TLR激动剂化合物的多臂聚合物缀合物以及相关的免疫治疗方法技术

本发明专利技术提供了Toll样受体(“TLR”)激动剂例如TLR 7/8激动剂的多臂聚合物缀合物，以及相关的组合物，以及制备和使用此类缀合物的方法。示例性缀合物由式I涵盖：(I)或其药学上可接受的盐形式，其中R与每个Q一起是携带从3至约50个羟基、硫醇或氨基基团的多元醇、多硫醇、或多胺的残基；每个Q是选自氧、硫和‑NH的连接基团；每个POLY独立地是水溶性非肽聚合物；每个Xr独立地是含键联间隔基部分；q是从3至约50的正整数；并且每个TLR 7/8AG是Toll样受体7/8激动剂。本发明专利技术还提供了向患有癌症的患者给予以下的方法：(a)IL‑2Rβ活化量的长效IL‑2Rβ选择性激动剂；和(b)Toll样受体激动剂，例如上述缀合物，以及相关的组合物、试剂盒和方法。

Doublebranched Polymer Conjugates of TLR Agonists and Related Immunotherapy

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】TLR激动剂化合物的多臂聚合物缀合物以及相关的免疫治疗方法相关申请的交叉引用本申请在35U.S.C.§119(e)下要求以下各项的权益：2017年1月10日提交的美国临时专利申请号62/444,735；2017年1月10日提交的美国临时专利申请号62/444,756；2017年3月7日提交的美国临时专利申请号62/467,945；2017年4月21日提交的美国临时专利申请号62/488,251；2017年4月21日提交的美国临时专利申请号62/488,407；2017年5月23日提交的美国临时专利申请号62/510,019；和2017年5月23日提交的美国临时专利申请号62/510,024，每份专利的披露内容通过引用以其全文结合在此。
本申请(尤其)涉及Toll样受体(“TLR”)激动剂并且特别是TLR7和/或TLR8的Toll样受体激动剂的多臂聚合物缀合物，以及涉及包含多臂聚合物TLR激动剂缀合物的组合物，以及制备和使用这些缀合物的方法。本申请还涉及癌症免疫疗法领域，并且涉及例如通过向个体给予Toll样受体(TLR)激动剂(例如，Toll样受体激动剂的多臂聚合物缀合物)与长效IL-2Rβ偏向性激动剂的组合对患有癌症的个体进行的治疗，以及涉及在本文将更详细描述的相关的组合物和方法。
技术介绍
Toll样受体(“TLR”)在属于先天性和适应性免疫系统的若干细胞类型上表达。迄今已在哺乳动物中鉴定出至少13种不同的TLR(Zhao,G.,等人.,JournalforImmunoTherapyofCancer[癌症免疫疗法杂志]2014,2:12)。TLR1、-2、-4、-5、-6和-10在细胞表面上表达，而TLR3、-7、-8和-9位于细胞内的内体膜上(Kaczanowska,S.,等人.,J.LeukocBiol.[白细胞生物学杂志]2013年6月；93(6):847-863)。TLR是检测病原体和恶性细胞衍生的分子(称为病原体相关分子模式(PAMP)，在与TLR结合后，触发(NF)-κB和I型干扰素途径，导致树突细胞(DC)中促炎细胞因子和其他抗原呈递细胞(例如巨噬细胞)的产生)的传感器。TLR对于刺激DC成熟、抗原摄取和呈递，以及CD4+细胞的分化和调节性T(Treg)细胞的控制是至关重要的。已经研究了TLR激动剂的抗肿瘤特性，然而，通常大多数TLR激动剂作为癌症治疗剂表现不佳。据推测，这种表现不佳可能是由免疫遏制因子的诱导抑制TLR激动剂诱导的炎症的机制所解释。(Lu,H.FrontiersinImmunology[免疫学前沿],2014年3月,5,83)。例如，TLR激动剂通过诱导树突细胞上的共刺激分子(例如CD80、CD86和CD40)以及使免疫应答极化的炎性细胞因子(例如TNF-α和IL-12)而具有免疫刺激作用。