浓缩生长因子缓释冻干膜及其制备方法技术

本申请涉及一种浓缩生长因子缓释冻干膜及其制备方法，包括以下步骤：提供浓缩生长因子；将浓缩生长因子分散在海藻酸钠的水溶液中，得到混合溶液；边搅拌边向含有二价金属阳离子的水溶液中滴加混合溶液，以使海藻酸钠包覆浓缩生长因子，得到浓缩生长因子和海藻酸钠的复合微球；将复合微球分散在壳聚糖的水溶液中，冷冻干燥，得到浓缩生长因子缓释冻干膜。上述方法制备的浓缩生长因子缓释冻干膜，具有浓缩生长因子释放速率可控，机械性能较好且能长期储存等优点。

【技术实现步骤摘要】
浓缩生长因子缓释冻干膜及其制备方法
本专利技术涉及生物细胞
，特别是涉及一种浓缩生长因子缓释冻干膜及其制备方法。
技术介绍
2006年Sacco将血液通过特定的离心设备(Mcdifuge,Silfradentsrl,Italy)制得浓缩生长因子CGF(ConcentrateGrowthFactors)，具有以下优势：1)取自病人自体静脉血，无免疫排斥、无伦理问题；2)不添加任何外来物质，无交叉感染；3)含高度浓度的生长因子和CD34干细胞，可促进粘膜和骨组织愈合，提高成骨质量；4)三维矩阵网状结构的纤维蛋白质地非常致密，抗拉伸强度高，可完全替代异体胶原膜；5)可以和骨制剂或自体骨搅拌混合使用，可塑性佳，并加速成骨细胞的生成，促进骨再生；6)减轻术后并发症如肿胀、止疼，减少术后预防性抗生素的使用。与复血小板纤维蛋白PRF(PlateletRichFibrin)相比，首先CGF中富含纤维蛋白凝块比PRF中的大得多，而且更粘稠，纤维蛋白的含量也更多，使用富含纤维蛋白凝块时，将显示更强的再生力和更好的多样性；其次CGF具有更高的抗张强度、更多的生长因子、更好的粘性和更高的粘合强度；此外CGF中的CD34干细胞浓度远远高于PRF，这对成骨细胞生长、促进成骨具有重要意义。然而经特定离心方法获得的浓缩生长因子虽然可促进软组织愈合，但存在浓缩生长因子释放快、机械性能差、无法长期储存等问题，严重限制了其在临床上的应用。
技术实现思路
基于此，有必要提供一种浓缩生长因子释放速率可控，具有较好机械性能且能长期储存的浓缩生长因子缓释冻干膜。一种浓缩生长因子缓释冻干膜的制备方法，包括以下步骤：提供浓缩生长因子；将所述浓缩生长因子分散在海藻酸钠的水溶液中，得到混合溶液；边搅拌边向含有二价金属阳离子的水溶液中滴加所述混合溶液，以使所述海藻酸钠包覆所述浓缩生长因子，得到所述浓缩生长因子和海藻酸钠的复合微球；将所述复合微球分散在所述壳聚糖的水溶液中，冷冻干燥，得到浓缩生长因子缓释冻干膜。上述浓缩生长因子缓释冻干膜的制备方法，通过将浓缩生长因子先分散在海藻酸钠的水溶液中，以使浓缩生长因子和海藻酸钠均匀分布，再将浓缩生长因子和海藻酸钠形成的混合溶液滴加入含有二价金属阳离子的水溶液中，在二价金属阳离子的作用下，使浓缩生长因子和海藻酸钠发生交联，以使海藻酸钠在浓缩生长因子表面形成均匀的包覆层，通过控制混合溶液的加入量和滴加速率可控制包覆层的厚度和均匀性，从而使制备的浓缩生长因子缓释冻干膜的缓释速率可控；再通过将浓缩生长因子和海藻酸钠形成的复合微球分散在壳聚糖的水溶液中，以使复合微球和壳聚糖相互交联，可有效提高材料的机械性能；再通过冷冻干燥，可使制备的浓缩生长因子缓释冻干膜长期储存。在其中一个实施例中，所述海藻酸钠的水溶液中海藻酸钠的浓度为0.01g/mL～0.04g/mL；所述含有二价金属阳离子的水溶液中二价金属阳离子的浓度为0.1mol/L～1mol/L；所述壳聚糖的水溶液中壳聚糖的浓度为0.01g/mL～0.04g/mL。在其中一个实施例中，所述二价金属阳离子选自Ca2+、Sr2+、Ba2+、Pb2+、Cu2+、Cd2+、Co2+、Ni2+、Zn2+及Mn2+中的至少一种。在其中一个实施例中，所述混合溶液的滴加速率为0.1ml/min～10ml/min。在其中一个实施例中，所述搅拌的速率为100rpm～1000rpm。在其中一个实施例中，所述复合微球的粒径为10μm～1000μm。在其中一个实施例中，所述冷冻干燥的温度为-35℃～-25℃，所述冷冻干燥的真空度为0.2mbar～0.4mbar。在其中一个实施例中，所述浓缩生长因子由以下方法制备：提供血样；将所述血样离心分离，得到浓缩生长因子。本申请还提供一种上述浓缩生长因子缓释冻干膜的制备方法制得的缓释冻干膜，具体方案如下：上述任一项所述的浓缩生长因子缓释冻干膜的制备方法制得的浓缩生长因子缓释冻干膜。附图说明图1为实施例1制备的CGF缓释冻干膜中IGF-1和CGF冻干粉中IGF-1的释放情况对比图；图2为实施例1制备的CGF缓释冻干膜中TSP-1和CGF冻干粉中TSP-1的释放情况对比图；图3为实施例1制备的CGF缓释冻干膜中PDGF-AB和CGF冻干粉中PDGF-AB的释放情况对比图；图4为实施例1制备的CGF缓释冻干膜中TGF-beta1和CGF冻干粉中TGF-beta1的释放情况对比图；图5为实施例1制备的CGF缓释冻干膜中VEGF和CGF冻干粉中VEGF的释放情况对比图。具体实施方式为了便于理解本专利技术，下面将对本专利技术进行更全面的描述，并给出了本专利技术的较佳实施例。但是，本专利技术可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本专利技术的公开内容的理解更加透彻全面。除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本专利技术。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。一实施方式的浓缩生长因子缓释冻干膜的制备方法，包括以下步骤S110～S140：S110、提供浓缩生长因子。在本实施方式中，浓缩生长因子由以下方法制备：提供血样；将血样离心分离，得到浓缩生长因子。需要说明的是，在本实施方式中将血样离心分离采用的是特定的离心设备(Mcdifuge,Silfradentsrl,Italy)，该设备可将血样中的浓缩生长因子很好地分离出来。可以理解，在其他实施方式中，也可以采用其他方法，只要能将血样中的浓缩生长因子分离出来即可。S120、将上述浓缩生长因子分散在海藻酸钠的水溶液中，得到混合溶液。其中，海藻酸钠的水溶液中海藻酸钠的浓度为0.01g/mL～0.04g/mL。进一步的，海藻酸钠的水溶液中海藻酸钠的浓度为0.02g/mL。S130、在搅拌条件下向含有二价金属阳离子的水溶液中滴加上述混合溶液，以使海藻酸钠包覆浓缩生长因子，得到浓缩生长因子和海藻酸钠的复合微球。其中，含有二价金属阳离子的水溶液中二价金属阳离子的浓度为0.1mol/L～1mol/L。进一步的，二价金属阳离子选自Ca2+、Sr2+、Ba2+、Pb2+、Cu2+、Cd2+、Co2+、Ni2+、Zn2+及Mn2+中的至少一种。在本实施方式中，二价金属阳离子为Ca2+。含有二价金属阳离子的水溶液为氯化钙水溶液。进一步的，混合溶液的滴加速率为0.1mL/min～10mL/min。进一步的，搅拌的速率为100rpm～1000rpm。通过将浓缩生长因子先分散在海藻酸钠的水溶液中，以使浓缩生长因子和海藻酸钠均匀分布，再将浓缩生长因子和海藻酸钠形成的混合溶液滴加入含有二价金属阳离子的水溶液中，在二价金属阳离子的作用下，使浓缩生长因子和海藻酸钠发生交联，以使海藻酸钠在浓缩生长因子表面形成均匀的包覆层，通过控制混合溶液的加入量和滴加速率可控制包覆层的厚度和均匀性，从而使制备的浓缩生长因子缓释冻干膜的缓释速率可控。进一步的，复合微球的粒径为10μm～1000μm。S140、将上述复合微球分散在壳聚糖的水溶液中，冷冻干燥，得到浓缩生长因子缓释冻干膜。其本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种浓缩生长因子缓释冻干膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：提供浓缩生长因子；将所述浓缩生长因子分散在海藻酸钠的水溶液中，得到混合溶液；在搅拌条件下向含有二价金属阳离子的水溶液中滴加所述混合溶液，以使所述海藻酸钠包覆所述浓缩生长因子，得到所述浓缩生长因子和海藻酸钠的复合微球；将所述复合微球分散在壳聚糖的水溶液中，冷冻干燥，得到浓缩生长因子缓释冻干膜。

