材，加水回流提取3次，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度1.16±0.01(70℃)清膏，加乙醇至含醇量50wt.%-70wt.%，静置过夜，滤过，取沉淀加水溶解，以截留分子量为5000-10000的超滤膜超滤，取截留液，浓缩后冷冻干燥，即得鱼腥草抗原性物质。
3.根据权利要求1所述鱼腥草注射液中抗原性物质检测方法，其特征在于步骤⑵中使用鱼腥草抗原性物质与弗氏完全佐剂配制的标准抗原对家兔进行免疫处理，通过测定抗体滴度来判断抗体产生情况，分离抗血清；采用饱和硫酸铵对抗血清进行沉淀纯化得到标准抗体；所述标准抗原的浓度为5mg/mL-15mg/mL，免疫时间为7-28天；其中硫酸铵的饱和度为20%-50%，硫酸铵再通过透析、凝胶过滤方法去除。
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【专利技术属性】
技术研发人员：程建明，朱丹凤，林瑛，帅维维，柴尧，彭九嫚，
申请(专利权)人：南京中医药大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32