然而，TLR激动剂还具有免疫抑制作用，例如，通过诱导若干免疫抑制因子(包括IL-10、调节性T细胞(Treg)和PD-1)，所有这些均可以阻遏抗肿瘤免疫力(Lu,H.,2014,同上)。TLR-7、-8和-9在识别核酸基序和内体区室内的表达方面相似(Zhao,G.,2014,同上)。若干种配体(包括合成和天然核苷)，已被表征为TLR7和/或TLR8配体。通过TLR7或TLR8受体识别这些核苷配体激活细胞内途径，最终导致促炎细胞因子、趋化因子和I型干扰素(IFN)的诱导以及共刺激分子的上调。TLR是I型膜蛋白，其特征在于由富含亮氨酸的重复序列组成的胞外结构域，对识别病原体相关分子模式和细胞质结构域(称为Toll/白细胞介素-1受体(TIR)结构域，该结构域对于下游信号传导是必需的)负责。TLR7和TLR8密切相关，共享其细胞内内体位置，以及它们的配体。通过TLR7或TLR8识别配体后，募集含有TLR结构域的衔接分子髓样分化初级应答基因88(MyD88)。TLR7/8和MyD88的结合刺激白细胞介素-1受体相关激酶家族成员的募集，导致丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和IκB激酶(IKK)复合物的下游活化。TLR7和TLR8的Toll样受体激动剂活化巨噬细胞，并且可以在一些情况下将肿瘤环境从肿瘤促进改变为肿瘤遏制性(炎性)环境。鉴于它们活化若干种细胞类型(如DC、单核细胞、巨噬细胞、成纤维细胞和人角质形成细胞)，诱导细胞凋亡，产生增强的免疫原性和对由细胞毒性T细胞淋巴细胞和化学治疗剂介导的杀伤敏感性的潜在能力，TLR配体被认为是是一类具有产生有效抗肿瘤免疫反应潜力的免疫应答调节剂。此外，已显示TLR8配体逆转CD8+Treg细胞的遏制功能(KiniwaY.,等人.,ClinCancerRes[临床癌症研究]2007；13:6947-58)。而且，TLR8配体的应用导致肿瘤浸润性Foxp3+Treg细胞的减少，改变肿瘤环境从肿瘤促进性到肿瘤遏制性(AnzD.等人.,CancerRes.[癌症研究]2015；75:4483-93)。另一方面，在某些情况下，已经显示TLR活化对肿瘤细胞的增殖、侵袭和/或存活是有利的(参见，例如，BohnhorstJ.,等人.,Leukemia[白血病]2006；20:1138-1144；和JegoG.,等人.,Leukemia[白血病]2006；20:1130-1137)。某些TLR7/8激动剂也已经显示诱导免疫遏制和自身免疫疾病(ChiH.,等人.FrontiersinPharmacology[药理学前沿].2017；8:304)。尽管在开发克服一种或多种上述缺点的新的和改进的TLR激动剂方面已经做出了大量努力，仍然存在对鉴定和提供新的且更有效的TLR激动剂以及相关的治疗方案的需求，该治疗方案克服现有技术的化合物和现有的治疗方法的缺点，同时还提供有利的免疫应答而不引发显著的不良副作用(例如炎症)。本披露力图解决这种和其他需求。可以将本文所述的TLR7/8激动剂用作独立的免疫治疗剂(即，作为单免疫治疗剂)，或在另一个方面，可以与长效IL-2Rβ偏向性激动剂组合使用。
技术实现思路
在第一方面，本披露涉及Toll样受体(“TLR”)激动剂的多臂聚合物缀合物。更具体地，缀合物包含通过含键联间隔基部分共价附接至多臂水溶性非肽聚合物的TLR7/8激动剂化合物。除其他之外，本文提供的缀合物允许局部给予缀合物，例如，给予肿瘤部位，其中该缀合物在肿瘤部位停留期间局部优先启动抗肿瘤免疫力。多臂缀合物的构架以及具体的TLR7/8激动剂，附接化学和给予方式有效地产生缀合物，所述缀合物在肿瘤内延长时间保留，并且有效增加肿瘤抗原呈递和T细胞刺激(即，导致增强的CD8T细胞引发)，即引发先天性免疫应答，同时伴随由局部活性引起的最小毒副作用。