本发明专利技术公开了一种新的天然产物黄丝菌多糖CEC‑A及其应用，黄丝菌多糖CEC‑A是由两个单糖组成的杂多糖，即β‑D‑葡萄糖和α‑D–木糖以5:1的比例组成，平均分子量约为61056 D，具有(1‑4)β‑D‑葡萄糖的骨架，6‑O上连接一个→1)‑α‑D–木糖的侧链，一定剂量的黄丝菌多糖CEC‑A具有显著的抗氧化能力和免疫调控活性，浓度为4.5mg/ml时，对DPPH·自由基的清除能力为35.23％；浓度为6.4mg/mL，对ABTS自由基的清除能力为40.70％。对T，B细胞具有促增殖活性。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于真菌多糖应用
，具体地说，涉及一种新的天然产物黄丝菌多糖CEC-A及其应用。
技术介绍
多糖(polysaccharides)又称多聚糖，是生物体普遍存在的一类生物大分子，不仅参与细胞骨架的构成，而且是多种内源性生物活性分子的重要组成成分。近代生物化学一直把多糖视作生物体内维持细胞结构(如纤维素和几丁质)和提供能量来源(如淀粉和糖元)的物质，没有给予足够的重视。多糖的发展较蛋白质、核酸晚得多，加上多糖本身的复杂性和多样性，对多糖结构测定、表征鉴定都提出了巨大挑战。目前，多糖的研究水平要大大落后于蛋白质和核酸的研究。近20年来，关于多糖生物活性的研究报道主要集中在免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化和降血糖等方面，其作用是多途径、多环节、多靶点的。黄丝菌(鸡油菌、杏菌)Canthar-elluscibariusFr.英文名：Chanterelle.子实体肉质，喇叭形，全菌杏黄色、蛋黄色或枇杷黄色，菌盖宽3—9厘米，最初扁平，后下凹。有浓郁的杏仁果香味，微甜；可食，香气浓郁，颜色悦目，鲜美可口，营养丰富，是著明的世界型食用菌。富含有胡萝卜素、维生素A、C和钙、铁、磷等多种矿质营养目前，对黄丝菌多糖CEC-A的精细结构与抗氧化活性研究及其应用尚未见任何报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服上述技术存在的缺陷，提供一种新的天然产物黄丝菌多糖CEC-A及其应用。其具体技术方案为：一种新的天然产物黄丝菌多糖CEC-A，由两个单糖组成的杂多糖，即β-D-葡萄糖和α-D–木糖以5:1的比例组成，平均分子量约为61056D，具有(1-4)β-D-葡萄糖的骨架，6-O上连接一个→1)-α-D–木糖的侧链，黄丝菌多糖CEC-A的结构式为：本专利技术所述新的天然产物黄丝菌多糖CEC-A在抗氧化药物及免疫调控药物制备过程中的应用。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：本专利技术的黄丝菌多糖CEC-A具有显著的抗氧化能力，浓度为4.5mg/ml时，对DPPH·自由基的清除能力为35.23％；浓度为6.4mg/mL，对ABTS自由基的清除能力为40.70％。对T，B细胞具有促增殖活性。对T，B细胞具有促增殖活性。附图说明图1黄丝菌纯多糖CEC-A重均分子量；图2黄丝菌多糖CEC-A的红外谱；图3黄丝菌多糖CEC-A的高效液相图谱；图4黄丝菌多糖CEC-A的1HNMR图谱；图5黄丝菌多糖CEC-A的13CNMR图谱；图6黄丝菌多糖CEC-A的GC-MS图谱，其中，图6a(1,4,6)β-D-葡萄糖,图6b(1-4)β-D-葡萄糖,图6c→1)-α-D–木糖的侧链；图7黄丝菌多糖CEC-A的结构；图8黄丝菌多糖CEC-A对DPPH自由基的清除作用；图9黄丝菌多糖CEC-A对ABTS自由基的清除作用；图10黄丝菌多糖CEC-A对T细胞增殖的影响；图11黄丝菌多糖CEC-A对T细胞形态的影响，其中，空白组：图11a；CEC-A实验组：图11b-图11i，浓度分别为0.625,1.25,2.5,5,10,20,40,80μg/mL；LPS对照组：图11j浓度为5μg/mL；图12黄丝菌多糖CEC-A对B细胞增殖的影响；图13黄丝菌多糖CEC-A对B细胞形态的影响，其中，空白组：图13a；CEC-A实验组：图13b-图13i，浓度分别为0.625,1.25,2.5,5,10,20,40,80μg/mL；LPS对照组：图13j浓度为5μg/mL。具体实施方式下面结合附图和具体实施例对本专利技术的技术方案作进一步详细地说明。实施例1黄丝菌多糖CEC-A的分离提取1.1.