The present invention relates to preparation of alpha cyclodextrin response surface design method and application of enzymatic preparation of marine microorganisms, which belongs to the field of marine microbial enzyme. Including the enzymatic conversion of substrate types, substrate concentration, strain Y112 from marine microorganisms alpha cyclomaltodextrin dosage, temperature, reaction time and pH, and the optimal preparation method to obtain the response surface method. The optimum conditions were as follows: potato starch concentration was 5%, enzyme dosage was 200u/g (starch), pH value was 8.4, temperature was 30 degrees Celsius, rotate speed was 200 rpm, reaction time was 6 hours. Under this condition alpha cyclodextrin conversion rate can reach 28.67%. The method to remove the organic solvent decanol, while ensuring the conversion efficiency, the process and the method is simple, fast and good effect, for the conversion of starch preparation alpha cyclodextrin is effective and reliable, economic.
【技术实现步骤摘要】
海洋微生物酶法制备α-环糊精响应面设计方法及应用
本专利技术涉及海洋微生物酶领域,特别是涉及海洋微生物菌株Y112产生的α-环糊精葡萄糖基转移酶转化淀粉制备α-环糊精的响应面设计优化方法及应用。
技术介绍
环糊精(CD)是一类环状低聚糖。一般常见的有α-、β-和γ-环糊精,分别由6,7,8个D-吡喃葡萄糖单元,以α-1,4糖苷键首尾相连而成。环糊精可以包埋众多的形状各异和适当大小的疏水性客体分子,进而改变它们的稳定性、溶解度、挥发性及化学反应性能等理化性质。环糊精的化学性质均比较稳定,α-环糊精在体内的代谢作用最慢且无毒。环糊精在药品、食品、化妆品、环保、工业和农业等领域都有良好的应用前景,而且作为一种新型的膳食纤维逐渐走入人们的视野。环糊精的制备主要有两种方法:化学合成法和生物酶转化法,化学合成法因为过程复杂等原因已经被淘汰,而生物酶转化法的主要原理是利用环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)作用于淀粉或者底物生成环糊精。CGTases酶能催化转糖基化反应,包括环化,耦合,歧化和水解反应,是一种多功能酶。大多数的CGTase生成的都是多种环糊精的混合体。Bharat等利用来自肺炎克雷伯菌AS-22分泌的CGTase酶生产α-环糊精,当CGTase作用于溶解性较好的糊精时,转化率只能达到10.9%。Duan等以15%(W/V)马铃薯淀粉为底物,每克底物同时加入10U的α-CGTase和48U的异淀粉酶,加入5%的环化反应促进剂正癸醇,温度30℃,pH5.6,反应24h后CD的总产量达到84.6%(w/w),比单独使用α-CGTase的转化率提高了31.2%, ...
【技术保护点】
一种海洋微生物酶法转化淀粉生成α‑环糊精响应面设计优化方法,其特征在于所述方法为确定影响α‑环糊精葡萄糖基转移酶转化淀粉生成α‑环糊精的主要影响因子为底物浓度、温度和pH,以此3个因素为自变量,每个因素又选择3个水平,以转化率为响应值,做3因素3水平共17个试验点、5个中心点的二次回归正交组合试验,对试验结果进行响应面分析,经过二次回归拟合后,得到转化率对底物浓度A、温度B和pH C的二次多项回归方程为:Y=+28.58‑0.91A+0.28B‑0.83C+0.012AB+0.57AC‑0.13BC‑1.30A
【技术特征摘要】
1.一种海洋微生物酶法转化淀粉生成α-环糊精响应面设计优化方法,其特征在于所述方法为确定影响α-环糊精葡萄糖基转移酶转化淀粉生成α-环糊精的主要影响因子为底物浓度、温度和pH,以此3个因素为自变量,每个因素又选择3个水平,以转化率为响应值,做3因素3水平共17个试验点、5个中心点的二次回归正交组合试验,对试验结果进行响应面分析,经过二次回归拟合后,得到转化率对底物浓度A、温度B和pHC的二次多项回归方程为:Y=+28.58-0.91A+0.28B-0.83C+0.012AB+0.57AC-0.13BC-1.30A2-2.30B2-2.76C2,利用软件分析得到最大响应值时A、B、C对应的值即为最佳实验条件。2.根据权利要求1所述的方法...
【专利技术属性】
技术研发人员:郝建华,王伟,刘均忠,孙晶晶,
申请(专利权)人:中国水产科学研究院黄海水产研究所,
类型:发明
国别省市:山东,37
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。