在多臂缀合物的一些实施例中，TLR7/8激动剂化合物是小分子。在多臂聚合物缀合物的又一个或多个另外的实施例中，多臂水溶性聚合物包含从3至约50个聚合物臂、或从3至约10个聚合物臂、或从3至6个聚合物臂。在一个或多个具体的实施例中，多臂聚合物缀合物包含3、4、或5个聚合物臂。在一个或多个另外的实施例中，多臂聚合物缀合物包含4个聚合物臂。在一些实施例中，缀合物包含在多臂水溶性非肽聚合物的一个或多个壁的末端处共价附接的TLR7/8激动剂。在一个或多个本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种缀合物，该缀合物包含通过含键联间隔基部分共价附接至多臂水溶性非肽聚合物的TLR 7/8激动剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2017.01.10 US 62/444,735;2017.01.10 US 62/444,756;1.一种缀合物，该缀合物包含通过含键联间隔基部分共价附接至多臂水溶性非肽聚合物的TLR7/8激动剂。2.根据权利要求1所述的缀合物，其中所述TLR7/8激动剂是小分子。3.根据权利要求1或权利要求2所述的缀合物，其中所述多臂水溶性聚合物包含从3至约50个聚合物臂。4.根据权利要求1-3中任一项所述的缀合物，所述缀合物包含在所述多臂水溶性非肽聚合物的一个或多个臂的末端处共价附接的TLR7/8激动剂。5.根据权利要求4所述的缀合物，所述缀合物包含在所述多臂水溶性非肽聚合物的每个臂的末端处共价附接的TLR7/8激动剂。6.根据权利要求4所述的缀合物，所述缀合物与式I一致：其中：R与每个Q一起是携带从3至约50个羟基、硫醇或氨基基团的多元醇、多硫醇、或多胺的残基；每个Q是选自氧、硫和-NH的连接基团；每个POLY独立地是水溶性非肽聚合物；每个Xr独立地是含键联间隔基部分；q是从3至约50的正整数；以及每个TLR7/8AG是Toll样受体7/8激动剂；或其药学上可接受的盐形式。7.根据权利要求1-6中任一项所述的缀合物，其中所述TLR7/8激动剂是(N-[4-(4-氨基-2-乙基-1H-咪唑并[4,5c]喹啉-1-基)丁基]甲烷磺酰胺或[8-(3-(吡咯烷-1-基甲基)苄基)-4-氨基-2-丁氧基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮]。8.根据权利要求1-6中任一项所述的缀合物，其中所述TLR7/8激动剂是咪唑喹啉化合物。9.根据权利要求1-6中任一项所述的缀合物，其中所述TLR7/8激动剂是瑞喹莫德或咪喹莫特。10.根据权利要求1-9中任一项所述的缀合物，其中R与Q一起是多元醇的残基。11.根据权利要求6-10中任一项所述的缀合物，其中每个Xr独立地是稳定的含键联间隔基部分。12.根据权利要求6-10中任一项所述的缀合物，其中每个Xr独立地是可释放的含键联间隔基部分。13.根据权利要求6-12中任一项所述的缀合物，其中q是从3至10的正整数。14.根据权利要求6-12中任一项所述的缀合物，其中q是从3至6的正整数。15.根据权利要求6-12中任一项所述的缀合物，其中q选自3、4和5。16.根据权利要求6-12中任一项所述的缀合物，其中q是4。17.根据前述权利要求中任一项所述的缀合物，其中所述含键联间隔基部分包含硫醚、氨基甲酸酯、酯、碳酸酯、或脲官能团。18.根据权利要求1-16中任一项所述的缀合物，其中所述含键联间隔基部分包含酶可裂解的肽键联。19.根据前述权利要求中任一项所述的缀合物，其中Xr与式II一致：～[X1]a-[Lr]b-X2～式II其中：a是0或1；b是0或1；当存在时，X1是间隔基；当存在时，Lr是键联；以及X2是直接共价附接于TLR7/8激动剂的官能团。20.根据权利要求18所述的缀合物，其中X1存在。21.根据权利要求19所述的缀合物，其中X1是-CH2C(O)-。22.