本发明专利技术提供了一种猪殃殃中环烯醚萜苷提取物及其提取方法和医药用途，所述方法以植物猪殃殃为原料，经含水乙醇回流提取或浸渍提取，浓缩液经大孔吸附树脂处理，40-60%乙醇洗脱部位经凝胶柱和反相硅胶柱纯化，制得6-O-乙酰鸡屎藤次苷和6α-甲氧基京尼平苷酸，纯度达90%以上。该方法原料充足，操作简便，高效环保，适合规模化制备6-O-乙酰鸡屎藤次苷和6α-甲氧基京尼平苷酸。制备的两种环烯醚萜苷在抗炎和神经保护方面活性良好，具有良好的医药用途。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药
，具体涉及从植物猪殃殃中制备6-0-乙酰鸡屎藤次苷和6 α -甲氧基京尼平苷酸，特别是涉及采用大孔吸附树脂和凝胶或反相硅胶柱层次法制备6-0-乙酰鸡屎藤次苷和6 α -甲氧基京尼平苷酸；以及化合物6-0-乙酰鸡屎藤次苷和6 α -甲氧基京尼平苷酸在抗炎免疫和神经保护方面的医药用途。
技术介绍
据《中华本草》记载，猪殃殃，又名八仙草，拉拉藤，锯子草，小锯藤，小茜草，小飞扬藤，红丝线，血见愁，小舒筋，小血藤等，是菌草科拉拉藤属植物猪殃殃Galium aparineL.的全草，广泛分布于全国各地，为田间常见杂草。猪殃殃有清热解毒，利尿通淋，消肿止痛的功效，主治痈疽肿毒，乳腺炎，阑尾炎，水肿，感冒发热，痢疾，尿路感染等。拉拉藤属植物含有环烯醚萜、蒽醌和黄酮类成分，前期的研究中发现猪殃殃含有蒽醌、酚酸、黄酮、三萜等成分，其环烯醚萜类成分具有抗肿瘤、抗病毒、神经保护、抗炎抑菌、降血糖等药理活性(蔡小梅，猪殃殃化学成分的研究，贵州大学硕士论文，2009;刘净，等.海峡药学，2004，16(1):14-19)。京尼平苷(geniposide)具有良好的抗肿瘤、保肝利胆、降血脂、抗炎镇痛、治疗风湿、抗氧化的药理作用，特别是营养神经和神经保护方面应用前景广阔。京尼平苷是一种新的GLP-1受体激动剂，能够提高细胞的抗氧化能力。京尼平苷及苷元京尼平(genipin)明显提高AD模型动物的学习记忆能力，改善认知功能状态,认为其在对抗Α β毒性作用、抗氧化应激、抗内质网应激及抗炎等多方面具有良好效果，并能促进神经生长，修复受损神经元(王磊，等.中国药理学通报，2012，28 (5):604-607)。环烯醚萜类化合物在神经保护方面具有良好的 研究潜力。猪殃殃为田间常见杂草，资源丰富，前期研究发现该植物富含环烯醚萜类成分，6-0-乙酰鸡屎藤次苷和6 α -甲氧基京尼平苷酸的良好来源。大孔吸附树脂、凝胶、反相硅胶联合使用是纯化环烯醚萜苷类成分常用的填料，合理组合上述几种填料是制备环烯醚萜苷的有效方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种成本低廉、高效环保地制备活性天然化合物6-0-乙酰鸡屎藤次苷和6 α -甲氧基京尼平苷酸的方法及其在抗炎和神经保护方面的应用。本专利技术通过以下技术方案实现:一种猪殃殃中环烯醚萜苷提取物，是通过下述方法制得:以植物猪殃殃为原料，经柱层析方法得到猪殃殃中环烯醚萜苷提取物，即6-0-乙酰鸡屎藤次苷和6 α -甲氧基京尼平苷酸。本专利技术还公开了所述提取物的制备方法:以植物猪殃殃为原料，干燥粉碎后提取；提取液减压浓缩至无醇味，经大孔吸附树脂除杂，含水乙醇洗脱，含有6-0-乙酰鸡屎藤次苷和6 α -甲氧基京尼平苷酸的部位蒸除溶剂后经凝胶柱或反相硅胶柱纯化，或经中压制备柱纯化，得到猪殃殃中环烯醚萜苷提取物，即6-0-乙酰鸡屎藤次苷和6 α -甲氧基京尼平苷酸。具体的制备方法是:将猪殃殃全草，晒干，粉碎，用10-20倍量的50~75%(ν/ν，下同)的含水乙醇提取2~3次，合并提取液，减压浓缩至无醇味，静置过夜后上DIAION ΗΡ20或AMBERLITE XAD16N或AB-8大孔吸附树脂，依次用3~5倍体积的水梯度乙醇洗脱。其中40-60%乙醇洗脱部位减压浓缩，回收溶剂后经Toyopeal HW-40C或S印hadex LH20初步纯化，用50~90%甲醇(v/v)洗脱，含有目标成分的部位经ODS柱层析纯化，5-45%甲醇梯度洗脱，TLC跟踪，合并相同点，分别浓缩至少量液体，静置，析出白色结晶，即分别得到6-0-乙酰鸡屎藤次苷和6 α -甲氧基京尼平苷酸的单体化合物。或经ODS柱处理过得样品经中压制备柱纯化，用10-50%甲醇洗脱，流速3-7mL/min，经HPLC或TLC检测，纯度符合要求的流分合并，蒸除溶剂得到6-0-乙酰鸡屎藤次苷和6 α -甲氧基京尼平苷酸。