【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】结合B7H4的抗体
[0001]本专利技术涉及结合B7H4的抗体,特别是结合B7H4和CD3的双特异性抗体。本专利技术进一步提供了包含该抗体的药物组合物以及该抗体在治疗和诊断规程中的用途,特别是在癌症疗法中的用途。
[0002]专利技术背景
[0003]B7H4(B7
‑
H4,含有V
‑
set域的T细胞活化抑制剂1或VTCN1)是B7蛋白家族的成员,该家族包含与淋巴细胞上的受体结合的细胞表面蛋白配体。B7家族在免疫应答的调节中起重要作用。B7H4通过抑制T细胞活化、增殖、细胞因子产生和细胞毒活性来负调节T细胞介导的免疫应答(Prasad et al.,2003,Immunity 18:863
‑
873)。B7H4是I型跨膜蛋白,其包括短的细胞内域、疏水性跨膜域和细胞外域,所述细胞外域具有IgV和IgC样域,其具有四个保守的半胱氨酸残基和七个N
‑
连接糖基化位点。(Sica et al.,2003,Immunity 18:849
‑
861)。迄今为止,尚未鉴定出B7H4受体。
[0004]在正常成人组织中,B7H4表达非常有限,而B7H4表达在许多癌症组织的肿瘤细胞上发现(Kaur and Janakiram,2019,ESMO Open 4:e000554)。在癌症中,B7H4表达与癌症晚期、不良预后和降低的总体患者生存相关。
[0005]因此,已提出靶向B7H4用于治疗癌症(Podojil and Miller ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.抗体,其包含能够结合人B7H4的抗原结合区和能够结合人CD3的抗原结合区,其中所述抗原结合区包含重链和轻链可变区,其中所述重链和轻链可变区是人源化的和/或人的。2.根据权利要求1的抗体,其是双特异性抗体。3.根据权利要求1或2的抗体,其中所述抗体能够结合癌细胞和T细胞。4.根据权利要求1
‑
3中任一项的抗体,其中所述癌细胞表达所述人B7H4。5.根据权利要求3或权利要求4的抗体,其中所述癌细胞是实体瘤的癌细胞。6.根据权利要求1
‑
5中任一项的抗体,其中所述抗体能够诱导T细胞介导的细胞杀伤。7.根据前述权利要求中任一项的抗体,其中所述能够结合CD3的抗原结合区能够结合人CD3ε(epsilon),诸如如SEQ ID NO:13中指定的人CD3ε(epsilon)。8.根据权利要求1
‑
7中任一项的抗体,其中所述结合CD3的抗原结合区包含重链可变区(VH),其包含SEQ ID NO:16或SEQ ID NO.17的CDR1、CDR2和CDR3区,和,轻链可变区(VL),其包含SEQ ID NO:22的CDR1、CDR2和CDR3区。9.根据权利要求1
‑
7中任一项的抗体,其中所述结合CD3的抗原结合区包含重链可变区(VH),其包含分别为SEQ ID NO:18、19和20或18、19和21的CDR1、CDR2和CDR3序列;和,轻链可变区(VL),其包含分别为SEQ ID NO:23、GTN和24的CDR1、CDR2和CDR3序列。10.根据权利要求1
‑
7中任一项的抗体,其中所述结合CD3的抗原结合区包含重链可变区(VH),其包含SEQ ID NO:16的序列,或与SEQ ID NO:16的序列具有至少90%、至少95%、至少97%或至少99%氨基酸序列同一性的序列;和,轻链可变区(VL),其包含SEQ ID NO:22的序列或与SEQ ID NO:22的序列具有至少90%、至少95%、至少97%或至少99%的氨基酸序列同一性的序列。11.根据权利要求7至10中任一项的抗体,其中所述结合CD3的抗原结合区和CD3之间的解离平衡常数K
D
在1
‑
100nM的范围内,诸如在5
‑
100nM的范围内、在10
‑
100nM范围内、在1
‑
80nM范围内、在1
‑
60nM范围内、在1
‑
40nM范围内、在1
‑
20nM范围内、在5
‑
80nM范围内、在5
‑
60nM范围内、在5
‑
40nM范围内、在5
‑
20nM范围内、在10
‑
80nM范围内、在10
‑
60nM范围内、在10
‑
40nM的范围内,或诸如在10
‑
20nM的范围内。12.根据权利要求7至10中任一项的抗体,其中所述抗体比具有抗原结合区的抗体具有更低的对人CD3ε的结合亲和力,所述抗原结合区包含如SEQID NO:16中所列的VH序列以及如SEQ ID NO:22中所列的VL序列,优选地其中所述亲和力低至少5倍,诸如低至少10倍,例如低至少20倍、低至少30倍、低至少40倍、低至少45倍或诸如低至少50倍。13.根据权利要求7至10中任一项的抗体,其中所述结合CD3的抗原结合区具有在200
‑
1000nM范围内,例如在300
‑
1000nM范围内、在400