【技术特征摘要】
1.一种浓缩生长因子缓释冻干膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：提供浓缩生长因子；将所述浓缩生长因子分散在海藻酸钠的水溶液中，得到混合溶液；在搅拌条件下向含有二价金属阳离子的水溶液中滴加所述混合溶液，以使所述海藻酸钠包覆所述浓缩生长因子，得到所述浓缩生长因子和海藻酸钠的复合微球；将所述复合微球分散在壳聚糖的水溶液中，冷冻干燥，得到浓缩生长因子缓释冻干膜。2.根据权利要求1所述的浓缩生长因子缓释冻干膜的制备方法，其特征在于，所述海藻酸钠的水溶液中海藻酸钠的浓度为0.01g/mL～0.04g/mL；所述含有二价金属阳离子的水溶液中二价金属阳离子的浓度为0.1mol/L～1mol/L；所述壳聚糖的水溶液中壳聚糖的浓度为0.01g/mL～0.04g/mL。3.根据权利要求1所述的浓缩生长因子缓释冻干膜的制备方法，其特征在于，所述二价金属阳离子选自Ca2+、Sr2+、Ba2+、Pb2+、Cu2+、Cd2+、Co2+...

【专利技术属性】
技术研发人员：王丽萍，肖殷，万绵佳，李正茂，杜志斌，宿玉成，葛林虎，
申请(专利权)人：王丽萍，
类型：发明
国别省市：广东,44