本专利技术还公开了在上述提取物在制备抗炎免疫和神经保护药物中的应用。本专利技术中所制得的6-0-乙酰鸡屎藤次苷和6α-甲氧基京尼平苷酸纯度经HPLC归一化法测定，含量均在90%以上。采用本方法，制备6-0-乙酰鸡屎藤次苷得率为0.08-0.11%，6α -甲氧基京尼平苷酸得率为0.016-0.021%。【附图说明】图1两种环烯醚萜苷的HPLC图；(流动相甲醇:含冰醋酸5%水=15:85 ;流速0.8mL/min ;检测波长 235 nm)。图2是6-0-乙酰鸡 屎藤次苷(I)和6 α -甲氧基京尼平苷酸(2)的结构。【具体实施方式】下面的实施例和生物活性实验是对本专利技术的进一步详细说明，以下所列举的实施例不以任何方式构成限制。实施例1猪殃殃药材10kg，干燥、粉碎后用120kg70%乙醇室温下浸泡3次，每次48小时。合并提取液，减压浓缩至无醇味，再上AB-8大孔树脂，分别用水洗，40%乙醇洗脱，TLC跟踪，合并相同点，浓缩、过滤后上S印hadex LH-20凝胶柱(70%甲醇)。TLC跟踪，合并相同点。再上反向硅胶柱，用5%至45%甲醇梯度洗脱。其中10%甲醇部位TLC跟踪，相同点合并，浓缩后得6-0-乙酰鸡屎藤次苷(10.0克);30%甲醇部位TLC跟踪，分别相同点合并，浓缩后得6α-甲氧基京尼平苷酸1.8克。实施例2猪殃殃药材5kg，干燥、粉碎后用50kg70%乙醇回流提取3次，每次2小时。合并提取液，减压浓缩至无醇味，再上DIAION HP20大孔树脂，分别用水洗，40%乙醇洗脱，TLC跟踪，合并相同点，浓缩、过滤后上HW-40C凝胶柱(50%甲醇)。TLC跟踪，合并相同点。再上反向硅胶柱，用5%，30%和45%甲醇梯度洗脱。其中5%甲醇部位TLC跟踪，相同点合并，浓缩后得6-0-乙酰鸡屎藤次苷(4.3克);30%甲醇部位TLC跟踪，相同点合并，浓缩后得6 α -甲氧基京尼平苷酸0.8克。实施例3猪殃殃药材2kg，干燥、粉碎后用20kg70%乙醇回流提取3次，每次2小时。合并提取液，减压浓缩至无醇味后上AMBERLITE XAD16N大孔树脂柱，依次用5倍体积的水、5倍体积的50%乙醇和3倍体积的95%乙醇洗脱。其中50%乙醇洗脱部位减压浓缩，回收溶剂，所得流浸膏再次经AMBERLITE XAD16N大孔树脂柱除杂，依次用5%乙醇和50%乙醇洗脱。50%乙醇部位浓缩，得到土色固体。经反相硅胶柱层析处理，用含水甲醇梯度洗脱，45%部位经中压制备纯化，洗脱液流速5mL/min，根据两种成分的出峰时间分别收集流出液，浓缩至少量液体静置过夜，分别析出白色结晶，6 α -甲氧基京尼平苷酸0.41g和6-0-乙酰鸡屎藤次苷2.2g。经HPLC归一化法测定，两种化合物纯度均高于90%。HPLC图见附图1。两个化合物的结构如图2，波谱数据如下:6-0-乙酰鸡屎藤次苷(1):白色结晶，Molish反应呈阳性。ES1-MS:m/z43L4[M-H 1-NMR (600MHz, DMS0_d6): δ 2.03 (3H, s, _C0CH3)，2.97 (1H, dd, J=8.4，5.4Hz, H_9), 3.03 (1H, td, J=9.0，5.4Hz, H_5)，3.14-3.68 (6H, m, sugar H)，4.本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种猪殃殃中环烯醚萜苷提取物，其特征在于通过下述方法制得：以植物猪殃殃为原料，经柱层析方法得到猪殃殃中环烯醚萜苷提取物，即6?O?乙酰鸡屎藤次苷和6α?甲氧基京尼平苷酸。
【技术特征摘要】
1.一种猪殃殃中环烯醚萜苷提取物，其特征在于通过下述方法制得:以植物猪殃殃为原料，经柱层析方法得到猪殃殃中环烯醚萜苷提取物，即G-O-乙酰鸡屎藤次苷和6 a -甲氧基京尼平苷酸。2.权利要求1所述猪殃殃中环烯醚萜苷提取物的提取方法，其特征在于:以植物猪殃殃为原料，干燥粉碎后提取；提取液减压浓缩至无醇味，经大孔吸附树脂除杂，含水乙醇洗脱，含有6-0-乙酰鸡屎藤次苷和6 a -甲氧基京尼平苷酸的部位蒸除溶剂后经凝胶柱或反相硅胶柱纯化，或经中压制备柱纯化，得到猪殃殃中环烯醚萜苷提取物，即e-ο-乙酰鸡屎藤次苷和6 a -甲氧基京尼平苷酸...
【专利技术属性】
技术研发人员：汤建，杨守士，龚玺，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：
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