经过热水浸提、醇沉后，得到黄丝菌多糖CEC-A粗提物。运用DEAE-cellulosecolumn和SephadexG-100column进行分离纯化，得到黄丝菌多糖CEC-A。1.2.黄丝菌多糖CEC-A的结构鉴定运用水解、甲基化分析、气相色谱和质谱联用技术(GC-MS)、扫描电镜技术(SEM)、红外谱技术(IR)、核磁共振技术(NMR)，对橙盖鹅膏菌纯品多糖进行结构解析。1.2.1分子量的测定将3mg黄丝菌多糖CEC-A样品溶解于1mlddH2O中，超声5min，进行HPGPC分析，数据用GPC软件分析后与标准曲线对照测得分子量1.1×104D(标准品T-10，20，50，80，130)。1.2.2黄丝菌多糖CEC-A的硅烷化衍生与甲基化分析将标准单糖和上述干燥后水解产物进行硅烷化衍生步骤如下：1.0mg的样品溶解于0.2ml的无水吡啶，然后加0.2ml的六甲基二硅氮烷和0.1mg的三甲基氯硅烷，50℃温育20min，然后10000rpm离心20min，取上层溶液用于甲基化分析。1.2.3黄丝菌多糖CEC-AGC-MS谱分析GC条件：色谱柱：Rtx-5silMS(5％phenylmethylsiloxane30mm×0.25mm×0.25μm)；进样器温度、GC-MS界面温度、离子源温度和检测器温度分别为250、250、230和250℃，升温程序：80℃(3min)10℃/min250℃(30min)；载气：高纯氦气。1.2.4黄丝菌多糖CEC-A的红外谱分析当黄丝菌多糖CEC-A样品2mg左右，KBr压片，红外分光光度计4000cm-1-400cm-1。1.2.5黄丝菌多糖CEC-A的核磁共振分析取黄丝菌多糖CEC-A样品10mg左右溶于0.5mL重水(D2O)中，在核磁共振仪上常温测定，400MHz测1HNMR谱，400MHz测13CNMR谱。1.3结果1.3.1黄丝菌多糖CEC-A的基本性质结果黄丝菌纯多糖重均分子量为61056D(见图1)。1.3.2黄丝菌多糖CEC-A的FTIR谱分析如图2所示，黄丝菌多糖CEC-A在红外谱中显示3428.78cm-1的宽吸收峰指定为O-H和N-H伸缩振动峰，存在着分子内和分子间的氢键。2926.89cm-1指定为-CH2，-CH3的伸缩振动峰。2127.55cm-1指定为-CH2，-CH3的伸缩振动峰。1651.82cm-1指定为C＝O,C＝C振动峰。1124.92cm-1，1082.90cm-1在1200-1000cm-1范围内指定为-COOH中的C-O-H伸缩振动和吡喃环中醚键C-O-C伸缩振动。791.10cm-1指示黄丝菌多糖CEC-A有α型吡喃环。1.3.3黄丝菌多糖CEC-A的高效液相分析结果黄丝菌多糖CEC-A由α-D-葡萄糖和α-D-木糖两种糖构成，比例为5:1(图3)1.3.4黄丝菌多糖CEC-A的NMR谱分析异头氢信号δ4.865,δ4.854指示在黄丝菌多糖CEC-A中α型异头氢存在(见图4)，且两者均与红外谱显示相一致。在碳谱中13CNMR(400MHz)95–105ppm区域的共振信号峰归属于β-D-葡萄糖和α-D-半乳糖的碳质子信号(见图5，表1)。表1黄丝菌多糖CEC-A的13CNMR图中的化学位移1.3.5黄丝菌多糖CEC-A的GC-MS谱分析结果从黄丝菌中获得一个结构新颖的由两个单糖组成的杂多糖，即β-D-葡萄糖(见图6a,图6b)和α-D-半乳糖(图6c),以2:1的比例组成，平均分子量约为9279D，具有(1-4)β-D-葡萄糖的骨架，6-O上连接一个→3)-α-D-半本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种新的天然产物黄丝菌多糖CEC‑A，其特征在于，由两个单糖组成的杂多糖，即β‑D‑葡萄糖和α‑D–木糖以5:1的比例组成，平均分子量约为61056D，具有(1‑4)β‑D‑葡萄糖的骨架，6‑O上连接一个→1)‑α‑D–木糖的侧链，黄丝菌多糖CEC‑A的结构式为：
【技术特征摘要】
1.一种新的天然产物黄丝菌多糖CEC-A，其特征在于，由两个单糖组成的杂多糖，即β-D-葡萄糖和α-D–木糖以5:1的比例组成，平均分子量约为61056D，具有(1-4)β-D-葡...
【专利技术属性】
技术研发人员：丁祥，侯怡铃，侯万儒，
申请(专利权)人：西华师范大学，
类型：发明
国别省市：四川;51
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