本发明专利技术化合物是佐剂分子，其包括共价连接磷脂基或膦脂基的咪唑并喹啉分子。本发明专利技术化合物已表明是干扰素－ａ、ＩＬ－１２和其它免疫刺激细胞因子的诱导剂，且当用作疫苗抗原的佐剂时，与已知细胞因子诱导剂相比，具有提高的活性特征。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】脂化咪唑并喹啉衍生物本专利技术涉及新的佐剂化合物、它们的制备方法、包含它们的组合物以及它们作为疫苗佐剂的用途。微生物疫苗的精制和简化以及合成和重组亚基抗原用于提高疫苗的可制造性和安全导致疫苗效能的下降。这引起了对佐剂与抗原共同给药以提高疫苗活性以及合成和重组表位的弱免疫原性的研究。佐剂是增强针对疫苗抗原的体液和/或细胞介导免疫应答的添加物。但是，由于免疫系统功能所涉及分子机制的复杂性质，疫苗佐剂的设计历史上是困难的。虽然长久以来已知添加微生物组分以增强适应性免疫应答，但是最近才表明，免疫监视所涉及细胞(例如上皮细胞和树突细胞)上的Toll样受体(TLR)通过所谓“病原相关模式”或“PAMP”结合许多的这些微生物产品。许多疫苗佐剂和独立的免疫调节剂似乎与TLR 家族成员相互作用。已鉴定的10种已知人TLR中，5种与细菌组分识别有关(TLR1、2、4、5、6)，4种其它的(TLR3、7、8、9)似乎被限制在胞质小室中并与病毒RNA(TLR3、7、8)和去甲基化DNA(TLR9) 的检测有关(Iwasaki，A.，Nat Immunol 2004,5,987) 0 TLR的活化调节胞内信号转导途径， 并通过与胞内衔接物分子如MyD88、TRIF、TIRAP和TRAM的相互作用引起基因表达(Akira， S.Nat Rev Immunol 2004,4,499 ；Takeda,K. Semin Immunol 2004，16，3)。这些衔接物分子可有差别地调节炎症细胞因子/趋化因子和I型干扰素(IFNa/b)(可引起优先增强抗原特异性体液和细胞介导免疫应答)的表达(^lghaier，S. Infect Immun 2005，73，四40)。体液免疫是防御细菌病原体的主线，但是在病毒疾病和癌症情况下，细胞毒性T淋巴细胞(CTL) 的诱导似乎对保护性免疫是决定性的。目前，一组称为明矾的铝盐是人疫苗所用的主要佐剂。但是明矾通常只增强体液 (Th2)免疫，并由于通过其它途径(例如皮下或皮内接种引起肉芽肿)的局部毒性而一般肌内使用(Aguilar, J. Vaccine 2007，25，3752)。明矾的其它潜在副作用包括增加IgE产生、 变应原性和神经毒性。因此，需要新的安全有效的疫苗佐剂，其能够刺激抗体和Tbl型免疫应答，并与不同给药途径和抗原制剂兼容。在TLR7和TLR8活化的情况下，必须识别天然(富含U和/或G)病毒ssRNA配体的几个不同类小分子模拟物。它们包括主要与TLR7相互作用的一些与氧化鸟苷代谢物(氧代鸟苷)相关的抗病毒化合物(Heil，F. Eur J Immunol 2003，33，2987 ;Hemmi，2002)，以及结合TLR7和/或TLR8的腺嘌呤衍生物。这些化合物的免疫刺激能力归因于TLR/MyD88 依赖性信号转导途径和细胞因子(包括IL-6以及I型(尤其干扰素_a)和II型干扰素) 的产生。TLR7或TLR8活化引起上调树突细胞(DC)上的共刺激分子(例如⑶_40、⑶-80、 ⑶-86)以及I类和II类MHC分子。DC是涉及T淋巴细胞吸收和提呈抗原的免疫系统的主要细胞。浆细胞样树突细胞(plasmacytoid dendritic cell，pDC)优先表达TLR7，是专职的干扰素_a生产细胞；而mDC仅表达TLR8。mDC上的TLR8活化引起优先产生促炎细胞因子如IL-12、TNF-a和IFN_g以及细胞介导免疫(CMI)。已受到相当关注的一类腺嘌呤衍生物是IH-咪唑并W，5-c]喹啉(IQ)。当以乳膏形式局部施用时，发现该类咪喹莫德(imiquimod) (R847，S-26398)的原型成员有效对抗生殖乳头瘤病毒感染、光化性角化病和基底细胞癌。但是，咪喹莫德具有相当低的干扰素诱导活性，且口服和局部制剂均不无副作用。事实上，在利用咪喹莫德的HCV临床试验中报道了严重的副作用。TLR7激动剂的大部分免疫“足迹”通常已引起对毒性的关注由于毒性问题最近暂停了利用另一 TLR7激动剂ANA-975 (氧代鸟苷衍生物)的临床试验。瑞喹莫德(resiquimod)是IQ类TLR7/8配体的另一成员和咪喹莫德代谢物的衍生物。