‑
1000nM范围内、在500
‑
1000nM范围内、在300
‑
900nM范围内、在400
‑
900nM范围内、在400
‑
700nM范围内、在500
‑
900nM范围内、在500
‑
800nM范围内、在500
‑
700nM范围内、在600
‑
1000nM范围内、在600
‑
900nM范围内、在600
‑
800nM范围内,或诸如在600
‑
700nM的范围内的平衡解离常数K
D
。14.根据权利要求11至13中任一项的抗体,其中
所述结合CD3的抗原结合区包括包含CDR1序列、CDR2序列和CDR3序列的重链可变(VH)区,所述重链可变(VH)区在与包含SEQ ID NO:16中所列序列的重链可变(VH)区相比时具有在选自下组的位置处的氨基酸取代:T31、N57、H101、G105、S110和Y114,所述位置根据SEQ ID NO:16的序列编号;并且野生型轻链可变(VL)区包含分别在SEQ ID NO:23、GTN和SEQ ID NO:24中列出的CDR1、CDR2和CDR3序列。15.根据权利要求14的抗体,其中所述结合CD3的抗原结合区在所述重链可变(VH)区中包含选自下组的取代:T31M、T31P、N57E、H101G、H101N、G105P、S110A、S110G、Y114M、Y114R、Y114V。16.根据权利要求8
‑
10中任一项的抗体,其中所述结合CD3的抗原结合区的重链可变(VH)区的CDR1、CDR2和CDR3总共包含至多1、2、3、4或5个氨基酸取代,当与SEQ ID NO:16的序列的CDR1、CDR2和CDR3相比时,所述氨基酸取代优选包含如权利要求14或权利要求15中所定义的氨基酸取代。17.根据前述权利要求中任一项的抗体,其中所述人B7H4是SEQ ID NO.1的人B7H4。18.根据前述权利要求中任一项的抗体,其中所述能够结合人B7H4的抗原结合区能够结合人B7H4的细胞外域。19.根据权利要求17或权利要求18的抗体,其中所述能够结合人B7H4的抗原结合区能够结合人B7H4的IgC样恒定区。20.根据前述权利要求中任一项的抗体,其中所述能够结合人B7H4的抗原结合区能够结合具有SEQ ID NO.11的序列的B7H3
‑
IgV/B7H4
‑
IgC。21.根据权利要求20的抗体,其中所述能够结合人B7H4的抗原结合区不能够结合具有SEQ ID NO.10的序列的B7H4
‑
IgV/B7H3
‑
IgC。22.根据权利要求17
‑
20中任一项的抗体,其中所述能够结合人B7H4的抗原结合区包含:a)可变重链(VH)区,其包含SEQ ID NO.25的CDR1、CDR2和CDR3区,以及可变轻链区,其包含分别为SEQ ID NO.33的CDR1、CDR2和CDR3区;b)可变重链(VH)区,其包含SEQ ID NO.29的CDR1、CDR2和CDR3区,以及可变轻链区,其包含分别为SEQ ID NO.33的CDR1、CDR2和CDR3区;c)可变重链(VH)区,其包含SEQ ID NO.36的CDR1、CDR2和CDR3区,以及可变轻链区,其包含分别为SEQ ID NO.40的CDR1、CDR2和CDR3区;d)可变重链(VH)区,其包含SEQ ID NO.43的CDR1、CDR2和CDR3,以及可变轻链区,其包含分别为SEQ ID NO.47的CDR1、CDR2和CDR3区;e)可变重链(VH)区,其包含SEQ ID NO.50的CDR1、CDR2和CDR3区,以及可变轻链区,其包含分别为SEQ ID NO.54的CDR1、CDR2和CDR3区;或者f)可变重链(VH)区,其包含SEQ ID NO.31的CDR1、CDR2和CDR3区,以及可变轻链区,其包含分别为SEQ ID NO.33的CDR1、CDR2和CDR3区g)可变重链(VH)区,其包含SEQ ID NO.65的CDR1、CDR2和CDR3区,以及可变轻链区,其包含分别为SEQ ID NO.69的CDR1、CDR2和CDR3区。
23.根据权利要求17
‑
20的抗体,其中所述能够结合人B7H4的抗原结合区包含:a)可变重链(VH)区,其包含分别为SEQ ID NO.26、27和28的CDR1、CDR2和CDR3区,以及可变轻链区,其包含分别为SEQ ID NO.34、GAS和SEQ ID NO.35的CDR1、CDR2和CDR3;b)可变重链(VH)区,其包含分别为SEQ ID NO.26、30和28的CDR1、CDR2和CDR3区,以及可变轻链区,其包含分别为SEQ ID NO.34、GAS和SEQ ID NO.35的CDR1、CDR2和CDR3;c)可变重链(VH)区,其包含分别为SEQ ID NO.37、38和39的CDR1、CDR2和CDR3区,以及可变轻链区,其包含分别为SEQ ID NO.41、DTS和SEQ ID