根据权利要求18所述的缀合物，其中X1不存在。23.根据权利要求18-21中任一项所述的缀合物，其中X2选自下组，该组由以下组成-C(O)-NH-、-NH-C(O)-NH-、-NH-C(O)-、和-NH。24.根据权利要求18-22中任一项所述的缀合物，其中Lr存在。25.根据权利要求23所述的缀合物，其中Lr选自下组，该组由以下组成-(CRxRy)z-和-NH(CRxRy)z-，其中每个Rx和Ry独立地选自氢、低级烷基、卤素、和卤素取代的低级烷基，并且z是从1至6的整数。26.根据权利要求24所述的缀合物，其中Lr选自-CH2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH2CH2CH2CH2-、-CH2CH2CH2CH2CH2-、-CH2CH2CH2CH2CH2CH2--CH2CHF-、-CHCH3-、-CHCH(CH3)2-、-CHCH2CH(CH3)2-、-C(CH3)2-、-NHCH2-、-NHCH2CH2-、-NHCH2CH2CH2-、-NHCH2CH2CH2CH2-、-NHCH2CH2CH2CH2CH2-、-NHCH2CH2CH2CH2CH2CH2--NHCH2CHF-、-NHCHCH3-、-NHCHCH(CH3)2-、-NHCHCH2CH(CH3)2-、和-NHC(CH3)2-。27.根据前述权利要求中任一项所述的缀合物，其中所述水溶性非肽聚合物是聚(环氧烷)。28.根据权利要求26所述的缀合物，其中所述聚(环氧烷)是聚(环氧乙烷)。29.根据前述权利要求中任一项所述的缀合物，其中包含在“q”个聚合物臂的每个内的水溶性非肽聚合物含有从约1至约30个单体亚单元。30.根据前述权利要求中任一项所述的缀合物，其中所述水溶性非肽聚合物具有的分子量为从约2,000道尔顿至约150,000道尔顿。31.根据前述权利要求中任一项所述的缀合物，其中所述水溶性非肽聚合物具有的分子量为从约5,000道尔顿至约40,000道尔顿。32.根据前述权利要求中任一项所述的缀合物，其中所述水溶性非肽聚合物具有的分子量为从约5,000道尔顿至约25,000道尔顿。33.根据权利要求1所述的缀合物，所述缀合物具有与式III一致的式：或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中：L是-(CH2)m-、-(CH2)m-NH-C(O)-(CH2)m-、-CHF-(CH2)m-NH-C(O)-(CH2)m-、-CH(CH3)-NH-C(O)-(CH2)m-、-(CH2)m-CH(CH(CH3)2)-NH-C(O)-(CH2)m-、-(CH2)m-CH(CH2CH(CH3)2)-NH-C(O)-(CH2)m-、-C(CH3)2-NH-C(O)-(CH2)m-、单键、或-NH-(CH2)m-，每个m独立地是从1至5(包括端值)的整数；每个n独立地是从40至350(包括端值)的整数；R1是氢或-CH2-O-CH2-CH3；以及R2是氢或羟基。34.根据权利要求32所述的缀合物，其中L是-CH2-、-CH2-CH2-NH-C(O)-CH2-、-CH2-CH2-CH2-、-CHF-CH2-NH-C(O)-CH2-、-CH2-NH-C(O)-CH2-、-CH(CH3)-NH-C(O)-CH2-、-CH2-CH(CH(CH3)2)-NH-C(O)-CH2-、-CH2-CH(CH2CH(CH3)2)-NH-C(O)-CH2-、-C(CH3)2-NH-C(O)-CH2-、单键、或-NH-CH2-CH2-。35.根据权利要求31或权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：Z·任，N·K·阿纳德，H·蔡，邓波良，B·V·乔什，J·萨勒斯基，T·米亚萨基，S·基维玛，
申请(专利权)人：尼克塔治疗公司，
类型：发明
国别省市：美国,US