一种抗类风湿性关节炎多肽及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种抗类风湿性关节炎多肽及其应用，多肽包括两段功能序列，其中一段用于靶向阻断血管新生，另一段用于抑制血管新生部位的炎症反应，在抑制血管新生的同时抑制炎症，从而抑制类风湿性关节炎的发生和发展。通过聚乙二醇的修饰可以增加体内半衰期，降低免疫原性，同时还可以增加多肽药物的水溶性，进一步提高药效。通过增加各种药物制剂辅料将多肽类药物制备成多种给药途径的抗类风湿性关节炎药物，便于疾病的治疗方案的指定，减少毒副作用，有利于药物的临床应用。

A polypeptide against rheumatoid arthritis and its application

【技术实现步骤摘要】
一种抗类风湿性关节炎多肽及其应用
本专利技术涉及多肽药物
，特别涉及一种抗类风湿性关节炎多肽及其应用。
技术介绍
多肽是由一种或多种氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物，通常由10～100个氨基酸分子脱水缩合而成，它们的分子量<10000Da。多肽是蛋白质发挥作用的活性基团，是涉及生物体内各种细胞功能的生物活性物质，参与调控各种生理功能，因而在临床应用上具有非常重要的开发价值。活性多肽的来源分为天然活性多肽、基于天然产物的人工修饰多肽以及人工合成的活性多肽。天然多肽的来源十分广泛，可分为动物生物活性多肽和植物多肽。随着科技的发展，天然多肽已经不是唯一的多肽来源，取而代之的是基因重组多肽和化学合成的多肽。类风湿关节炎(RA)是一种病因未明的慢性、以炎性滑膜炎为主的系统性疾病。其特征是手、足小关节的多关节、对称性、侵袭性关节炎症，经常伴有关节外器官受累及血清类风湿因子阳性，可以导致关节畸形及功能丧失。生物制剂目前在类风湿关节炎的治疗上，已经有几种生物制剂被批准上市，并且取得了一定的疗效，尤其在难治性类风湿关节炎的治疗中发挥了重要作用。几种生物制剂在类风湿关节炎中的应用：①TNF-α嵌合性单克隆抗体，临床试验已证明对甲氨蝶呤(MTX)等治疗无效的类风湿关节炎患者用Infliximab可取得满意疗效。近年来强调早期应用的效果更好。用法静点，3mg/kg，分别于0,2,6周注射一次，以后每8周静注一次，通常使用3～6次为1个疗程。需与MTX联合应用，抑制抗抗体的产生。②人重组TNF受体p75和IgGFc段的融合蛋白，Etanercept及人重组TNF受体p75和IgGFc段的融合蛋白治疗类风湿关节炎和AS疗效肯定，耐受性好。③阿达木单抗是针对TNF-α的全人源化的单克隆抗体，推荐的治疗剂量为40mg，每2周1次，皮下注射。④IL-6受体拮抗剂，主要用于中重度RA，对TNF-α拮抗剂反应欠佳的患者可能有效。推荐的用法是4～10mg/kg，静脉输注，每4周给药1次。⑤抗CD20单抗治疗类风湿关节炎取得了较满意的疗效，也可与环磷酰胺或甲氨蝶呤联合用药。单抗类抗靶向疗法虽然解决了靶向性的问题，但其蛋白分子量大，免疫原性高，易产生过敏及免疫交叉反应，且由于研发成本高，研发难度大，产能有限等原因导致其售价高昂，普通癌症患者很难普及使用，同时单抗类药物存在剂型比较单一，给药方式多为静脉注射或滴注，无法口服等问题，使得药物应用十分不便。受技术条件的制约，多数抗类风湿性关节炎肽类药物的半衰期较短，但抗类风湿性关节炎多肽具有其独特的优势:与小分子化学药物相比，对类风湿性关节炎具有更高的亲和力和更强的特异性，并且不良反应低，还可以增加类风湿性关节炎对其他治疗方法的敏感度；与抗体相比，由于它们体积微小，因此更容易渗透到组织中；可以化学合成，并且可以运用多种手段进行化学修饰，有助于设计和研究新型活性多肽。新型抗类风湿性关节炎活性多肽具有高亲和力、强特异性、低不良反应的特点，此外大多数还具选择性靶向炎症患处的性质，因而在临床应用上具有非常重要的开发价值，作为抗类风湿性关节炎化合物具有较好的前景。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题：针对目前单抗类药物和化疗类药物在治疗肿瘤中存在的诸多缺点，本专利技术提供一种抗类风湿性关节炎多肽及在制备抗类风湿性关节炎药物中的应用。为解决上述技术问题，本专利技术提供以下的技术方案：一种抗类风湿性关节炎多肽，所述多肽包括SYCHMRIKPHQ和KKKMEKEINNKLE两段氨基酸序列，多肽的氨基酸序列为SYCHMRIKPHQ-Linker-KKKMEKEINNKLE；或KKKMEKEINNKLE-Linker-SYCHMRIKPHQ；或KKKMEKEINNKLESYCHMRIKPHQ。优选地，所述Linker的氨基酸序列为GSGGSG或GGGGS。优选地，所述多肽的N端或C端进行聚乙二醇修饰。优选地，所述聚乙二醇分子量为4000～10000。一种上述抗类风湿性关节炎多肽应用于制备抗类风湿性关节炎药物。优选地，所述多肽作为原料药在抗类风湿性关节炎药物中的含量为0.5～15wt％，所述多肽的纯度为95～99％。优选地，所述抗类风湿性关节炎药物包含有效剂量的抗类风湿性关节炎多肽及其他药学上可接受的辅料或载体，所述药物载体包括有机和无机载体，口服和肠道给药途径适合加入有机载体，有机载体包括淀粉、乳糖、氧化钙硬脂酸盐、植物油、有机增溶剂中的一种或多种，所述有机增溶剂包括聚乙二醇、甘油、水溶性的有机和无机碱中的一种或多种，抗类风湿性关节炎药物被制成固体形式或液体形式，这些各种形式的抗类风湿性关节炎药物制备完成后被灭菌。优选地，所述抗类风湿性关节炎药物的剂型为片剂、注射剂、喷雾剂、胶囊或包衣药丸。优选地，所述片剂的厚度为2毫米，片重400mg，硬度为9SCE，所述注射剂或喷雾剂须在4℃无菌条件下采用0.22μm滤膜过滤除菌。本专利技术获得的有益效果：(1)本专利技术的多肽可以靶向至类风湿性关节炎血管新生部位，抑制新生血管形成，同时抑制此处的炎症反应，达到治疗类风湿性关节炎的功效；(2)本专利技术的药物采用多种制剂方式制备，给药方式多样，适合不同情况下的治疗方案，给药方便，减少副作用；(3)本专利技术的多肽分子量较小，可穿多种生理屏障，有利于全身给药时药物在目标位置的扩散和靶向。(4)本专利技术采用聚乙二醇修饰，可有效提高药效，增强药物稳定性，延长半衰期。(5)本专利技术的多肽具有多种抗类风湿性关节炎功效，可有效降低关节部位肿胀，减少炎症和血管新生。具体实施方式本专利技术中的SYCHMRIKPHQ序列来源于人VEGF165蛋白，SYCH为50～53位氨基酸残基，MRIKPHQ为107～113位氨基酸残基，二者皆为VEGF165与其受体的表面结合位点，将两个肽段的氨基酸序列整合后人工合成新的氨基酸序列可有效结合VEGF受体，但无受体激活结构域，因而无受体激活的能力，竞争性的抑制VEGF信号通路，从而抑制类风湿性关节部位强烈的血管新生。KKKMEKEINNKLE序列来源于人IL-1β蛋白，KKKMEK为91～96位氨基酸残基，EINNKLE为104～110位氨基酸残基，二者皆为经典炎症通路中IL-1β与其受体(如Toll样受体4)的结合位点，人工合成的KKKMEKEINNKLE序列可特异性的结合于IL-1β受体上，竞争性的抑制IL-1β与受体的结合，且KKKMEKEINNKLE上无受体激活结构域，因而无受体激活的能力，可有效阻断IL-1β炎症信号通路，达到抑制类风湿性关节部位炎症反应的目的。由于类风湿性关节炎部位伴随着强烈的血管新生作用和炎症反应，导致患病部位肿胀疼痛，血管通透性增加，组织液渗出，新生血管导致组织增生，进一步增加了上述症状，本专利技术将来源于VEGF165和IL-1β的多肽序列结合后可在患病部位同时抑制血管新生和炎症反应，消除肿胀疼痛，抑制组织增生，降低炎症因子的生成和释放，防止骨损伤。下面通过对实施例的描述，对本专利技术的具体实施方式作进一步详细的说明，以帮助本领域的技术人员对本专利技术的专利技术构思、技术方案有更完整、准确和深入的理解。实施例1：本专利技术中抗类风湿性关节炎多肽采用FMOC固相合成法制备,具体方法如下：(1)称取5gFmoc-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗类风湿性关节炎多肽，其特征在于：多肽包括SYCHMRIKPHQ和KKKMEKEINNKLE两段氨基酸序列，多肽的氨基酸序列为SYCHMRIKPHQ‑Linker‑KKKMEKEINNKLE；或KKKMEKEINNKLE‑Linker‑SYCHMRIKPHQ；或KKKMEKEINNKLESYCHMRIKPHQ。