瑞喹莫德(R-848，S48609)还以MyD88依赖性方式直接或间接地通过辅助分子活化巨噬细胞和DC中的TLR7，并上调DC中的共刺激分子和MHC 1/11。与咪喹莫德相比，更具效能和毒性的瑞喹莫德还是TLR8信号转导的配体，其引起CD4+调节(Treg)细胞功能的逆转。最近利用转染HEK293细胞显示，TLR7激动剂在产生IFN_a和IFN调节细胞因子方面更有效，而TLR8激动剂在诱导促炎细胞因子如TNF-a和IL-12方面更有效，表明TLR7活化可能对抗体应答(Th2型应答)更为重要，而TLR8活化应促进CMI或Thl型免疫应答。然而如上所述，许多TLR7/8激动剂经常表现毒性、不稳定和/或具有非实质性免疫刺激作用。 因此，发现和开发有效且安全的活化TLR7和/或TLR8的佐剂对通过帮助控制针对抗原的免疫应答大小、方向和持续时间来提高现有疫苗和新疫苗的功效和安全性是必要的。与识别细胞表面上的PAMP的TLR2和LTR4不同，TLR7/8PAMP在内体/溶酶体小室中被感知，并需要内体成熟。在天然和异生素(Zen0biotiC)TLR7/8配体如咪喹莫德和瑞喹莫德情况下，细胞吸收是细胞活化的先决条件。因此，提高TLR7/8配体穿透DC和其它免疫细胞的策略可增强TLR活化和疫苗功效以及改善毒性作用。核苷药物的脂缀合物是本领域已知一般用以增强口服生物利用度，以及允许将获得的“核苷脂(nucleolipid) ”结合到脂质体的脂膜中。将不稳定和/或毒性药物结合到脂质体中建立了缓释载体系统或分子贮库制剂，其保护药物免受降解并降低毒副作用。已报道这种“脂前药”的效能可比得上非衍生药物(US 5,827,831-NeXstar)0本领域已报道咪唑并喹啉和脂酰化IQ的贮库制剂用于在局部组织区域中维持IQ延长的时间以降低代谢和毒性之目的(WO 2005/001022-3M)。但是，当单独给药或与抗原一起以贮库制剂给药时，以特异方式将咪唑并喹啉与磷脂或膦脂缀合以促进到免疫细胞内的吸收，并增强内体TLR7/8 活化和抗原呈递是本领域未知的。利用本专利技术化合物的增强免疫应答可能是因为式(I)化合物与内体TLR7和/或TLR8直接相互作用和/或在酶作用后活性代谢物的相互作用。专利技术简述本专利技术化合物已表明是干扰素-a、IL-12和其它免疫刺激细胞因子的诱导剂，且当用作治疗性或预防性治疗感染性疾病和癌症中的疫苗抗原的佐剂时，与已知细胞因子诱导剂相比，其可具有提高的活性-毒性特征。这些化合物本身也是新颖的。附图说明图1显示研究设计的示意图。图2显示p27特异性⑶8应答。图3显示体内检测的p27特异性细胞毒活性。图4阐述抗原特异性⑶4T细胞应答。图5显示用不含(_)或含不同量TLR7/8配体以及QS21和MPL的脂质体基制剂免疫的组中的血清细胞因子应答。图6显示用不含㈠或含不同量TLR7/8配体以及QS21和MPL的乳剂基制剂免疫的组中的血清细胞因子应答。专利技术概述本专利技术化合物是佐剂分子，其包括可本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．式Ｉ化合物或其药学上可接受的盐：其中Ｒ１＝Ｈ、支链或直链且任选地末端用羟基、氨基、巯基、肼基、酰肼基、叠氮基、乙炔基、羧基或马来酰亚胺基取代的Ｃ１－６烷基、Ｃ１－６烷基氨基、Ｃ１－６烷氧基、Ｃ３－６环烷基Ｃ１－６烷基、Ｃ３－６环烷基Ｃ１－６烷基氨基、Ｃ３－６环烷基Ｃ１－６烷氧基、Ｃ１－６烷氧基Ｃ１－６烷基、Ｃ１－６烷氧基Ｃ１－６烷基氨基、Ｃ１－６烷氧基Ｃ１－６烷氧基，Ｚ＝未取代或末端由－（Ｏ－Ｃ２－Ｃ６烷基）１－６－取代的Ｃ２－Ｃ６烷基或烯基，Ｙ＝Ｏ、ＮＨＸ＝Ｏ、ＣＨ２、ＣＦ２Ｗ＝Ｏ或Ｓｍ＝１－２，其中Ｒ２＝Ｈ或直链／支链／不饱和Ｃ４－Ｃ２４烷基或酰基Ｒ３＝直链／支链／不饱和Ｃ４－Ｃ２４烷基或酰基Ｒ４、Ｒ５＝独立地为Ｈ、Ｃ１－Ｃ６烷基、Ｃ１－Ｃ６烷氧基、卤素或三氟甲基；或者一起结合形成未取代或由一个或多个Ｃ１－Ｃ６烷基、Ｃ１－Ｃ６烷氧基、卤素或三氟甲基取代的六员芳基、含一个氮原子的杂芳基、环烷基或含一个氮原子的杂环烷基。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：D·约翰逊，
申请(专利权)人：葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司，
类型：发明
国别省市：BE
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。