一种马大杂种相思瓶外生根的培养方法技术

本发明专利技术公开了一种马大杂种相思瓶外生根的培养方法，本发明专利技术方法为：剪取马大杂种相思含腋芽的茎段接入初代培养基，培养至腋芽高2～3cm，剪取腋芽，接入增殖培养基，培养至腋芽长成高4～5cm的增殖苗，将增殖苗在自然光照下炼苗5～7天，再将增殖苗剪成单个芽，芽基部用100～150mg/LIBA浸泡50～70min后，扦插至温室大棚中的营养杯中培养即可。本发明专利技术的瓶外生根方法将增殖苗的生根过程与驯化过程结合到一起，提高了组培苗的质量和存活率，加速了种苗繁殖的进程，简化了整个组培生产环节，缩短了生产时间，节省了组培培养空间，降低了生产成本，有利于实现马大杂种相思的工厂化育苗。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了，本专利技术方法为：剪取马大杂种相思含腋芽的茎段接入初代培养基，培养至腋芽高2～3cm，剪取腋芽，接入增殖培养基，培养至腋芽长成高4～5cm的增殖苗，将增殖苗在自然光照下炼苗5～7天，再将增殖苗剪成单个芽，芽基部用100～150mg/LIBA浸泡50～70min后，扦插至温室大棚中的营养杯中培养即可。本专利技术的瓶外生根方法将增殖苗的生根过程与驯化过程结合到一起，提高了组培苗的质量和存活率，加速了种苗繁殖的进程，简化了整个组培生产环节，缩短了生产时间，节省了组培培养空间，降低了生产成本，有利于实现马大杂种相思的工厂化育苗。【专利说明】
本专利技术涉及植物组培苗的生根培养方法，具体涉及。
技术介绍
相思iAcacia)是我国从澳大利亚引种的重要速生树种，属含羞草科(Mimosaceae)金合欢属(Acacia),能与土壤中的根瘤菌共生固氮而能在氮元素贫瘠、酸性、甚至退化的土壤条件下生存，在我国南方短周期工业原料林发展、水土保持和丰富林木种质资源等方面具有重要作用和地位。其中，马大杂种相思(Acacia mangiumXA.auriculiformis)，是以马占相思(Acacia mangium)为母本，大叶相思(Acacia.auriculiformis)为父本天然选育而成，既有大叶相思树干通直、分枝细小的优点，又具备马占相思速生的性能，既具有工业造纸、家具装饰的经济价值，也有城市绿化、营造高效生态混交林的生态价值。此外，马大杂种相思因比马占相思有更高的木材密度和纤维素含量、不易患心腐病，能在一个生产周期内能获得较高的原木产量，且适应性更强、生长力更旺而被大力推广种植。组织培养具有生产周期短、繁殖率高、能保存亲本优良性状等优点，对于马大杂种相思这类采种较困难且后代分化严重的乔木，组织培养能为其实现工厂化育苗提供技术支撑、能加快推广应用，其中生根率和生根成本正是决定组织培养能否工厂化生产的关键的环节。目前，有关组培苗生根的方法主要有瓶内生根和瓶外生根，组培苗瓶外生根技术是近几年研究成功的一项先进的组培生根技术。该技术的关键是将组培苗的生根阶段中的生根和驯化结合起来，替代了组培苗瓶内生根的传统程序。简化了操作过程、节省了培养空间、降低了生产成本。为我国重要的经济林作物桉树、松树、杨树等，均有组培苗瓶外生根的研究，结果具有生根率高、生根苗质量好等特点。而马大杂种相思增殖苗瓶外生根技术未见报道。马大杂种相思瓶内生根技术国内外已见报道，周丽华等人报道了莞屏I号杂种相思的瓶内生根技术，其生根率在70.8%左右；熊建勇等人报道马大杂种相思瓶内生根，生根率虽可以达到99%，但生根时间长达40天，且生根苗移栽存活率仅为85% ；T.Toda等报道的生根率在80.0%左右，Olivier等于2013年报道了马大杂种相思瓶内繁殖技术，此技术需要2个月时间才能达到95%以上的生根率。可见马大杂种相思瓶内生根技术存在生根率低、生根时间长、生根苗移栽存活率较低等缺点。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术开发出一种提高马大杂种相思组培苗生根率、缩短生产周期并降低生产成本的瓶外生根技术。本专利技术的目的在于提供。本专利技术所采取的技术方案是: 包括以下步骤: O以马大杂种相思优树枝条为材料，剪取含腋芽茎段作为外植体，消毒后接入初代培养基，培养30~35天，至腋芽高2~3cm ; 2)剪取I)中的腋芽，接入增殖培养基中，培养40~45天，使腋芽长成高4~5cm的增殖苗； 3)将2)中的增殖苗移出组培室，在自然光照条件下炼苗5~7天； 4)将炼苗后的增殖苗剪成单个芽，芽基部用100~150mg/L IBA浸泡50~70min后，扦插至温室大棚中的营养杯中。