【技术特征摘要】
1.一种抗类风湿性关节炎多肽，其特征在于：多肽包括SYCHMRIKPHQ和KKKMEKEINNKLE两段氨基酸序列，多肽的氨基酸序列为SYCHMRIKPHQ-Linker-KKKMEKEINNKLE；或KKKMEKEINNKLE-Linker-SYCHMRIKPHQ；或KKKMEKEINNKLESYCHMRIKPHQ。2.根据权利要求1中所述的一种抗类风湿性关节炎多肽，其特征在于：所述Linker的氨基酸序列为GSGGSG或GGGGS。3.根据权利要求2中所述的一种抗类风湿性关节炎多肽，其特征在于：所述多肽的N端或C端进行聚乙二醇修饰。4.根据权利要求2中所述的一种抗类风湿性关节炎多肽，其特征在于：所述聚乙二醇分子量为4000～10000。5.一种根据权利要求1～4中任一项所述的抗类风湿性关节炎多肽的应用，其特征在于，应用于制备抗类风湿性关节炎药物。6.根据权利要求5中所述的抗类风湿性关节炎多肽的应用，其特征在于：所述多肽作为原料药在抗类风湿性关...

【专利技术属性】
技术研发人员：张慧君，张凯，张翔，
申请(专利权)人：张慧君，
类型：发明
国别省市：安徽,34