NO.42的CDR1、CDR2和CDR3;d)可变重链(VH)区,其包含分别为SEQ ID NO.44、45和46的CDR1、CDR2和CDR3区,以及可变轻链区,其包含分别为SEQ ID NO.48、YTS和SEQ ID NO.49的CDR1、CDR2和CDR3;e)可变重链(VH)区,其包含分别为SEQ ID NO.51、52和53的CDR1、CDR2和CDR3区,以及可变轻链区,其包含分别为SEQ ID NO.55、GAS和SEQ ID NO.56的CDR1、CDR2和CDR3;或者f)可变重链(VH)区,其包含分别为SEQ ID NO.26、32和28的CDR1、CDR2和CDR3区,以及可变轻链区,其包含分别为SEQ ID NO.34、GAS和SEQ ID NO.35的CDR1、CDR2和CDR3g)可变重链(VH)区,其包含分别为SEQ ID NO.66、67和68的CDR1、CDR2和CDR3区,以及可变轻链区,其包含分别为SEQ ID NO.70、GAS和SEQ ID NO.71的CDR1、CDR2和CDR3。24.根据权利要求17
‑
20中任一项的抗体,其中所述能够结合人B7H4的抗原结合区包含:a)SEQ ID NO.25的可变重链(VH)区和SEQ ID NO.33的可变轻链区;b)SEQ ID NO.29的可变重链(VH)区和SEQ ID NO.33的可变轻链区;c)SEQ ID NO.36的可变重链(VH)区和SEQ ID NO.40的可变轻链区;d)SEQ ID NO.43的可变重链(VH)区和SEQ ID NO.47的可变轻链区;e)SEQ ID NO.50的可变重链(VH)区和SEQ ID NO.54的可变轻链区;或者f)SEQ ID NO.29的可变重链(VH)区和SEQ ID NO.33的可变轻链区g)SEQ ID NO.65的可变重链(VH)区和SEQ ID NO.69的可变轻链区。25.根据前述权利要求中任一项的抗体,其中所述能够结合人B7H4的抗原结合区具有对应于5E
‑
7M或更小,诸如1E
‑
7M或更小的K
D
值的结合亲和力,诸如具有对应于在5E
‑
7至2E
‑
10M范围内,诸如在2E
‑
7至1E
‑
10M或1E
‑
7至5E
‑
9M范围内的K
D
值的结合亲和力。26.根据权利要求25的抗体,其中所述结合亲和力通过生物层干涉测量法测定,任选地如本文实施例3中所述。27.根据权利要求25和26中任一项的抗体,其中所述结合亲和力使用包括以下步骤的生物层干涉测量法测定:I)将所述抗体以1μg/mL的量在抗人IgG Fc捕捉生物传感器上固定化600秒;II)使用范围为1.56nM至100nM的2倍稀释系列,测定人重组带His标签的B7H4蛋白(Sino Biological目录号10738
‑
H08H;从编码具有C端多组氨酸标签的人VTCN1(Uniprot登录号Q7Z7D3)(Phe29
‑
Ala258)的DNA序列的构建体表达的蛋白质)在300秒的时间段内的缔合和1000秒的时间段内的解离;III)相对于缓冲液对照(0nM)参考数据。28.根据权利要求25至27中任一项的抗体,其中所述结合亲和力是使用前述权利要求中任一项所定义的抗体测定的,所述抗体是单特异性二价抗体,诸如作为全长抗体IgG1的
抗体。29.根据权利要求1
‑
28中任一项的抗体,其包含能够结合人B7H4的抗原区,所述抗原结合区能够交叉阻断抗体,其包含SEQ ID NO.29的可变重链(VH)区和SEQ ID NO.33的可变轻链区;和抗体,其包含SEQ ID NO.36的可变重链(VH)区和SEQ ID NO.40的可变轻链区;并且其中所述抗原结合区不能交叉阻断抗体,其包含SEQ ID NO.43的可变重链(VH)区和SEQ ID NO.47的可变轻链区;抗体,其包含SEQ ID NO.50的可变重链(VH)区和SEQ ID NO.54的可变轻链区;和抗体,其包含SEQ ID NO.65的可变重链(VH)区和SEQ ID NO.69的可变轻链区。30.根据权利要求1
‑
28中任一项的抗体,其包含能够结合人B7H4的抗原区,所述抗原结合区能够交叉阻断抗体,其包含SEQ ID NO.43的可变重链(VH)区和SEQ ID NO.47的可变轻链区,抗体,其包含SEQ ID NO.50的可变重链(VH)区和SEQ ID NO.54的可变轻链区;和抗体,其包含SEQ ID NO.65的可变重链(VH)区和SEQ ID NO.69的可变轻链区;并且其中所述抗原结合区不能...
【专利技术属性】
技术研发人员:L库普曼,P恩格尔伯茨,D弗齐尔,EN范登布林克,R拉德梅克,S博斯格拉,FL埃杰罗德,D萨蒂恩,ECW布雷伊,
申请(专利权)人:健玛保,
类型:发明
国别省市:
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