进一步的，步骤I)所述的茎段为马大杂种相思优树当年新生枝条的茎段。进一步的，步骤I)所述的初代培养基为在MS基本培养基中添加有30~40 g/L蔗糖和6~7 g/L琼脂。进一步的，步骤I)所述培养的条件为:温度23~27 °C，光周期为13~15 h光照/9~11 h黑暗，光强为2000~2500 Lx0进一步的，步骤2)所述的增殖培养基为在MS基本培养基中添加有1.0~1.5 mg/L 6-BA、0.1 ~0.3 mg/L NAA,0.1 ~0.2 g/L 活性炭、30 ~40 g/L 蔗糖和 6 ~7 g/L 琼`脂。进一步的，步骤2)所述培养的条件为:温度23~27 °C，光周期为13~15 h光照/9~11 h黑暗，光强为2000~2500 Lx0进一步的，步骤3)所述的营养杯为含有以黄心土为基质的营养杯。进一步的，步骤3)所述温室大棚的培养条件为:温度25~28°C，湿度50%~80%。本专利技术的有益效果是: 本专利技术直接将马大杂种相思增殖苗通过激素处理后，移栽至温室大棚的基质中生根，简化了整个组培生产环节，缩短了生产时间，节省了组培培养空间，降低了生产成本。本专利技术采用瓶外生根，提升了马大杂种相思组培苗的质量。本专利技术采用瓶外生根，将马大杂种相思增殖苗的生根过程与驯化过程结合到一起，提高了组培苗存活率，加速了种苗繁殖的进程，有利于实现马大杂种相思的工厂化育苗。本专利技术对其他木本科植物工厂化育苗的生根提供了一定的参考价值。【专利附图】【附图说明】图1为马大杂种相思组培苗的瓶外生根图，A增殖培养45天高约4~5 cm的马大杂种相思增殖苗，B为剪取的组培苗用激素溶液浸泡，C、D均为在温室大棚内生长的瓶外生根苗。【具体实施方式】以下结合具体实施例对本专利技术作进一步的说明，但并不局限于此。实施例1: 一、瓶外生根I)材料:选取干形通直、生长量大、抗风的马大杂种相思优树AMA12001，以当年新生枝条的腋芽为外植体，消毒，将茎段接入初代培养基(为在MS基本培养基中添加有30~40 g/L蔗糖和6~7 g/L琼脂)内进行初代培养30~35天，使腋芽长高至3cm左右，其中培养条件为:温度23~27 °C，光周期为13~15 h光照/9~11 h黑暗，光强为2000~2500Lx ； 剪取初代培养后的腋芽，接种至增殖培养基(为在MS基本培养基中添加有1.5 mg/L6-BA、0.lmg/LNAA、0.1 g/L活性炭、30 g/L蔗糖和7 g/L琼脂)，瓶外生根选用增殖培养45天，使腋芽长成高约4~5 cm的增殖苗(如图1 A所示)，培养条件同初代培养条件。2)生根处理与移栽:高约4~5 cm的增殖苗移出组培室，在自然光照条件下炼苗5~7天，将炼苗后的增殖苗剪成单个芽，在不同激素不同浓度的处理液中浸泡(浸泡图如图1 B所示)一定的时间后，移出组培室，在自然光照条件下炼苗5~7天，其中激素选取IBA、NAA、ABT，激素浓度选择 100 mg/L,200 mg/L,400 mg/L，浸泡时间选择 I h、2 h、4 h，设置1^9 (33)的正交试验，共9组实验，如表1所示。处理后的增殖苗移栽至大棚内基质为黄心土的营养杯中，每组试验3次重复，每次重复50株，控制大棚温度24~30°C，湿度50%~80%, 30天后调查统计。表1激素种类、激素浓度以及浸泡时间对瓶外生根的影响【权利要求】1.，其特征在于:包括以下步骤: 1)以马大杂种相思优树枝条为材料，剪取含本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种马大杂种相思瓶外生根的培养方法，其特征在于：包括以下步骤：?1）以马大杂种相思优树枝条为材料，剪取含腋芽茎段作为外植体，消毒后接入初代培养基，培养30～35天，至腋芽高2～3cm；2）剪取1）中的腋芽，接入增殖培养基中，培养40～45天，使腋芽长成高4～5cm的增殖苗；3）将2）中的增殖苗移出组培室，在自然光照条件下炼苗5～7天；?4）将炼苗后的增殖苗剪成单个芽，芽基部用100～150?mg/L?IBA浸泡50～70min后，扦插至温室大棚中的营养杯中。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：胡峰，黄烈健，施琼，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院热带林业研究所，
类型：发明
国别省市：